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马链球菌兽疫亚种间接ELISA诊断方法的建立与应用
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马链球菌兽疫亚种间接ELISA诊断方法的建立与应用
论文目录
摘要
第1-9页
ABSTRACT
第9-11页
英文缩写词表
第11-12页
第一篇 文献综述
第12-36页
第一章 马链球菌兽疫亚种的研究进展
第12-36页
1 流行病学特征
第12-15页
· 猪链球菌病的流行病学
第12-13页
· 马链球菌的流行病学
第13-15页
2 马链球菌的病原学
第15-16页
· 病原学总述
第15页
· 兽疫亚种的病原学
第15-16页
3 临床症状及病理变化
第16-17页
4 常见毒力因子与致病机理
第17-24页
· 类M蛋白
第17-20页
· 金属结合脂蛋白
第20-21页
· IgG结合蛋白
第21页
· 纤维结合素结合蛋白
第21-22页
· 链激酶
第22-23页
· 透明质酸荚膜
第23-24页
5 猪链球菌病的诊断
第24-28页
· 分离培养及生化鉴定
第24-25页
· 血清学鉴定
第25-27页
· 分子生物学鉴定
第27-28页
6 猪链球菌病的防治
第28-31页
· 管理因素
第28-29页
· 治疗和控制
第29-31页
参考文献
第31-36页
第二篇 试验研究
第36-81页
第一章 马链球菌兽疫亚种Szp基因的克隆与表达
第36-52页
摘要
第36页
1 材料
第36-37页
· 菌株与质粒
第36页
· 主要酶和试剂
第36-37页
· 主要仪器设备
第37页
2 试验方法
第37-44页
· 引物设计及合成
第37页
· 模板DNA的提取
第37页
· PCR扩增目的片段
第37-38页
· PCR扩增产物的回收
第38页
· 目的基因的A/T克隆
第38-40页
· Szp基因与表达载体pET-28a(+)的连接
第40-41页
· 重组质粒pET-28a(+)-Szp的双酶切鉴定
第41页
· 阳性重组质粒转化表达用感受态细胞
第41页
· 重组蛋白的诱导表达与纯化
第41-43页
· 蛋白的凝胶过滤层析
第43页
· 重组蛋白的免疫原性鉴定
第43-44页
3 试验结果
第44-48页
· PCR扩增目的基因
第44页
· 重组质粒的PCR鉴定和双酶切鉴定结果
第44-46页
· 测序结果
第46页
· 重组蛋白的表达结果
第46-47页
· 重组蛋白纯化的结果
第47-48页
· 重组蛋白的免疫原性鉴定
第48页
4 讨论
第48-49页
参考文献
第49-50页
ABSTRACT
第50-52页
第二章 马链球菌兽疫亚种间接ELISA试剂盒的研制及应用
第52-70页
摘要
第52页
1 试验材料
第52-53页
· 菌株和血清
第52-53页
· 主要试剂和耗材
第53页
· 主要试验仪器
第53页
· ELISA相关溶液的配制
第53页
2 试验方法
第53-57页
· 重组类M蛋白的定量分析
第53-54页
· 重组蛋白抗原最佳包被浓度和血清最佳稀释度的确定
第54页
· 封闭液的确定
第54页
· 血清稀释液的确定
第54页
· 血清最佳反应时间的确定
第54-55页
· 酶标二抗反应时间的确定
第55页
· 底物的最佳反应时间的确定
第55页
· 确定ELISA最佳操作程序
第55页
· 间接ELISA检测试剂盒的组建
第55页
· 间接ELISA检测试剂盒的敏感性试验
第55-56页
· 间接ELISA检测试剂盒的特异性试验
第56页
· 重复性试验
第56页
· 保存期试验
第56-57页
· 反应板破坏性试验
第57页
· ELISA判定标准的确定
第57页
3 试验结果
第57-66页
· 类M蛋白浓度测定的结果
第57-58页
· 抗原最佳包被浓度和血清最佳稀释度的确定
第58-59页
· 封闭液的确定
第59-60页
· 血清稀释液的确定
第60页
· 血清最佳反应时间的确定
第60-61页
· 酶标二抗反应时间的确定
第61页
· 底物的最佳反应时间的确定
第61-62页
· 敏感性试验
第62页
· 特异性试验
第62-63页
· 重复性试验
第63-65页
· 保存期试验
第65页
· 反应板破坏性试验
第65页
· ELISA判定标准的确定
第65-66页
4 讨论
第66-67页
参考文献
第67-68页
ABSTRACT
第68-70页
第三章 马链球菌兽疫亚种间接ELISA诊断试剂盒的应用、血清流行病学调查与分析验证
第70-81页
摘要
第70页
1 试验材料
第70-71页
· 试剂
第70-71页
· 待检血清来源
第71页
2 试验方法
第71-72页
· ELISA操作规程
第71-72页
· 分析与验证
第72页
· 血清流行病学调查
第72页
3 试验结果
第72-77页
· 分析与验证结果
第72-73页
· 清流行病学调查结果
第73-76页
· 对大型家畜的血清流行病学调查
第76-77页
4 结果讨论
第77-79页
参考文献
第79-80页
ABSTRACT
第80-81页
全文总结
第81-82页
附录
第82-86页
致谢
第86 页
本篇论文共
86
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