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胡萝卜软腐果胶杆菌致病相关基因的功能分析

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胡萝卜软腐果胶杆菌致病相关基因的功能分析
论文目录
 
摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
上篇 文献综述第11-29页
  第一章 彩色马蹄莲细菌性软腐病的研究进展第12-24页
    1 彩色马蹄莲细菌性软腐病的概述第12-13页
      · 病原第12-13页
      · 病害症状第13页
      · 病原菌的传播第13页
    2 病原菌的致病过程第13-14页
    3 彩色马蹄莲细菌性软腐病的防治第14-16页
      · 农业防治第14-15页
      · 选种无病材料第15页
      · 选育抗性品种第15-16页
      · 化学防治第16页
      · 生物防治第16页
    4 病原菌的致病机理第16-24页
      · 病原菌的致病因子第17-19页
      · 黏附素和生物膜的形成第19页
      · 胞外多糖和脂多糖第19-21页
      · 游动性第21页
      · 对活性氧的抗性第21-22页
      · 植物毒素第22页
      · hrp基因第22-24页
  第二章 Clp蛋白酶的研究进展第24-29页
    1 各种生物的Clp蛋白第24-25页
    2 Clp蛋白酶的结构第25-26页
    3 Clp蛋白酶的作用机制第26页
    4 Clp蛋白酶生物学功能第26-29页
      · Clp蛋白酶控制胞内蛋白质的质量第27-28页
      · Clp蛋白可影响细菌的毒力第28-29页
下篇 研究内容第29-76页
  第一章 胡萝卜软腐果胶杆菌中clpP基因的功能分析第30-62页
    摘要第30-31页
    1 试验材料第31-34页
      · 供试菌株和质粒第31-32页
      · 培养基及抗生素第32-33页
      · 引物第33-34页
    2 试验方法第34-48页
      · 质粒的提取第34-35页
      · 细菌基因组DNA的大量提取第35-36页
      · DNA凝胶电泳及DNA片段浓度、大小测算第36页
      · DNA酶切、连接和PCR产物回收第36页
      · 质粒DNA的转化第36-37页
      · Southern杂交第37-41页
      · clpP缺失突变体的构建第41-43页
      · 互补菌株的构建及验证第43页
      · 细胞形态和鞭毛观察第43页
      · 游动性试验第43页
      · 细菌沉降性试验第43-44页
      · 胞外酶的检测第44页
      · 生物膜的检测第44-45页
      · 生长曲线测定第45页
      · 突变体抗氧化压力测定第45页
      · 致病性和过敏性反应测定第45-46页
      · 体内定殖能力测定第46页
      · 总RNA的提取及qRT-PCR检测第46-48页
    3 结果与分析第48-60页
      · clpP上下游片段基因的克隆第48页
      · clpP突变株的构建第48-50页
      · 互补菌株的构建第50-51页
      · clpP基因突变不影响PccS1鞭毛合成和运动性第51-52页
      · clpP基因突变后不产生沉降现象第52页
      · clpP基因突变后影响胞外蛋白酶、果胶酶和纤维素酶的产生第52-53页
      · clpP基因突变降低了生物膜的产生第53-54页
      · 不同培养基上clpP基因的突变影响PccS1正常生长第54-55页
      · 随着温度升高clpP基因的突变影响PccS1正常生长第55-56页
      · clpP基因突变降低PccS1抗氧化压力能力第56页
      · clpP基因突变影响PccS1致病性,但不影响过敏性反应第56-58页
      · clpP基因突变影响菌株在大白菜体内增殖能力第58-59页
      · qRT-PCR检测结果第59-60页
    4 讨论与结论第60-62页
  第二章 胡萝卜软腐果胶杆菌中aspA、hsl和ugpB基因的功能分析第62-76页
    摘要第62-63页
    1 试验材料第63-65页
      · 供试菌株和质粒第63-64页
      · 培养基及抗生素第64-65页
      · 引物第65页
    2 试验方法第65-68页
      · 质粒的提取第65-66页
      · 细菌基因组DNA的提取第66页
      · DNA凝胶电泳及DNA片段浓度、大小测算第66页
      · DNA酶切、连接和PCR产物回收第66页
      · 质粒DNA的转化第66页
      · 缺失突变体的构建第66-67页
      · 过表达菌株的构建及验证第67页
      · 游动性试验第67页
      · 细菌沉降性试验第67-68页
      · 胞外酶的检测第68页
      · 生物膜的检测第68页
      · 生长曲线测定第68页
      · 致病性的测定第68页
    3 结果与分析第68-73页
      · aspA、hsl和ugpB基因的克隆第68-69页
      · aspA、hsl和ugpB基因突变株的构建第69-70页
      · aspA、hsl和ugpB基因过表达菌株的构建第70页
      · aspA、hsl和ugpB基因突变不影响PccS1的游动性第70-71页
      · aspA、hsl和ugpB基因突变后不产生沉降现象第71页
      · aspA、hsl和ugpB基因突变后不影响胞外酶的产生第71-72页
      · aspA、hsl和ugpB基因与生物膜的形成无关第72页
      · aspA、hsl和ugpB基因突变不影响PccS1生长能力第72-73页
      · aspA、hsl和ugpB基因突变不影响PccS1致病性第73页
    4 讨论与结论第73-76页
      · aspA基因与胡萝卜软腐果胶杆菌致病性不相关第74页
      · hsl基因与胡萝卜软腐果胶杆菌致病性不相关第74页
      · ugpB基因与胡萝卜软腐果胶杆菌致病性不相关第74-76页
全文总结第76-78页
参考文献第78-86页
攻读学位期间发表的学术论文第86-88页
致谢第88 页

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