论文目录 | |
摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
上篇 文献综述 | 第11-29页 |
第一章 彩色马蹄莲细菌性软腐病的研究进展 | 第12-24页 |
1 彩色马蹄莲细菌性软腐病的概述 | 第12-13页 |
· 病原 | 第12-13页 |
· 病害症状 | 第13页 |
· 病原菌的传播 | 第13页 |
2 病原菌的致病过程 | 第13-14页 |
3 彩色马蹄莲细菌性软腐病的防治 | 第14-16页 |
· 农业防治 | 第14-15页 |
· 选种无病材料 | 第15页 |
· 选育抗性品种 | 第15-16页 |
· 化学防治 | 第16页 |
· 生物防治 | 第16页 |
4 病原菌的致病机理 | 第16-24页 |
· 病原菌的致病因子 | 第17-19页 |
· 黏附素和生物膜的形成 | 第19页 |
· 胞外多糖和脂多糖 | 第19-21页 |
· 游动性 | 第21页 |
· 对活性氧的抗性 | 第21-22页 |
· 植物毒素 | 第22页 |
· hrp基因 | 第22-24页 |
第二章 Clp蛋白酶的研究进展 | 第24-29页 |
1 各种生物的Clp蛋白 | 第24-25页 |
2 Clp蛋白酶的结构 | 第25-26页 |
3 Clp蛋白酶的作用机制 | 第26页 |
4 Clp蛋白酶生物学功能 | 第26-29页 |
· Clp蛋白酶控制胞内蛋白质的质量 | 第27-28页 |
· Clp蛋白可影响细菌的毒力 | 第28-29页 |
下篇 研究内容 | 第29-76页 |
第一章 胡萝卜软腐果胶杆菌中clpP基因的功能分析 | 第30-62页 |
摘要 | 第30-31页 |
1 试验材料 | 第31-34页 |
· 供试菌株和质粒 | 第31-32页 |
· 培养基及抗生素 | 第32-33页 |
· 引物 | 第33-34页 |
2 试验方法 | 第34-48页 |
· 质粒的提取 | 第34-35页 |
· 细菌基因组DNA的大量提取 | 第35-36页 |
· DNA凝胶电泳及DNA片段浓度、大小测算 | 第36页 |
· DNA酶切、连接和PCR产物回收 | 第36页 |
· 质粒DNA的转化 | 第36-37页 |
· Southern杂交 | 第37-41页 |
· clpP缺失突变体的构建 | 第41-43页 |
· 互补菌株的构建及验证 | 第43页 |
· 细胞形态和鞭毛观察 | 第43页 |
· 游动性试验 | 第43页 |
· 细菌沉降性试验 | 第43-44页 |
· 胞外酶的检测 | 第44页 |
· 生物膜的检测 | 第44-45页 |
· 生长曲线测定 | 第45页 |
· 突变体抗氧化压力测定 | 第45页 |
· 致病性和过敏性反应测定 | 第45-46页 |
· 体内定殖能力测定 | 第46页 |
· 总RNA的提取及qRT-PCR检测 | 第46-48页 |
3 结果与分析 | 第48-60页 |
· clpP上下游片段基因的克隆 | 第48页 |
· clpP突变株的构建 | 第48-50页 |
· 互补菌株的构建 | 第50-51页 |
· clpP基因突变不影响PccS1鞭毛合成和运动性 | 第51-52页 |
· clpP基因突变后不产生沉降现象 | 第52页 |
· clpP基因突变后影响胞外蛋白酶、果胶酶和纤维素酶的产生 | 第52-53页 |
· clpP基因突变降低了生物膜的产生 | 第53-54页 |
· 不同培养基上clpP基因的突变影响PccS1正常生长 | 第54-55页 |
· 随着温度升高clpP基因的突变影响PccS1正常生长 | 第55-56页 |
· clpP基因突变降低PccS1抗氧化压力能力 | 第56页 |
· clpP基因突变影响PccS1致病性,但不影响过敏性反应 | 第56-58页 |
· clpP基因突变影响菌株在大白菜体内增殖能力 | 第58-59页 |
· qRT-PCR检测结果 | 第59-60页 |
4 讨论与结论 | 第60-62页 |
第二章 胡萝卜软腐果胶杆菌中aspA、hsl和ugpB基因的功能分析 | 第62-76页 |
摘要 | 第62-63页 |
1 试验材料 | 第63-65页 |
· 供试菌株和质粒 | 第63-64页 |
· 培养基及抗生素 | 第64-65页 |
· 引物 | 第65页 |
2 试验方法 | 第65-68页 |
· 质粒的提取 | 第65-66页 |
· 细菌基因组DNA的提取 | 第66页 |
· DNA凝胶电泳及DNA片段浓度、大小测算 | 第66页 |
· DNA酶切、连接和PCR产物回收 | 第66页 |
· 质粒DNA的转化 | 第66页 |
· 缺失突变体的构建 | 第66-67页 |
· 过表达菌株的构建及验证 | 第67页 |
· 游动性试验 | 第67页 |
· 细菌沉降性试验 | 第67-68页 |
· 胞外酶的检测 | 第68页 |
· 生物膜的检测 | 第68页 |
· 生长曲线测定 | 第68页 |
· 致病性的测定 | 第68页 |
3 结果与分析 | 第68-73页 |
· aspA、hsl和ugpB基因的克隆 | 第68-69页 |
· aspA、hsl和ugpB基因突变株的构建 | 第69-70页 |
· aspA、hsl和ugpB基因过表达菌株的构建 | 第70页 |
· aspA、hsl和ugpB基因突变不影响PccS1的游动性 | 第70-71页 |
· aspA、hsl和ugpB基因突变后不产生沉降现象 | 第71页 |
· aspA、hsl和ugpB基因突变后不影响胞外酶的产生 | 第71-72页 |
· aspA、hsl和ugpB基因与生物膜的形成无关 | 第72页 |
· aspA、hsl和ugpB基因突变不影响PccS1生长能力 | 第72-73页 |
· aspA、hsl和ugpB基因突变不影响PccS1致病性 | 第73页 |
4 讨论与结论 | 第73-76页 |
· aspA基因与胡萝卜软腐果胶杆菌致病性不相关 | 第74页 |
· hsl基因与胡萝卜软腐果胶杆菌致病性不相关 | 第74页 |
· ugpB基因与胡萝卜软腐果胶杆菌致病性不相关 | 第74-76页 |
全文总结 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-86页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第86-88页 |
致谢 | 第88
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