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胡萝卜软腐果胶杆菌中受马蹄莲组织提取液诱导表达基因的克隆及功能分析

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胡萝卜软腐果胶杆菌中受马蹄莲组织提取液诱导表达基因的克隆及功能分析
论文目录
 
摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
上篇 文献综述第12-36页
  前言第13-15页
  第一章 植物与病原细菌的互作第15-21页
    1 植物细菌病害第15页
    2 植物与病原细菌的互作第15-21页
      · 病原细菌的无毒基因(avr)第16-17页
      · 植物的抗病基因(R)第17页
      · avr基因与R基因互作的模式第17-18页
      · 病原细菌的hrp基因及产物第18-21页
  第二章 胡萝卜软腐果胶杆菌的致病机理第21-36页
    1 胡萝卜软腐果胶杆菌介绍第21-22页
    2 马蹄莲细菌性软腐病第22-24页
      · 马蹄莲简介第22页
      · 马蹄莲细菌性软腐病第22-24页
    3 软腐果胶杆菌的致病因子第24-27页
      · 果胶酶第24-25页
      · 蛋白酶和纤维素酶第25页
      · 运动性第25-26页
      · Nip蛋白第26页
      · Svx蛋白第26-27页
      · 对寄主活性氧的抵御第27页
    4 致病因子的分泌第27-29页
      · Ⅰ型分泌系统第27-28页
      · Ⅱ型分泌系统第28-29页
      · Ⅲ型分泌系统第29页
    5 致病因子的调控第29-33页
    6 寄主植物的防卫反应第33-36页
下篇 研究内容第36-83页
  第一章 胡萝卜软腐果胶杆菌PccS1中受马蹄莲组织提取液诱导表达基因的筛选第37-53页
    摘要第37-38页
    1 实验材料第38-39页
      · 菌株、质粒第38页
      · 酶、抗生素第38-39页
      · 培养基第39页
      · 引物第39页
    2 方法第39-47页
      · 细菌基因组DNA提取第39-41页
      · 质粒DNA的提取第41-42页
      · DNA酶切、连接第42页
      · 大肠杆菌化学感受态细胞的制备及转化第42-43页
      · 菌株PccS1转座子随机插入文库的构建及验证第43-45页
      · 受马蹄莲组织提取液诱导表达突变株的致病性测定第45页
      · 突变株转座子插入位点的确定第45-47页
    3 结果分析第47-51页
      · 受马蹄莲组织提取液诱导表达突变株的获得第47-48页
      · 突变株致病性测定第48-49页
      · 马蹄莲组织提取液对突变株的诱导第49页
      · mariner转座子在突变株中插入位点的鉴定第49-51页
    4 讨论第51-53页
  第二章 rplY基因的敲除及突变体特性的研究第53-71页
    摘要第53页
    1 实验材料第53-55页
      · 菌株、质粒第53-54页
      · 酶、抗生素第54页
      · 培养基第54页
      · 引物第54-55页
    2 方法第55-61页
      · PccS1中rplY基因的定向敲除第55-57页
      · ΔrplY互补菌株ΔrplY(rplY)的构建及验证第57-59页
      · 致病性测定第59-60页
      · 生长速率测定第60页
      · 游动性测定第60页
      · 沉降速率测定第60页
      · 生物膜的检测第60-61页
      · 胞外酶测定第61页
      · 菌体形态和鞭毛观察第61页
    3 结果分析第61-69页
      · 重组载体pEXrplY的构建及验证第61-62页
      · PccS1的rplY突变体的构建及验证第62-63页
      · 互补菌株ΔrplY(rplY)的构建及验证第63-64页
      · rplY突变减弱了PccS1的致病性第64-66页
      · rplY突变影响PccS1的正常生长第66页
      · rplY突变降低了PccS1的运动能力第66-67页
      · rplY突变不影响PccS1的生物膜形成能力第67-68页
      · rplY突变降低了PccS1胞外酶的产生第68页
      · rplY突变不影响PccS1的菌体形态以及影响鞭毛合成第68-69页
    4 讨论第69-71页
  第三章 ubiG基因的敲除及突变体特性的研究第71-83页
    摘要第71页
    1 实验材料第71-73页
      · 菌株、质粒第71-72页
      · 酶、抗生素第72页
      · 培养基第72页
      · 引物第72-73页
    2 方法第73-74页
      · PccS1中ubiG基因的定向敲除第73页
      · ubiG互补菌株ΔubiG(ubiG)的构建及验证第73页
      · 致病相关表型测定第73-74页
      · 抗生素耐受性测定第74页
    3 结果分析第74-81页
      · 重组载体pEXubiG的构建及验证第74-75页
      · ubiG基因突变体的构建及验证第75页
      · AubiG互补菌株AubiG(ubiG)的构建及验证第75-76页
      · ubiG突变减弱了PccS1的致病性第76-77页
      · ubiG突变影响PccS1的正常生长第77-78页
      · ubiG突变加速了菌体沉降第78页
      · ubiG突变降低了PccS1的生物膜形成能力第78-79页
      · ubiG突变增强了PccS1对链霉素和新霉素的抗性第79-80页
      · ubiG突变降低了PccS1胞外酶的产生第80页
      · ubiG突变不影响PccS1的菌体形态以及鞭毛合成第80-81页
    4 讨论第81-83页
第四章 全文总结第83-85页
参考文献第85-97页
攻读硕士期间已发表和待发表的文章第97-99页
致谢第99 页

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