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脑心肌炎病毒VP1蛋白间接ELISA抗体检测方法与灭活疫苗研究
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脑心肌炎病毒VP1蛋白间接ELISA抗体检测方法与灭活疫苗研究
论文目录
目录
第1-8页
摘要
第8-10页
ABSTRACT
第10-13页
第一章 脑心肌炎研究进展
第13-29页
1 病原学
第13-15页
2 流行病学
第15-16页
3 致病机理
第16-18页
4 诊断技术
第18-19页
· 病毒分离
第18页
· 血清学检测技术
第18-19页
· 病原学检测技术
第19页
5 疫苗
第19-21页
· 灭活疫苗
第20页
· 弱毒疫苗
第20页
· 单位疫苗
第20-21页
· 核酸疫苗
第21页
6 防治
第21-22页
参考文献
第22-29页
第二章 脑心肌炎病毒VP1基因原核表达与蛋白纯化
第29-45页
摘要
第29页
1 材料
第29-30页
· 病毒、细菌及载体质粒
第29页
· 主要试剂
第29-30页
· 主要仪器
第30页
2 方法
第30-34页
· EMCV VP1基因引物设计与合成
第30页
· 病毒基因组的提取
第30-31页
· RT-PCR
第31页
· 原核表达载体的构建与鉴定
第31-32页
· 重组质粒pET-32a-VP1在大肠杆菌中的诱导表达与鉴定
第32页
· 重组蛋白诱导表达条件的优化
第32-33页
· 重组蛋白的大量表达及纯化
第33-34页
· 重组质粒稳定性测定
第34页
3 结果
第34-39页
· pET-32a-VP1原核表达载体的构建与鉴定
第34-35页
· 重组蛋白表达鉴定
第35-36页
· 重组蛋白诱导表达条件优化
第36-38页
· 重组EMCV-VP1蛋白大量表达及纯化
第38-39页
· 重组质粒稳定性研究
第39页
4 讨论
第39-41页
参考文献
第41-43页
ABSTTRACT
第43-45页
第三章 脑心肌炎病毒结构蛋白VP1间接ELISA抗体检测方法的建立与应用
第45-59页
摘要
第45页
1 材料
第45-46页
· 材料与试剂
第45-46页
· 主要仪器
第46页
2 方法
第46-48页
· 间接ELISA反应条件优化
第46-47页
· 特异性试验
第47页
· 重复性试验
第47-48页
· 相对敏感性测定
第48页
· 清样品检测
第48页
3 结果
第48-53页
· ELISA方法的标准化
第48-51页
· 临界值的确定
第51页
· 特异性试验
第51-52页
· 重复性试验
第52页
· 相对敏感性测定
第52-53页
· 血清样品检测
第53页
4 讨论
第53-55页
参考文献
第55-57页
ABSTRACT
第57-59页
第四章 脑心肌炎病毒间接ELISA抗体检测方法关键试剂保存方法及其稳定性的研究
第59-73页
摘要
第59页
1 材料
第59-60页
· 主要试剂
第59页
· 主要仪器
第59-60页
2 方法
第60-62页
· 包被抗原保护剂的筛选和保存期测定
第60页
· 清保护剂的筛选和保存期测定
第60-61页
· 洗涤液保护剂的筛选和保存期测定
第61页
· 酶标SPA稳定性的评价
第61-62页
· TMB显色液的稳定性评价
第62页
3 结果
第62-68页
· 包被抗原保护剂的筛选及酶标板保存期测定
第62页
· 清保护剂的筛选及其保存期测定
第62-65页
· 洗涤液保护剂的筛选及其保存期测定
第65-66页
· 酶标SPA稳定性测定
第66-67页
· TMB显色液的稳定性测定
第67-68页
4 讨论
第68-70页
参考文献
第70-71页
ABSTRACT
第71-73页
第五章 脑心肌炎病毒灭活疫苗制备与免疫效力研究
第73-93页
摘要
第73页
1 材料
第73-74页
· 病毒和细胞
第73-74页
· 实验动物
第74页
· 主要试剂
第74页
· 主要仪器设备
第74页
2 方法
第74-79页
· 病毒增殖
第74页
· 病毒TCID_(50)测定
第74-75页
· EMCV NJ08毒株对Balb/c小LD50测定
第75页
· 灭活条件筛选
第75-76页
· 不同佐剂灭活疫苗的配制
第76页
· 小鼠免疫保护试验
第76-79页
· 仔猪免疫试验
第79页
· 数据统计分析
第79页
3 结果
第79-88页
· 病毒增殖与病毒滴度测定
第79-80页
· 病毒灭活方法的筛选
第80-81页
· 疫苗物理性状
第81-82页
· 疫苗小鼠免疫效果
第82-87页
· 仔猪免疫试验
第87-88页
4 讨论
第88-89页
参考文献
第89-91页
ABSTRACT
第91-93页
全文总结
第93-95页
致谢
第95 页
本篇论文共
95
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