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脑心肌炎病毒VP1蛋白间接ELISA抗体检测方法与灭活疫苗研究
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脑心肌炎病毒VP1蛋白间接ELISA抗体检测方法与灭活疫苗研究
论文目录
 
目录第1-8页
摘要第8-10页
ABSTRACT第10-13页
第一章 脑心肌炎研究进展第13-29页
　　1 病原学第13-15页
　　2 流行病学第15-16页
　　3 致病机理第16-18页
　　4 诊断技术第18-19页
　　　　· 病毒分离第18页
　　　　· 血清学检测技术第18-19页
　　　　· 病原学检测技术第19页
　　5 疫苗第19-21页
　　　　· 灭活疫苗第20页
　　　　· 弱毒疫苗第20页
　　　　· 单位疫苗第20-21页
　　　　· 核酸疫苗第21页
　　6 防治第21-22页
　　参考文献第22-29页
第二章 脑心肌炎病毒VP1基因原核表达与蛋白纯化第29-45页
　　摘要第29页
　　1 材料第29-30页
　　　　· 病毒、细菌及载体质粒第29页
　　　　· 主要试剂第29-30页
　　　　· 主要仪器第30页
　　2 方法第30-34页
　　　　· EMCV VP1基因引物设计与合成第30页
　　　　· 病毒基因组的提取第30-31页
　　　　· RT-PCR第31页
　　　　· 原核表达载体的构建与鉴定第31-32页
　　　　· 重组质粒pET-32a-VP1在大肠杆菌中的诱导表达与鉴定第32页
　　　　· 重组蛋白诱导表达条件的优化第32-33页
　　　　· 重组蛋白的大量表达及纯化第33-34页
　　　　· 重组质粒稳定性测定第34页
　　3 结果第34-39页
　　　　· pET-32a-VP1原核表达载体的构建与鉴定第34-35页
　　　　· 重组蛋白表达鉴定第35-36页
　　　　· 重组蛋白诱导表达条件优化第36-38页
　　　　· 重组EMCV-VP1蛋白大量表达及纯化第38-39页
　　　　· 重组质粒稳定性研究第39页
　　4 讨论第39-41页
　　参考文献第41-43页
　　ABSTTRACT第43-45页
第三章 脑心肌炎病毒结构蛋白VP1间接ELISA抗体检测方法的建立与应用第45-59页
　　摘要第45页
　　1 材料第45-46页
　　　　· 材料与试剂第45-46页
　　　　· 主要仪器第46页
　　2 方法第46-48页
　　　　· 间接ELISA反应条件优化第46-47页
　　　　· 特异性试验第47页
　　　　· 重复性试验第47-48页
　　　　· 相对敏感性测定第48页
　　　　· 清样品检测第48页
　　3 结果第48-53页
　　　　· ELISA方法的标准化第48-51页
　　　　· 临界值的确定第51页
　　　　· 特异性试验第51-52页
　　　　· 重复性试验第52页
　　　　· 相对敏感性测定第52-53页
　　　　· 血清样品检测第53页
　　4 讨论第53-55页
　　参考文献第55-57页
　　ABSTRACT第57-59页
第四章 脑心肌炎病毒间接ELISA抗体检测方法关键试剂保存方法及其稳定性的研究第59-73页
　　摘要第59页
　　1 材料第59-60页
　　　　· 主要试剂第59页
　　　　· 主要仪器第59-60页
　　2 方法第60-62页
　　　　· 包被抗原保护剂的筛选和保存期测定第60页
　　　　· 清保护剂的筛选和保存期测定第60-61页
　　　　· 洗涤液保护剂的筛选和保存期测定第61页
　　　　· 酶标SPA稳定性的评价第61-62页
　　　　· TMB显色液的稳定性评价第62页
　　3 结果第62-68页
　　　　· 包被抗原保护剂的筛选及酶标板保存期测定第62页
　　　　· 清保护剂的筛选及其保存期测定第62-65页
　　　　· 洗涤液保护剂的筛选及其保存期测定第65-66页
　　　　· 酶标SPA稳定性测定第66-67页
　　　　· TMB显色液的稳定性测定第67-68页
　　4 讨论第68-70页
　　参考文献第70-71页
　　ABSTRACT第71-73页
第五章 脑心肌炎病毒灭活疫苗制备与免疫效力研究第73-93页
　　摘要第73页
　　1 材料第73-74页
　　　　· 病毒和细胞第73-74页
　　　　· 实验动物第74页
　　　　· 主要试剂第74页
　　　　· 主要仪器设备第74页
　　2 方法第74-79页
　　　　· 病毒增殖第74页
　　　　· 病毒TCID_(50)测定第74-75页
　　　　· EMCV NJ08毒株对Balb/c小LD50测定第75页
　　　　· 灭活条件筛选第75-76页
　　　　· 不同佐剂灭活疫苗的配制第76页
　　　　· 小鼠免疫保护试验第76-79页
　　　　· 仔猪免疫试验第79页
　　　　· 数据统计分析第79页
　　3 结果第79-88页
　　　　· 病毒增殖与病毒滴度测定第79-80页
　　　　· 病毒灭活方法的筛选第80-81页
　　　　· 疫苗物理性状第81-82页
　　　　· 疫苗小鼠免疫效果第82-87页
　　　　· 仔猪免疫试验第87-88页
　　4 讨论第88-89页
　　参考文献第89-91页
　　ABSTRACT第91-93页
全文总结第93-95页
致谢第95 页

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