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西维因降解菌的分离鉴定、生物学特性及其水解酶基因cehA的克隆

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西维因降解菌的分离鉴定、生物学特性及其水解酶基因cehA的克隆
论文目录
 
摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
符号与缩略语说明第10-11页
前言第11-12页
第一章 文献综述第12-22页
  第一节 氨基甲酸酯类农药概述第12-17页
    1 氨基甲酸酯类农药的化学结构及制毒机理第12-14页
    2 西维因的性质及危害第14-15页
    3 氨基甲酸酯类农药的降解第15-17页
      · 物理降解第15-16页
      · 化学降解第16页
      · 生物降解第16-17页
  第二节 微生物降解氨基甲酸酯类农药的研究进展第17-22页
    1 降解氨基甲酸酯类农药的微生物第17-19页
    2 西维因的微生物降解途径第19-20页
    3 氨基甲酸酯类水解酶及相关基因的克隆表达研究第20-21页
    4 微生物降解氨基甲酸酯类农药展望第21-22页
第二章 西维因降解菌的分离和生物学特性研究第22-38页
  1 材料与方法第22-25页
    · 培养基与菌株第22页
    · 供试农药及化学试剂第22-23页
    · 分析方法第23页
    · 西维因降解菌的分离第23页
    · 西维因降解菌株的鉴定第23-25页
    · 菌体生长量的测定第25页
  2 结果与分析第25-36页
    · 西维因降解菌的分离第25-26页
    · 降解菌株的形态第26-27页
    · 降解菌株的生理生化特征第27-28页
    · 降解菌株的16S rRNA基因扩增第28页
    · 降解菌株的系统发育树分析第28-31页
    · 环境条件对降解菌株生长的影响第31-36页
  3 小结第36-38页
第三章 西维因降解菌株的降解特性研究第38-48页
  第一节 西维因降解菌FX-1、X9对西维因的降解第38-43页
    1 材料与方法第38-39页
      · 培养基与菌株第38页
      · 供试农药及化学试剂第38页
      · 分析方法第38页
      · 菌体生长量的测定第38-39页
      · 种子液培养第39页
    2 结果与讨论第39-43页
      · 菌株FX-1和X9以西维因为唯一碳源的生长和降解第39-40页
      · 温度对菌株FX-1和X9降解西维因的影响第40页
      · 初始pH值对菌株FX-1和X9降解西维因的影响第40-41页
      · 通气量对菌株FX-1和X9降解西维因的影响第41-42页
      · 不同接种量对菌株FX-1和X9降解西维因的影响第42-43页
  第二节 西维因降解菌X9对1-萘酚的降解特性研究第43-47页
    1 材料与方法第43页
      · 培养基与菌株第43页
      · 供试农药及化学试剂第43页
      · 分析方法第43页
      · 菌体生长量的测定第43页
      · 种子液的培养第43页
    2 结果与讨论第43-47页
      · X9对1-萘酚的降解第43-44页
      · 不同接种量对菌株X9降解1-萘酚的影响第44页
      · 温度对菌株X9降解1-萘酚的影响第44-45页
      · 初始pH值对菌株X9降解1-萘酚的影响第45-46页
      · 通气量对菌株X9降解1-萘酚的影响第46-47页
      · 菌株X9对不同浓度的1-萘酚的降解情况第47页
  本章小结第47-48页
第四章 西维因水解酶基因的克隆与表达第48-58页
  1 材料与方法第48-54页
    · 培养基与试剂第48页
    · 菌株与质粒第48-49页
    · 菌体基因组DNA和质粒DNA的提取第49页
    · E.coliDH5α感受态细胞的制备第49-50页
    · 西维因水解酶基因的引物设计与PCR扩增第50-51页
    · PCR产物的T/A克隆第51页
    · 西维因水解酶基因的测定与序列分析第51页
    · PCR产物的纯化及酶切第51页
    · 表达载体pET32a的制备第51-52页
    · 酶连及酶连产物的转化第52页
    · SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析第52-53页
    · 重组子西维因水解酶的酶活检测第53-54页
  2 结果与讨论第54-57页
    · PCR法克隆西维因水解酶基因cehA第54页
    · 西维因水解酶基因cehA核苷酸序列的分析第54-55页
    · cehA基因在E.coli Rosetta-gami(DE3)中的表达第55-57页
  3 小结第57-58页
全文总结第58-60页
参考文献第60-66页
附录一 培养基及试剂配方第66-68页
附录二 相关序列第68-72页
攻读硕士学位期间发表或已接收的论文第72-74页
致谢第74 页

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