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能量限制对肉仔鸡脾脏和法氏囊基因表达效应的研究

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能量限制对肉仔鸡脾脏和法氏囊基因表达效应的研究
论文目录
 
致谢第1-6页
摘要第6-10页
1 文献综述第10-17页
  · 能量限制的作用和意义第10页
  · 肉仔鸡免疫器官及其功能第10-12页
  · 能量限制对生产性能的影响第12页
  · 能量限制对免疫器官及其功能的影响第12-13页
  · 能量限制对差异表达基因的影响第13页
  · 目前研究差异表达基因的方法第13-17页
    · 传统的研究差异表达基因的方法第14页
    1.6.2 mRNA 差异显示技术及其他差异基因分析方法第14-15页
    1.6.3 ACP~(TM)技术和 GeneFishing~(TM)DEG Premix Kits第15-17页
2 试验设计第17-19页
  · 研究的目的和意义第17页
  · 研究内容及方法第17-18页
  · 技术路线第18-19页
3 试验材料与方法第19-29页
  · 材料与方法第19-29页
    · 试验材料第19-20页
      · 试验样本第19页
      · 试验主要仪器第19页
      · 主要试剂第19-20页
      · 工具酶及试剂盒第20页
    · 试验方法第20-29页
      · 常用试剂配置第20-21页
      3.1.2.2 固体和液体 LB 培养基的制备第21页
      3.1.2.3 GenFishing~(TM)DEG Premix Kit 试剂盒中引物第21-22页
      3.1.2.4 脾脏和法氏囊总 RNA 的提取和质量检测方法第22页
        3.1.2.4.1 脾脏和法氏囊总 RNA 的提取第22页
        3.1.2.4.2 脾脏和法氏囊总 RNA 浓度测定第22页
      3.1.2.5 GeneFishing~(TM)RT—PCR 操作方法第22-23页
      · 反转录方法第23页
      3.1.2.7 反转录得 cDNA 检测方法第23-24页
      3.1.2.8 GeneFishing~(TM)差异显示 PCR 方法第24-25页
      · 差异片段回收、克隆、测序方法第25-26页
      3.1.2.10 半定量 RTPCR 二次验证方法第26-28页
      · 差异表达基因序列分析方法第28-29页
4 结果与分析第29-56页
  · 能量限制对肉仔鸡脾脏差异表达基因的影响第29-43页
    4.1.1 脾脏总 RNA 的提取、纯化与检测第29页
    4.1.2 脾脏差异表达 EST第29-38页
      4.1.2.1 第一链 cDNA 质量的检测第29-30页
      4.1.2.2 GeneFishing~(TM)RTPCR 获得的脾脏差异显示片段第30-38页
    · 差异表达基因的生物信息学分析第38-43页
      4.1.3.1 差异表达 EST 在 NCBI 网站进行的 EST 搜索第38-41页
      4.1.3.2 差异表达 EST 在 NCBI 网站进行 BLAST 搜索第41-43页
  · 能量限制对肉仔鸡法氏囊差异表达基因的影响第43-56页
    4.2.1 法氏囊总 RNA 的提取、纯化与检测第43-44页
    4.2.2 法氏囊差异表达 EST第44-52页
      4.2.2.1 第一链 cDNA 质量检测第44页
      4.2.2.2 法氏囊 GeneFishingTM差异显示 RT-PCR 电泳结果第44-52页
    · 差异表达基因的生物信息学分析第52-56页
      4.2.3.1 差异表达 EST 在 NCBI 网站进行 BLAST 搜索结果第52-54页
      4.2.3.2 差异表达 EST 在 NCBI 网站进行 BLAST 搜索第54-56页
5 讨论第56-60页
  5.1 RNA 质量要求及对后期实验结果的影响第56页
  5.2 GeneFishing~(TM)RT—PCR 反应第56-58页
    · 基因差异表达研究技术第56-57页
    5.2.2 GeneFishingTMRT—PCR 差异表达结果第57-58页
  5.3 半定量 RT-PCR 验证差异表达基因第58-59页
  5.4 获得的差异表达 EST 序列分析第59-60页
6 结论第60-61页
参考文献第61-69页
附录第69-78页
  附录 1 脾脏差异表达片段克隆测序第69-73页
  附录 2 法氏囊差异表达克隆序列第73-78页
Abstract第78-79 页

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