论文目录 | |
| 摘要 | 第1-4页 |
| Summary | 第4-8页 |
| 缩写词英汉对照表 | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-22页 |
| 1 朊蛋白国内外的研究现状 | 第9-21页 |
| · 神经退行性病变、环境和金属离子复合物 | 第9-11页 |
| · 朊蛋白在细胞代谢中的作用 | 第11-14页 |
| · PrP~C细胞定位和运输 | 第11-12页 |
| · PrP~C的神经系统性功能 | 第12页 |
| · PrP~C的免疫学功能 | 第12-14页 |
| · 禽类PrP~C与哺乳动物的PrP~C差异 | 第14-17页 |
| · 朊蛋白与铜离子 | 第17-20页 |
| · 哺乳动物和禽类朊蛋白与铜离子的配位特点 | 第17-19页 |
| · 多肽重复区的Cu~(2+)结合位点 | 第19页 |
| · Cu~(2+)与PrP~C结合具有类似超氧化物歧化酶活性 | 第19-20页 |
| · 存在的问题及展望 | 第20-21页 |
| 2 研究目的及意义 | 第21页 |
| 3 研究的内容及方法 | 第21-22页 |
| · ChPRNP 基因不同长度片段的原核表达 | 第21页 |
| · 鸡朊蛋白抗血清制备及其在神经系统中的分布 | 第21-22页 |
| 第二章 鸡朊蛋白不同长度片段的原核表达 | 第22-31页 |
| 1 材料与方法 | 第22-28页 |
| · 材料 | 第22-23页 |
| · 菌株和质粒 | 第22页 |
| · 酶和试剂 | 第22-23页 |
| · 主要仪器与设备 | 第23页 |
| · 方法 | 第23-28页 |
| · 引物设计与合成 | 第23-24页 |
| · 鸡血液基因组DNA 提取 | 第24页 |
| · 目的DNA片段的PCR扩增与回收 | 第24页 |
| · pGEX-4T-1质粒DNA和鸡PRNP目的DNA片段的酶切与回收 | 第24-25页 |
| · 重组表达质粒的构建及鉴定 | 第25-26页 |
| · 重组菌的诱导表达和条件优化 | 第26-27页 |
| · 表达产物的SDS-PAGE 鉴定 | 第27-28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-30页 |
| · PRNP 基因 DNA 目的片段的获得 | 第28页 |
| · 重组 ChPrP 表达载体的鉴定 | 第28-29页 |
| · 重组菌表达产物的 SDS-PAGE 分析 | 第29页 |
| · 重组菌诱导表达优化条件 | 第29-30页 |
| 3 讨论 | 第30-31页 |
| 第三章 鸡朊蛋白多克隆抗体的制备及其在机体内神经系统中的检测 | 第31-43页 |
| 1 材料与方法 | 第31-37页 |
| · 材料 | 第31-33页 |
| · 菌株和质粒 | 第31-32页 |
| · 酶和试剂 | 第32页 |
| · 实验动物及鸡各组织材料 | 第32页 |
| · 主要仪器与设备 | 第32-33页 |
| · 方法 | 第33-37页 |
| · 抗原的制备 | 第33-34页 |
| · 鸡重组朊蛋白 GST-ChPrP(25～247)抗血清的制备及其鉴定 | 第34-36页 |
| · 抗血清中免疫球蛋白 IgG 的分离 | 第36页 |
| · 鸡体神经组织中朊蛋白的分布检测 | 第36-37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-40页 |
| · GST-ChPrP(25～247)目的蛋白纯化 | 第37页 |
| · 抗 ChPrP 抗血清效价的测定 | 第37-38页 |
| · 抗 ChPrP 抗血清的特异性鉴定 | 第38-40页 |
| · 抗血清的 Western blotting 检测 | 第38-39页 |
| · 抗血清敏感性、特异性的 ELISA 检测 | 第39-40页 |
| · 鸡各个组织中朊蛋白的分布 | 第40页 |
| 3 讨论 | 第40-43页 |
| 结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 作者简介 | 第51-52页 |
| 导师简介 | 第52-53页 |
