论文目录 | |
| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-6页 |
| 缩略词表 | 第6-11页 |
| 1 绪论 | 第11-17页 |
| · 问题的提出及研究意义 | 第11-16页 |
| · 问题的提出 | 第11-16页 |
| · 研究意义 | 第16页 |
| · 本文研究的目的和内容 | 第16-17页 |
| · 研究目的 | 第16页 |
| · 本文的主要研究内容 | 第16-17页 |
| 2 人后交叉韧带成纤维细胞/滑膜细胞的原代分离与培养 | 第17-20页 |
| · 引言 | 第17页 |
| · 试剂与仪器 | 第17-18页 |
| · 实验试剂 | 第17页 |
| · 实验材料 | 第17页 |
| · 实验仪器 | 第17页 |
| · 试剂的配制 | 第17-18页 |
| · 实验方法 | 第18-19页 |
| 2.3.1 PCL 和滑膜原代培养 | 第18页 |
| 2.3.2 PCL 和滑膜细胞的传代与冻存 | 第18-19页 |
| · 细胞的复苏 | 第19页 |
| · 实验结果 | 第19-20页 |
| 3 人 PCL 和滑膜成纤维细胞的共培养 | 第20-25页 |
| · 引言 | 第20页 |
| · 材料与仪器 | 第20页 |
| · 实验材料 | 第20页 |
| · 实验试剂 | 第20页 |
| · 实验仪器 | 第20页 |
| · 实验方法 | 第20-21页 |
| 3.3.1 PCL 和滑膜成纤维细胞共培养的方法 | 第20-21页 |
| · 细胞划痕实验 | 第21页 |
| · 实验结果 | 第21-24页 |
| · 共培养的装置剖视图 | 第21页 |
| 3.4.2 滑膜细胞微环境下 PCL 成纤维细胞的形态 | 第21-22页 |
| 3.4.3 滑膜细胞微环境对 PCL 成纤维细胞增殖的影响 | 第22-24页 |
| · 本章小结 | 第24-25页 |
| 4 共培养条件下 PCL 细胞 cDNA 的合成 | 第25-27页 |
| · 引言 | 第25页 |
| · 实验材料与仪器 | 第25页 |
| · 实验试剂 | 第25页 |
| · 实验仪器 | 第25页 |
| · 实验方法 | 第25-27页 |
| 4.3.1 PCL 成纤维细胞总 RNA 的提取 | 第25页 |
| 4.3.2 PCL 成纤维细胞 cDNA 的合成 | 第25-27页 |
| 5 在共培养条件下 MMP-1, 2, 3/LOXs 在 PCL 细胞中表达的 RT-PCR 检测 | 第27-32页 |
| · 引言 | 第27页 |
| · 试剂与仪器 | 第27-28页 |
| · 实验试剂 | 第27页 |
| · 实验仪器 | 第27-28页 |
| · 试剂的配置 | 第28页 |
| · 实验方法 | 第28-30页 |
| 5.3.1 LOXs 和 MMP-1, 2, 3 基因家族引物的设计与合成 | 第28-29页 |
| 5.3.2 LOXs 和 MMP-1, 2, 3 基因家族的半定量 RT-PCR 检测 | 第29页 |
| · 凝胶电泳 | 第29-30页 |
| · 实验结果 | 第30-31页 |
| 5.4.1 与滑膜单纯共培养下，LOXs 基因家族在 PCL 成纤维细胞中的表达 | 第30-31页 |
| 5.4.2 MMP-1, 2, 3 基因在共培养 PCL 中的表达 | 第31页 |
| · 本章小结 | 第31-32页 |
| 6 共培养下实时荧光定量 RT-PCR 检测 LOXs 和 MMP-1, 2, 3 在 PCL 成纤维细胞中基因表达情况 | 第32-39页 |
| · 引言 | 第32页 |
| · 试剂与仪器 | 第32页 |
| · 实验试剂 | 第32页 |
| · 实验仪器 | 第32页 |
| · 实验原理 | 第32-33页 |
| 6.3.1 Quantitative Real- time PCR 荧光反应 | 第33页 |
| · 实验方法 | 第33-34页 |
| 6.4.1 Quantitative Real- time PCR 检测 | 第33-34页 |
| · 实验结果 | 第34-38页 |
| 6.5.1 共培养 PCL 细胞中 LOXs 基因的表达 | 第34-37页 |
| 6.5.2 共培养 PCL 细胞中 MMPs 基因的表达 | 第37-38页 |
| · 本章小结 | 第38-39页 |
| 7 共培养下 LOXs 和 MMP-1, 2, 3 在损伤的 PCL 成纤维细胞中基因表达情况 | 第39-47页 |
| · 引言 | 第39页 |
| · 实验材料与仪器 | 第39-41页 |
| · 实验材料 | 第39页 |
| · 实验试剂 | 第39-40页 |
| · 实验仪器 | 第40-41页 |
| · 实验方法 | 第41-43页 |
| 7.3.1 力学损伤共培养 PCL 成纤维细胞 | 第41页 |
| 7.3.2 Flexercell - 4000 柔性基底拉伸系统 | 第41-42页 |
| 7.3.3 力学刺激后所提样本的总 RNA 提取及 cDNA 的合成 | 第42页 |
| 7.3.4 半定量 PCR 检测 | 第42页 |
| 7.3.5 实时荧光定量 RT-PCR 检测 | 第42-43页 |
| · 实验结果 | 第43-46页 |
| 7.4.1 共培养下半定量检测 LOXs 和 MMP-1, 2, 3 在损伤 PCL 成纤维细胞中的基因表达 | 第43-44页 |
| 7.4.2 共培养下实时荧光定量检测 LOXs 和 MMP-1, 2, 3 在损伤 PCL 细胞中的基因表达 | 第44-46页 |
| · 本章小结 | 第46-47页 |
| 8 共培养下 MMP-2 在 PCL 成纤维细胞中的活性表达 | 第47-53页 |
| · 引言 | 第47页 |
| · 实验试剂与仪器 | 第47-49页 |
| · 实验试剂 | 第47页 |
| · 实验仪器 | 第47-48页 |
| · 试剂的配置 | 第48-49页 |
| · 实验原理与方法 | 第49-50页 |
| · 实验原理 | 第49页 |
| · 实验方法 | 第49-50页 |
| · 实验结果 | 第50-52页 |
| 8.4.1 与滑膜共培养下 MMP-2 在 PCL 成纤维细胞中的活性 | 第50-52页 |
| · 本章小结 | 第52-53页 |
| 9 结论与展望 | 第53-56页 |
| · 主要结论与讨论 | 第53-54页 |
| · 后续工作与展望 | 第54-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 附录 | 第62页 |
| A 作者在硕士学位论文期间发表的论文 | 第62
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