论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 前言 | 第11-22页 |
| 1.1 植物N-糖基化 | 第11-16页 |
| 1.1.1 植物中N-糖基化的起源 | 第12页 |
| 1.1.2 N-糖基化作用发生在内质网膜的细胞溶质面 | 第12-13页 |
| 1.1.3 在内质网腔形成Glc3Man5GlcNAc2-PP-Dol前体 | 第13-14页 |
| 1.1.4 将寡糖前体转移到新合成的蛋白质上 | 第14页 |
| 1.1.5 内质网中的N-糖基化过程 | 第14-16页 |
| 1.1.6 在高尔基体和分泌系统中形成成熟的糖蛋白及其它类型N-糖基化修饰 | 第16页 |
| 1.2 雌、雄配子体间的信号交流 | 第16-20页 |
| 1.2.1 双子叶植物中的双受精现象 | 第16-17页 |
| 1.2.2 花粉管通过助细胞进入胚囊 | 第17-18页 |
| 1.2.3 花粉管接受时参与的信号(雌配子体方面) | 第18-20页 |
| 1.2.4 花粉管接受时参与的信号(雄配子体方面) | 第20页 |
| 1.3 本课题研究的目的、意义和内容 | 第20-22页 |
| 第二章 材料和方法 | 第22-50页 |
| 2.1 实验试剂 | 第22-26页 |
| 2.2 实验仪器 | 第26页 |
| 2.3 实验材料 | 第26-27页 |
| 2.4 实验方法 | 第27-50页 |
| 2.4.1 拟南芥基因组提取和突变体株系基因型鉴定 | 第27-28页 |
| 2.4.2 载体构建 | 第28-36页 |
| 2.4.3 双分子荧光互补实验(BiFC) | 第36-37页 |
| 2.4.4 免疫共沉淀实验(co-IP) | 第37-43页 |
| 2.4.5 质谱分析 | 第43-45页 |
| 2.4.6 糖基化基团验证实验 | 第45页 |
| 2.4.7 GST Pull-Down实验 | 第45-47页 |
| 2.4.8 拟南芥转基因 | 第47-49页 |
| 2.4.9 苯胺蓝染色 | 第49-50页 |
| 第三章 实验结果 | 第50-65页 |
| 3.1 突变体ptb1的突变位点分析 | 第50-51页 |
| 3.1.1 突变体ptb1的突变位点及其基因型分析 | 第50-51页 |
| 3.2 对拟南芥雌、雄配子发育的影响 | 第51-54页 |
| 3.2.1 PTB1突变导致花粉不能正常萌发 | 第52-53页 |
| 3.2.2 PTB1突变导致花粉管不能正常破裂 | 第53-54页 |
| 3.3 恢复实验 | 第54-55页 |
| 3.4 PTB1在雌、雄配子体中均有表达 | 第55页 |
| 3.5 助细胞特异表达PTB1恢复ptb1胚珠表型 | 第55-56页 |
| 3.6 PTB1定位于内质网 | 第56-57页 |
| 3.7 FER-GFP在ptb1突变体中的定位受到影响 | 第57-58页 |
| 3.8 FER候选氨基酸糖基化位点突变 | 第58-59页 |
| 3.9 FER糖基化保证了其极性定位 | 第59-60页 |
| 3.10 拟南芥中寡糖转移酶复合体成员相互作用分析 | 第60-65页 |
| 3.10.1 以PTB1为诱饵的免疫功沉淀及质谱分析 | 第61-62页 |
| 3.10.2 双分子荧光互补实验(BiFC) | 第62-64页 |
| 3.10.3 Pull-Down实验 | 第64-65页 |
| 第四章 讨论 | 第65-68页 |
| 4.1 PTB1参与雌雄配子体间的胞间通讯 | 第65-66页 |
| 4.2 寡糖转移酶复合体在植物中的作用 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
