论文目录 | |
| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-20页 |
| 1.1 启动子的定义和分类 | 第9-13页 |
| 1.1.1 启动子的定义 | 第9-10页 |
| 1.1.2 启动子的分类 | 第10-13页 |
| 1.1.2.1 组成型启动子 | 第11页 |
| 1.1.2.2 诱导型启动子 | 第11-12页 |
| 1.1.2.3 组织特异型启动子 | 第12-13页 |
| 1.1.2.4 双向启动子 | 第13页 |
| 1.1.2.5 可变启动子 | 第13页 |
| 1.2 转录因子 | 第13-16页 |
| 1.2.1 转录因子的定义 | 第13-14页 |
| 1.2.2 WRKY类转录因子 | 第14页 |
| 1.2.3 WRKY转录因子的生物功能机理 | 第14-16页 |
| 1.3 打顶对烟草根系及烟碱合成的影响 | 第16页 |
| 1.4 JA信号途径 | 第16-17页 |
| 1.5 IAA信号途径 | 第17-18页 |
| 1.6 WRKY蛋白磷酸化 | 第18-20页 |
| 2 引言 | 第20-21页 |
| 3 材料与方法 | 第21-31页 |
| 3.1 材料及生长条件 | 第21-22页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第21页 |
| 3.1.2 烟草生长条件及激素处理方法 | 第21页 |
| 3.1.3 BY-2生长条件及激素处理方法 | 第21页 |
| 3.1.4 菌株、载体及主要试剂 | 第21页 |
| 3.1.5 主要仪器 | 第21-22页 |
| 3.2 实验方法 | 第22-31页 |
| 3.2.1 拟南芥根尖组织生长素含量检测 | 第22页 |
| 3.2.2 SDS-CTAB法提取烟草叶片总DNA | 第22页 |
| 3.2.3 Genome walking及生物信息学分析 | 第22页 |
| 3.2.4 构建NtWRKY-R1启动子部分删除表达载体 | 第22-24页 |
| 3.2.4.1 NtWRKY-R1启动子部分删除表达载体的构建 | 第22-23页 |
| 3.2.4.2 NtWRKY-R1启动子部分删除表达载体的瞬时表达 | 第23页 |
| 3.2.4.3 NtWRKY-R1启动子部分删除表达载体转化BY-2 | 第23-24页 |
| 3.2.5 GUS组织化学染色和GUS活性测定方法 | 第24-26页 |
| 3.2.5.1 GUS组织化学染色方法 | 第24页 |
| 3.2.5.2 GUS活性测定 | 第24-26页 |
| 3.2.6 遗传转化Nt WRKY-R1部分删除启动子的BY-2细胞中RNA提取 | 第26页 |
| 3.2.7 实验引物设计 | 第26-27页 |
| 3.2.8 叶盘法转化烟草愈伤组织及鉴定 | 第27-28页 |
| 3.2.9 NtWRKY-R1的进化分析 | 第28页 |
| 3.2.10 NtWRKY-R1的磷酸化检测实验 | 第28-31页 |
| 4 结果与分析 | 第31-43页 |
| 4.1 转基因DR5-GUS拟南芥根尖GUS组织化学染色分析 | 第31页 |
| 4.2 NTWRKY-R1启动子的克隆 | 第31-32页 |
| 4.2.1 总DNA质量检测 | 第31-32页 |
| 4.2.2 NtWRKY-R1 Genome walking结果 | 第32页 |
| 4.3 烟草NTWRKY-R1启动子测序结果分析 | 第32-35页 |
| 4.4 NTWRKY-R1启动子部分删除表达载体双酶切结果 | 第35页 |
| 4.5 NTWRKY-R1启动子部分删除表达载体瞬时表达和遗传转化结果 | 第35-37页 |
| 4.5.1 瞬时表达结果 | 第35-36页 |
| 4.5.2 NtWRKY-R1启动子部分删除载体转化BY-2细胞系及检测结果 | 第36-37页 |
| 4.6 检测NTWRKY-R1部分删除启动子对IAA和JA的响应 | 第37-39页 |
| 4.7 激素处理1504BP-GUS转基因烟草结果 | 第39-40页 |
| 4.8 NTWRKY-R1序列进化分析 | 第40-42页 |
| 4.9 NTWRKY-R1烟株打顶前后磷酸化修饰检测 | 第42-43页 |
| 5 讨论 | 第43-44页 |
| 6 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| ABSTRACT | 第50-51页 |
