脂肪酶产生菌分离与鉴定及其产酶条件优化和lip7基因克隆

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脂肪酶产生菌分离与鉴定及其产酶条件优化和lip7基因克隆

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脂肪酶产生菌分离与鉴定及其产酶条件优化和lip7基因克隆

论文目录
中文摘要	第1-3页
Abstract	第3-7页
第1章前言	第7-23页
1.1 脂肪酶简介	第7-12页
1.1.1 微生物脂肪酶的分子结构及催化机制	第7-11页
1.1.2 脂肪酶的生产方法	第11-12页
1.1.3 脂肪酶活力的测定方法	第12页
1.2 产脂肪酶微生物及其筛选方法	第12-15页
1.2.1 产脂肪酶微生物	第12-13页
1.2.2 产脂肪酶微生物的筛选方法	第13-15页
1.3 提高脂肪酶产量及稳定性的方法	第15-16页
1.3.1 提高脂肪酶产量的方法	第15-16页
1.3.2 提高脂肪酶稳定性的方法	第16页
1.4 脂肪酶的分子生物学研究进展	第16-18页
1.5 脂肪酶的应用	第18-21页
1.5.1 在食品加工方面的应用	第18页
1.5.2 在手性化合物制备中的应用	第18-19页
1.5.3 在医药工业中的应用	第19页
1.5.4 在环境治理方面的应用	第19页
1.5.5 在生物柴油制备中的应用	第19-21页
1.6 本试验研究的目的和意义及主要内容	第21-23页
1.6.1 本试验研究的目的和意义	第21页
1.6.2 本试验研究主要内容	第21-23页
第2章材料与方法	第23-39页
2.1 试验材料	第23-26页
2.1.1 样品	第23页
2.1.2 菌株及质粒	第23页
2.1.3 培养基	第23-24页
2.1.4 主要生化与分子生物学试剂	第24-25页
2.1.5 主要仪器设备	第25-26页
2.2 试验方法	第26-39页
2.2.1 产脂肪酶菌株的分离	第26-28页
2.2.2 脂肪酶产生菌的鉴定	第28-32页
2.2.3 脂肪酶产生菌发酵产酶条件的优化	第32-34页
2.2.4 脂肪酶产生菌脂肪酶酶学性质的研究	第34-35页
2.2.5 脂肪酶基因(lip 7)克隆及其在毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中表达	第35-39页
第3章结果与分析	第39-64页
3.1 产脂肪酶菌株的分离	第39页
3.1.1 初筛	第39页
3.1.2 复筛	第39页
3.2 脂肪酶产生菌株HDY-76的分类鉴定	第39-45页
3.2.1 形态学观察	第39-41页
3.2.2 分子生物学鉴定	第41-45页
3.3 菌株HDY-76发酵产酶条件的优化	第45-55页
3.3.1 菌株生长和产酶特征曲线	第45-47页
3.3.2 单因素试验	第47-54页
3.3.3 正交试验	第54-55页
3.4 菌株HDY-76脂肪酶酶学性质研究	第55-59页
3.4.1 pH对脂肪酶活性的影响	第55-56页
3.4.2 温度对脂肪酶活性的影响	第56-57页
3.4.3 金属离子对脂肪酶活性的影响	第57页
3.4.4 脂肪酶稳定性的研究	第57-59页
3.5 脂肪酶基因(lip7)的克隆与表达	第59-64页
3.5.1 脂肪酶基因(lip7)的克隆	第59-61页
3.5.2 毕赤酵母表达载体pGAPHαM- lip7构建	第61-63页
3.5.3 毕赤酵母(Pichia pastoris)的转化	第63-64页
第4章讨论	第64-68页
4.1 脂肪酶产生菌的分离与鉴定	第64页
4.1.1 脂肪酶产生菌的分离	第64页
4.1.2 脂肪酶产生菌的鉴定	第64页
4.2 脂肪酶活力的测定	第64-65页
4.3 发酵培养基及培养条件对脂肪酶产量的影响	第65-67页
4.3.1 培养基成分对脂肪酶产量的影响	第65-66页
4.3.2 培养条件对脂肪酶产量的影响	第66-67页
4.4 脂肪酶基因的克隆与表达	第67-68页
第5章结论	第68-69页
第6章本论文的主要创新点	第69-70页
参考文献	第70-80页
致谢	第80-81页
攻读硕士学位期间发表论文情况	第81-82页
攻读硕士学位期间参与研究课题情况	第82-83页

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