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基于CRISPR-Cpf1系统的基因转录调控工具的优化设计

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基于CRISPR-Cpf1系统的基因转录调控工具的优化设计
论文目录
 
摘要第1-6页
ABSTRACT第6-9页
第一章 绪论第9-26页
  1.1 选题背景与意义第9页
  1.2 基因编辑及调控工具第9-18页
    1.2.1 梓指核酸酶(Zinc Finger nuclease, ZFN)第10-11页
    1.2.2 转录激活效应因子核酸酶(Transcription activator-like effector nucleases, TALEN)第11-13页
    1.2.3 Cas9-sgRNA第13-18页
  1.3 CRISPR-Cas系统第18-20页
    1.3.1 CRISPR系统的发现过程第18页
    1.3.2 CRISPR系统的作用机制第18-19页
    1.3.3 CRISPR系统的分类第19-20页
  1.4 CRISPR-Cpfl系统的简介第20-21页
  1.5 CRISPR-Cas系统的应用第21-24页
    1.5.1 全基因组筛选第21-22页
    1.5.2 基因组成像第22页
    1.5.3 疾病模型的构建第22-23页
    1.5.4 疾病的治疗第23页
    1.5.5 抗菌剂及抗病毒剂第23-24页
  1.6 主要研究内容及技术路线第24-26页
    1.6.1 主要研究内容第24页
    1.6.2 技术路线第24-26页
第二章 实验材料与方法第26-34页
  2.1 实验材料第26-27页
    2.1.1 实验菌株及试剂第26页
    2.1.2 溶液配制第26-27页
    2.1.3 主要仪器设备第27页
  2.2 实验方法第27-34页
    2.2.1 克隆构建方法第27-30页
    2.2.2 流式细胞仪荧光定量检测方法第30-31页
    2.2.3 PAM序列富集测试方法第31-34页
第三章 结果与讨论第34-52页
  3.1 结果第34-50页
    3.1.1 FndCpfl不同突变位点对抑制作用的影响第34-35页
    3.1.2 FndCpfl在启动子区的抑制作用第35-36页
    3.1.3 FndCpfl在编码区的抑制作用第36-38页
    3.1.4 不同sgRNA设计对抑制作用的影响第38-41页
    3.1.5 FndCpfl同时作用于编码区多个位点的抑制作用第41-44页
    3.1.6 PAM序列对FndCpfl抑制作用的影响第44-50页
  3.2 讨论第50-52页
参考文献第52-65页
附录第65-71页
报告质粒中的启动子序列信息第65页
不同PAM序列下的报告质粒的荧光值及流式峰图第65-66页
sfGFP序列信息第66页
FndCpfl不同PAM序列及对应的荧光值第66-71页
致谢第71-72页
在读期间发表的学术论文第72页

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