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携BDNF基因慢病毒转染ADSCs体外研究

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携BDNF基因慢病毒转染ADSCs体外研究
论文目录
 
摘要第1-3页
Abstract第3-8页
引言第8-10页
1 文献综述第10-20页
  1.1 脑源性神经营养因子第10-14页
    1.1.1 脑源性神经营养因子概述第10页
    1.1.2 脑源性神经营养因子作用机制第10-12页
    1.1.3 脑源性神经营养因子研究进展第12-14页
  1.2 脂肪间充质干细胞第14-17页
    1.2.1 脂肪干细胞定义及研究意义第14-15页
    1.2.2 脂肪干细胞生物学特性第15-17页
  1.3 基因治疗与干细胞治疗第17-18页
    1.3.1 基因治疗第17-18页
    1.3.2 干细胞治疗第18页
    1.3.3 基因治疗与干细胞治疗应用第18页
  1.4 论文的选题依据及研究内容第18-20页
2 脂肪间充质干细胞的分离、培养与鉴定第20-32页
  2.1 实验材料与方法第20-24页
    2.1.1 实验动物第20页
    2.1.2 实验药品与试剂第20-21页
    2.1.3 实验所需试剂配制第21-24页
    2.1.4 实验仪器与设备第24页
  2.2 ADSCs鉴定第24-27页
    2.2.1 ADSCs的分离培养第24-25页
    2.2.2 ADSCs传代培养第25页
    2.2.3 ADSCs冻存及解冻第25-26页
    2.2.4 ADSCs表面标志鉴定第26页
    2.2.5 ADSCs成脂分化与成骨分化第26页
    2.2.6 生长曲线测定第26-27页
    2.2.7 菌落形成单位测试第27页
    2.2.8 划痕实验第27页
  2.3 实验结果与分析第27-31页
    2.3.1 生长曲线结果第27-28页
    2.3.2 表面标志测定第28-29页
    2.3.3 ADSCs成骨成脂分化染色结果第29页
    2.3.4 集落形成单位第29-30页
    2.3.5 划痕实验第30-31页
  2.4 本章小结第31-32页
3 BDNF-ADSCs筛选及干细胞检测第32-47页
  3.1 实验材料与方法第33-34页
    3.1.1 实验药品与试剂第33页
    3.1.2 实验仪器与设备第33页
    3.1.3 实验所需试剂配制第33-34页
  3.2 ADSCs慢病毒转染第34-35页
    3.2.1 MOI测定方法第34-35页
    3.2.2 慢病毒转染第35页
  3.3 流式细胞仪筛选第35-40页
    3.3.1 上样前准备第35-36页
    3.3.2 光路调节和QC第36-37页
    3.3.3 样本获取和分析第37页
    3.3.4 BDND-ADSCs的荧光筛选第37-40页
  3.4 G418药物筛选第40-42页
    3.4.1 G418预筛选第40-41页
    3.4.2 G418正式筛选第41页
    3.4.3 筛选结果分析第41-42页
  3.5 干细胞性能测试第42-46页
    3.5.1 ADSCs和BDNF-ADSCs表面标志第42页
    3.5.2 体外分化潜能测试第42-44页
    3.5.3 细胞增殖曲线测定第44-45页
    3.5.4 细胞集落实验测定第45-46页
  3.6 本章小结第46-47页
4 BDNF-ADSCs mRNA与蛋白表达量检测第47-61页
  4.1 实验材料和方法第47-52页
    4.1.1 实验药品与试剂.第47-48页
    4.1.2 实验所需试剂配制第48-51页
    4.1.3 实验仪器与设备第51-52页
  4.2 实验结果与分析第52-56页
    4.2.1 mRNA的提取第52-53页
    4.2.2 反转录PCR第53页
    4.2.3 实时荧光定量PCR检测mRNA表达含量第53-54页
    4.2.4 实时荧光定量PCR检测结果分析第54-56页
  4.3 蛋白质免疫印迹第56-60页
    4.3.1 蛋白的提取与蛋白含量的测定第56-57页
    4.3.2 蛋白分离电泳实验第57-58页
    4.3.3 蛋白转膜与孵育第58-59页
    4.3.4 Western-blot显影及分析第59-60页
  4.4 本章小结第60-61页
结论第61-63页
创新点与展望第63-64页
参考文献第64-71页
中英文缩略词表第71-73页
附录A 合成引物序列第73-74页
攻读硕士学位期间发表学术论文情况第74-75页
致谢第75-77页

本篇论文共77页,点击这进入下载页面
 
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