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SETD4在真核系统中的表达和纯化
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SETD4在真核系统中的表达和纯化
论文目录
摘要
第1-6页
Abstract
第6-11页
1 绪论
第11-16页
1.1 课题背景
第11-16页
1.1.1 真核表达系统
第11-14页
1.1.2 SETD4蛋白的发现
第14页
1.1.3 研究的目的与意义
第14-15页
1.1.4 技术路线
第15-16页
2 第一部分: 昆虫表达系统
第16-45页
2.1 实验材料
第16-20页
2.1.1 实验仪器和设备
第16-17页
2.1.2 实验试剂
第17-18页
2.1.3 配置试剂
第18-20页
2.2 实验方法
第20-37页
2.2.1 pFast-HTB-SETD4重组质粒的构建
第20-27页
2.2.2 重组杆粒的构建
第27-31页
2.2.3 昆虫细胞的培养
第31-32页
2.2.4 重组杆状病毒的产生
第32-35页
2.2.5 蛋白表达的检测
第35-36页
2.2.6 SETD4蛋白的大量表达与纯化
第36-37页
2.3 实验结果与分析
第37-43页
2.3.1 pFast-HTB-SETD4重组质粒的构建结果
第37-38页
2.3.2 重组杆粒的构建结果
第38-40页
2.3.3 昆虫细胞的培养结果
第40-41页
2.3.4 SETD4蛋白纯化及表达结果
第41-43页
2.4 本章小结
第43-45页
2.4.1 结论
第43页
2.4.2 讨论
第43-45页
3 第二部分:建立哺乳细胞真核表达系统
第45-56页
3.1 实验材料
第45页
3.1.1 细胞系
第45页
3.1.2 实验仪器和设备
第45页
3.1.3 实验试剂
第45页
3.1.4 配置试剂
第45页
3.2 实验方法
第45-52页
3.2.1 pcDNA3-His-SETD4重组质粒的构建
第45-49页
3.2.2 293F细胞的培养
第49-51页
3.2.3 表达重组蛋白
第51-52页
3.3 实验结果与分析
第52-55页
3.3.1 pcDNA3-His-SETD4重组质粒的构建结果
第52页
3.3.2 DNA测序结果
第52-53页
3.3.3 Bradford法蛋白定量结果
第53-54页
3.3.4 SETD4蛋白表达结果
第54-55页
3.4 本章小结
第55-56页
3.4.1 结论
第55页
3.4.2 讨论
第55-56页
4 第三部分: 过表达SETD4蛋白对细胞的影响
第56-63页
4.1 实验材料
第56-57页
4.1.1 细胞系
第56页
4.1.2 实验仪器和设备
第56页
4.1.3 实验试剂
第56页
4.1.4 配置试剂
第56-57页
4.2 实验方法
第57-58页
4.2.1 293A细胞培养
第57页
4.2.2 过表达SETD4蛋白对细胞的影响
第57-58页
4.3 实验结果与分析
第58-62页
4.3.1 Western Blot检测SETD4蛋白表达量
第58-59页
4.3.2 MTT法实验结果
第59-60页
4.3.3 流式细胞实验结果
第60-62页
4.4 本章小结
第62-63页
4.4.1 结论
第62页
4.4.2 讨论
第62-63页
结论
第63-65页
参考文献
第65-68页
附录
第68-69页
攻读学位期间发表的学术论文
第69-70页
致谢
第70-71页
本篇论文共
71
页,
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