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毛细管电泳法检测细胞中8-OH-dG及几种抗氧化剂活性

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毛细管电泳法检测细胞中8-OH-dG及几种抗氧化剂活性
论文目录
 
摘要第1-11页
ABSTRACT第11-13页
综述第13-28页
1 前言第13页
2.DNA损伤第13-16页
2.1DNA损伤的来源及种类第13-14页
    2.1.1 外源性DNA损伤第13-14页
    2.1.2 内源性DNA损伤第14页
  2.2 DNA损伤生物标志物及检测方法第14-16页
    2.2.1 DNA损伤生物标志物第14-16页
      2.2.1.1 特异性修复基因第14-15页
      2.2.1.2 特异性酶第15页
      2.2.1.3 DNA加合物第15页
      2.2.1.4 氧化损伤产物第15-16页
    2.2.2 DNA氧化损伤的检测方法第16页
  3.DNA氧化损伤标记物 8-OH-dG研究进展第16-21页
  3.1 8-OH-dG的发现第16-17页
  3.2 8-OH-dG的形成第17页
  3.3 研究 8-OH-dG的意义第17-20页
    3.3.1 8-OH-dG与疾病的联系第17-18页
    3.3.2 细胞水平检测 8-OH-dG意义第18-19页
    3.3.3 体液或组织中检测 8-OH-dG的意义第19页
    3.3.4 选择 8-OH-dG作为DNA氧化损伤标记物的原因第19-20页
  3.4 8-OH-dG分离检测的方法第20-21页
    3.4.1 高效液相色谱—电化学检测器分析法第20页
    3.4.2 酶联免疫吸附法第20-21页
    3.4.3 毛细管电泳第21页
4.抗氧化剂槲皮素、姜黄素及番茄红素研究进展第21-23页
  4.1 抗氧化剂的概念和意义第21页
  4.2 槲皮素、姜黄素及番茄红素研究进展第21-23页
    4.1.1 槲皮素第21-22页
    4.1.2 姜黄素第22页
    4.1.3 番茄红素第22-23页
5.毛细管电泳第23-27页
  5.1 毛细管电泳概述第23页
  5.2 毛细管电泳原理第23-24页
  5.3 毛细管电泳分离模式第24-26页
    5.3.1 毛细管区带电泳第24页
    5.3.2 胶束电动毛细管色谱第24-25页
    5.3.3 毛细管凝胶电泳第25页
    5.3.4 毛细管等电聚焦第25页
    5.3.5 毛细管等速电泳第25-26页
    5.3.6 毛细管电色谱第26页
  5.4 毛细管电泳仪第26页
  5.5 毛细管电泳特点第26-27页
6.本研究的目的和意义第27-28页
1.实验材料第28页
2.实验仪器第28页
3.实验试剂第28页
4.实验方法第28-31页
  4.1 毛细管电泳检测条件优化第28页
  4.2 电泳缓冲溶液及标准品溶液的配制第28-29页
    4.2.1 电泳缓冲溶液第28-29页
    4.2.2 标准品溶液第29页
  4.3 紫外检测器波长的选择第29页
  4.4 细胞培养第29页
  4.5 细胞的染毒与收集第29-30页
  4.6 细胞中DNA的提取第30页
    4.6.1 细胞的收集第30页
    4.6.2 细胞裂解及相关蛋白降解第30页
    4.6.3 DNA分离纯化第30页
  4.7 DNA纯度和浓度的检测第30-31页
  4.8 DNA的酶解消化与 5′端去磷酸化第31页
  4.9 上样前处理第31页
    4.9.1 上样前处理法一第31页
    4.9.2 上样前处理法二第31页
5.实验结果第31-56页
  5.1 毛细管电泳条件的摸索与优化第31-36页
    5.1.1 紫外检测器波长的选择第31页
    5.1.2 不同溶剂对样品出峰情况影响第31-33页
    5.1.3 温度对标准样品出峰情况的影响第33-34页
    5.1.4 精确度及稳定性检测第34-35页
    5.1.5 线性回归方程、检出限及重现性考察第35-36页
  5.2 细胞DNA中 8-OH-dG的CE检测第36-42页
    5.2.1 DNA的提取与酶解第36-37页
    5.2.2 动态PH调节进样法检测HL-60细胞中 8-OH-dG第37-38页
    5.2.3 常规进样法检测HL-60细胞中 8-OH-dG第38-39页
    5.2.4 毛细管电泳检测不同浓度H2O2处理HL-60细胞中 8-OH-dG第39-42页
  5.3 CE检测抗氧化剂对HL-60细胞中DNA氧化损伤的保护作用第42-49页
    5.3.1 DNA的提取与酶解消化效果第42-43页
    5.3.2 姜黄素对H2O2引起的HL-60细胞DNA氧化损伤的保护作用第43-46页
    5.3.3 番茄红素与槲皮素对H2O2引起的HL-60细胞DNA氧化损伤的保护作用第46-49页
  5.4 CE检测抗氧化剂对U87细胞中DNA氧化损伤的保护作用第49-56页
    5.4.1 DNA的提取与酶解消化效果第49-50页
    5.4.2 鱼藤酮对U87的毒性第50-53页
    5.4.3 姜黄素和槲皮素对U87细胞的保护作用第53-56页
6.分析与讨论第56-58页
  7. 结论第58-60页
参考文献第60-68页
攻读硕士期间发表文章第68-69页
致谢第69页

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