论文目录 | |
摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
1 引言 | 第10-17页 |
1.1 植物与环境的互作 | 第10-14页 |
1.1.1 植物的天然免疫系统 | 第10页 |
1.1.1.1 植物对病原菌的基础抗性(PTI) | 第10页 |
1.1.1.2 植物对病原菌的基因对基因抗性(ETI) | 第10页 |
1.1.2 植物系统获得性免疫(SAR) | 第10-11页 |
1.1.3 生物胁迫下植物内源激素信号传导 | 第11-12页 |
1.1.4 植物对非生物逆境胁迫的应答 | 第12-14页 |
1.2 RNA解旋酶的研究进展 | 第14-16页 |
1.2.1 DEAD-box RNA解旋酶的结构及功能 | 第14页 |
1.2.2 DEAD-box RNA解旋酶参与了胁迫信号的传导 | 第14-15页 |
1.2.3 DEAD-box RNA解旋酶参与了植物的生长发育 | 第15-16页 |
1.3 辣椒功能基因的研究现状 | 第16页 |
1.4 本研究的主要内容和目的 | 第16-17页 |
2 材料和方法 | 第17-20页 |
2.1 材料 | 第17-18页 |
2.1.1 构建载体材料 | 第17页 |
2.1.2 烟草的遗传转化所需材料 | 第17页 |
2.1.3 生化试剂与实验设备 | 第17-18页 |
2.2 实验方法 | 第18-20页 |
2.2.1 辣椒CaRH36基因的分离 | 第18页 |
2.2.2 辣椒CaRH36基因生物信息学的分析 | 第18页 |
2.2.3 亚细胞定位和超表达载体,VIGS载体的构建 | 第18-19页 |
2.2.4 烟草超表达的遗传转化,验证及其T1代种子的获得 | 第19页 |
2.2.5 逆境胁迫下辣椒中CaRH36基因的qRT-PCR分析 | 第19页 |
2.2.6 超表达CaRH36转基因烟草T1代株系的筛选 | 第19-20页 |
2.2.7 烟草表型进行初步功能分析 | 第20页 |
2.2.8 高温条件下电导率的测定 | 第20页 |
3 结果与分析 | 第20-40页 |
3.1 CaRH36基因的筛选与序列分析 | 第20-26页 |
3.1.1 CaRH36基因的筛选与测序 | 第20-22页 |
3.1.2 CaRH36的蛋白结构分析 | 第22-23页 |
3.1.3 CaRH36与DEAD-box RNA解旋酶的氨基酸序列同源关系 | 第23-26页 |
3.1.4 通过辣椒CaRH36的序列预测基因定位 | 第26页 |
3.2 亚细胞定位和超表达载体,VIGS载体的构建 | 第26-28页 |
3.3 辣椒CaRH36基因表达模式研究 | 第28-32页 |
3.3.1 辣椒CaRH36对青枯菌接种的应答分析 | 第28-29页 |
3.3.2 CaRH36对于植物激素的应答 | 第29-30页 |
3.3.3 CaRH36对非生物胁迫的应答研究 | 第30-32页 |
3.4 辣椒CaRH36在辣椒组织中的表达模式 | 第32-33页 |
3.5 烟草超表达的遗传转化,验证及其T1代种子的获得 | 第33-37页 |
3.5.1 T0转基因烟草的遗传转化 | 第33-34页 |
3.5.2 T0代转基因苗的阳性验证 | 第34-35页 |
3.5.3 转基因烟草T1代株系的筛选 | 第35-37页 |
3.6 辣椒CaRH36超表达烟草在胁迫下的表型分析 | 第37-39页 |
3.6.1 CaRH36超表达烟草在盐,干旱和外源激素ABA等胁迫下的生物学现象 | 第37-38页 |
3.6.2 CaRH36转基因超表达烟草植物在高温胁迫下的生物学现象 | 第38-39页 |
3.7 高温条件下的电导率的分析 | 第39-40页 |
4 讨论 | 第40-44页 |
4.1 辣椒CaRH36基因可能参与了高温条件下应答 | 第40-41页 |
4.2 辣椒CaRH36可能具有抗高温的特性 | 第41-42页 |
4.3 电导率(生理指标)测定推测出该基因具有抗高温的特性 | 第42页 |
4.5 辣椒CaRH36基因可能对辣椒的生长发育起到一定的作用 | 第42-43页 |
4.6 辣椒CaRH36基因的后续研究 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-48页 |
附录 | 第48-55页 |
附录1 研究所用载体图 | 第48-50页 |
附录2 培养基的成分与配置 | 第50-51页 |
附录3 本研究所用仪器 | 第51-52页 |
附录4 本研究所用Marker示意图 | 第52-53页 |
附录5 DNA与RNA的提取 | 第53-54页 |
附录6 中英文缩写对照表 | 第54-55页 |
致谢 | 第55页 |