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拟南芥SCL31蛋白的表达纯化及其功能的研究

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拟南芥SCL31蛋白的表达纯化及其功能的研究
论文目录
 
中文摘要第1-4页
英文摘要第4-5页
中英文对照及英文缩写词表第5-9页
1 引言第9-19页
  1.1 GA研究进展第9-11页
    1.1.1 GA的分类、结构及分布第9页
    1.1.2 GA的功能第9-10页
    1.1.3 GA活性的调节第10-11页
  1.2 GRAS蛋白家族研究进展第11-14页
    1.2.1 GRAS蛋白的结构及分类第11-13页
    1.2.2 GRAS蛋白与GA信号第13-14页
    1.2.3 GRAS蛋白与O-GlcNAc糖基化修饰第14页
  1.3 拟南芥O-GlcNAc糖基转移酶第14-16页
    1.3.1 SPY和SEC的结构第15-16页
    1.3.2 SPY/SEC与GA信号之间的联系第16页
  1.4 立题依据第16-19页
2 材料与方法第19-33页
  2.1 主要实验材料与试剂第19-21页
    2.1.1 实验材料第19-21页
    2.1.2 抗体及试剂第21页
  2.2 主要实验仪器第21-22页
  2.3 实验方法第22-33页
    2.3.1 总RNA提取第22页
    2.3.2 逆转录第22-23页
    2.3.3 PCR反应第23-25页
    2.3.4 琼脂糖凝胶电泳第25-26页
    2.3.5 胶回收第26页
    2.3.6 双酶切第26页
    2.3.7 质粒的连接第26-27页
    2.3.8 质粒的转化第27页
    2.3.9 挑菌、摇菌第27页
    2.3.10 小提质粒第27-28页
    2.3.11 蛋白预表达实验第28页
    2.3.12 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第28-29页
    2.3.13 考马斯亮蓝R250染色第29页
    2.3.14 Western Blot第29页
    2.3.15 大量分离纯化蛋白第29-31页
    2.3.16 体外酶活性实验第31页
    2.3.17 薄层层析第31-32页
    2.3.18 粗提拟南芥DNA第32页
    2.3.19 植物材料的培养第32-33页
3 实验结果第33-48页
  3.1 SCL31原核表达体系的构建和蛋白纯化第33-40页
    3.1.1 从拟南芥花序组织中扩增得到scl31基因第33-34页
    3.1.2 pMD18-T-SCL31克隆载体的构建及鉴定第34-35页
    3.1.3 pGEX-6p1SCL31表达载体的构建及鉴定第35-37页
    3.1.4 SCL31蛋白的表达和纯化第37-40页
  3.2 SCL31蛋白甲基转移酶活性检测第40-41页
    3.2.1 放射性薄层层析检测SCL31蛋白甲基转移酶活性第40-41页
    3.2.2 薄层层析检测SCL31蛋白甲基转移酶活性第41页
  3.3 scl31纯合突变体下胚轴明显增长第41-45页
    3.3.1 scl31纯合突变体DNA水平鉴定实验第42-43页
    3.3.2 scl31纯合突变体mRNA水平鉴定实验第43-44页
    3.3.3 scl31纯合突变体表型观察第44-45页
  3.4 SCL31蛋白不能发生O-GlcNAc糖基化修饰第45-48页
    3.4.1 SCL31蛋白不能被SEC所修饰第46-47页
    3.4.2 SCL31蛋白不能被SPY所修饰第47-48页
4 讨论第48-49页
5 展望第49-50页
参考文献第50-55页
致谢第55页

本篇论文共55页,点击这进入下载页面
 
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