论文目录 | |
致谢 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
1 文献综述 | 第8-11页 |
1.1 能量代谢障碍综合症 | 第8页 |
1.2 瘦素 | 第8-10页 |
1.2.1 瘦素的发现及分泌 | 第8页 |
1.2.2 瘦素对能量代谢的影响 | 第8-9页 |
1.2.3 瘦素信号通路 | 第9-10页 |
1.2.4 瘦素抵抗 | 第10页 |
1.3 转基因动物 | 第10页 |
1.4 FoxO1 | 第10-11页 |
1.4.1 Fox01的结构 | 第10-11页 |
1.4.2 FoxO1的功能 | 第11页 |
2 引言 | 第11-12页 |
3 材料与方法 | 第12-23页 |
3.1 材料 | 第12-16页 |
3.1.1 试验动物 | 第12页 |
3.1.2 实验仪器 | 第12-13页 |
3.1.3 实验试剂 | 第13页 |
3.1.4 实验耗材 | 第13页 |
3.1.5 实验试剂配制 | 第13-16页 |
3.2 方法 | 第16-23页 |
3.2.1 转染用质粒的获取 | 第16-17页 |
3.2.2 pEF1α-Myc- Fox01ΔDBD、p Fox01阳性对照蛋白获取 | 第17-18页 |
3.2.3 转基因小鼠基因型鉴定 | 第18-19页 |
3.2.4 转基因小鼠组织mRNA转录检测 | 第19-21页 |
3.2.5 转基因小鼠组织蛋白表达检测 | 第21-22页 |
3.2.6 转基因小鼠体重与采食量分析 | 第22页 |
3.2.7 常规条件下转基因小鼠POMC、AGRP转录水平检测 | 第22-23页 |
3.2.8 常规条件下小鼠与饥饿条件下POMC转录水平的对比 | 第23页 |
3.2.9 转基因小鼠leptin刺激实验 | 第23页 |
3.2.10 常规条件下转基因小鼠UCP1、UCP2、UCP3转录水平检测 | 第23页 |
4 结果与分析 | 第23-36页 |
4.1 pEF1α-Myc- Fox01ΔDBD、pFoxO1在 293Rb细胞中的转染情况 | 第23页 |
4.2 F1代转基因小鼠基因型鉴定 | 第23-26页 |
4.3 F1代转基因小鼠目的基因Fox01ΔDBD转录水平检测 | 第26-32页 |
4.3.1 RNA质量检测 | 第26页 |
4.3.2 荧光定量PCR检测Fox01ΔDBD在各品系及不同组织中的表达 | 第26-32页 |
4.4 转基因小鼠Fox01ΔDBD目的蛋白的检测 | 第32页 |
4.5 转基因小鼠部分表型分析 | 第32-36页 |
4.5.1 Line7转基因小鼠体重(Body weight)与采食量(Food intake)检测 | 第32-34页 |
4.5.2 常规条件下转基因小鼠POMC、AGRP转录水平检测 | 第34页 |
4.5.3 常规条件下小鼠与饥饿条件下POMC转录水平的对比 | 第34页 |
4.5.4 转基因小鼠leptin刺激后p-STAT3的表达情况及POMC水平 | 第34-35页 |
4.5.5 常规条件下转基因小鼠UCP1、UCP2、UCP3转录水平检测 | 第35-36页 |
5 讨论与结论 | 第36-37页 |
5.1 讨论 | 第36-37页 |
5.2 结论 | 第37页 |
参考文献 | 第37-41页 |
英文摘要 | 第41-42页 |