论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 前言 | 第7-13页 |
| 1.1 SPSB家族蛋白 | 第7-8页 |
| 1.2 诱导型一氧化氮合酶 | 第8-10页 |
| 1.3 一氧化氮 | 第10页 |
| 1.4 SPSB1，2，4 对诱导型一氧化氮合酶的调控 | 第10-12页 |
| 1.5 SPSB3蛋白 | 第12页 |
| 1.6 研究目的与意义 | 第12-13页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第13-44页 |
| 2.1 实验材料 | 第13-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-28页 |
| 2.3 重组蛋白表达 | 第28-29页 |
| 2.4 重组蛋白纯化 | 第29-31页 |
| 2.5 NMR样品制备及NMR分析 | 第31-32页 |
| 2.6 蛋白复合物结晶实验 | 第32页 |
| 2.7 ITC测定蛋白与多肽的相互作用亲和力 | 第32-34页 |
| 2.8 晶体衍射数据收集与结构解析 | 第34页 |
| 2.9 细胞培养 | 第34-36页 |
| 2.10 转染用质粒DNA纯化 | 第36页 |
| 2.11 真核细胞基因转染 | 第36-37页 |
| 2.12 Griess法测定细胞NO生成 | 第37-38页 |
| 2.13 提取细胞总蛋白 | 第38页 |
| 2.14 蛋白质定量 | 第38-39页 |
| 2.15 免疫共沉淀 | 第39页 |
| 2.16 免疫印迹实验 | 第39-40页 |
| 2.17 SPSB2抑制肽对NO释放的影响 | 第40页 |
| 2.18 PAGE胶银染 | 第40页 |
| 2.19 PAGE胶内酶解制备多肽片段 | 第40-41页 |
| 2.20 溶液酶解制备多肽片段 | 第41-42页 |
| 2.21 多肽片段样品脱盐 | 第42页 |
| 2.22 质谱分析 | 第42-44页 |
| 第三章 实验结果 | 第44-59页 |
| 3.1 SPSB(22-220)的表达和纯化 | 第44-45页 |
| 3.2 NMR分析SPSB2(22-220)与抑制肽的相互作用 | 第45-48页 |
| 3.3 ITC法测定SPSB2(22-220)与抑制肽相互作用的亲和力 | 第48页 |
| 3.4 SPSB2(22-220)与抑制肽复合物结晶结果 | 第48-49页 |
| 3.5 SPSB2(22-220)与抑制肽复合物的晶体结构 | 第49-53页 |
| 3.6 外源性过表达iNOS氨基端短肽对细胞NO生成的影响 | 第53-54页 |
| 3.7 细胞穿透肽对RAW264.7 细胞NO生成影响 | 第54-55页 |
| 3.8 SPSB3蛋白的细胞内靶蛋白的初步鉴定 | 第55-59页 |
| 第四章 讨论 | 第59-61页 |
| 第五章 结论 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-64页 |
