论文目录 | |
摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
英文缩略词 | 第9-11页 |
引言 | 第11-12页 |
第1章 文献综述 | 第12-25页 |
1.1 MAR序列概述 | 第12-13页 |
1.2 MAR序列特征 | 第13-15页 |
1.3 MAR功能特征 | 第15-16页 |
1.3.1 MAR对外源基因转化效率的影响 | 第15页 |
1.3.2 MAR对外源基因表达水平和稳定性的影响 | 第15-16页 |
1.3.3 MAR对外源基因遗传稳定性的影响 | 第16页 |
1.4 MAR的作用机制 | 第16-19页 |
1.4.1 DNA loop domains | 第17页 |
1.4.2 MAR序列介导DNA甲基化调控 | 第17-18页 |
1.4.3 MAR序列抑制同源配对和提高RNA阈值(RNA threshold) | 第18页 |
1.4.4 MAR序列与调控蛋白特异性结合 | 第18-19页 |
1.5 MAR预测技术 | 第19-25页 |
1.5.1 MAR-Wiz(MarFinder) | 第21页 |
1.5.2 SMARTEST | 第21-22页 |
1.5.3 MARSCAN (MRS criterion) | 第22-23页 |
1.5.4 SIDD | 第23页 |
1.5.5 ChrClass | 第23-25页 |
第2章 水稻MAR序列的筛选 | 第25-30页 |
2.1 实验材料 | 第25页 |
2.1.1 植物材料 | 第25页 |
2.1.2 实验常用生化试剂、仪器和生物技术公司 | 第25页 |
2.1.3 质粒和菌株 | 第25页 |
2.2 实验方法 | 第25-28页 |
2.2.1 筛选候选MAR序列 | 第25-27页 |
2.2.2 克隆候选MAR序列 | 第27页 |
2.2.3 构建植物表达载体 | 第27-28页 |
2.3 检测gus酶活力 | 第28-30页 |
2.3.1 筛选转基因植株阳性株 | 第28-29页 |
2.3.1.1 转基因植株的PCR检测 | 第28-29页 |
2.3.1.2 转基因植株的潮霉素抗性检测 | 第29页 |
2.3.2 检测转基因单株中gus酶活力 | 第29-30页 |
第3章 结果与分析 | 第30-37页 |
3.1 候选MAR序列的筛选 | 第30-31页 |
3.2 应用候选MAR序列构建gus基因表达载体 | 第31-32页 |
3.3 转基因阳性株的筛选 | 第32-34页 |
3.4 检测阳性株中gus酶活力 | 第34-35页 |
3.5 M2、M3、M6和M7对gus表达稳定性的影响 | 第35-36页 |
3.6 结论 | 第36-37页 |
第4章 讨论 | 第37-39页 |
4.1 MAR序列的筛选 | 第37页 |
4.2 M2、M3、M6和M7序列对GUS表达的影响 | 第37-38页 |
4.3 MAR预测技术的可行性 | 第38页 |
4.4 后续工作 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-46页 |
附录1. 实验常用生化试剂、仪器和生物技术公司 | 第46-47页 |
附录2. 本研究所涉及的生物信息学数据库 | 第47-48页 |
附录3. 克隆候选MAR序列所用引物及所加酶切位点 | 第48-49页 |
附录4. 常见实验步骤 | 第49-53页 |
附录5. 实验所用MCS及质粒图谱 | 第53-54页 |
附录6. 载体构建流程(图谱) | 第54-60页 |
致谢 | 第60页 |