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拟南芥GPX7调控铁参与光氧化还原过程的机制研究

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拟南芥GPX7调控铁参与光氧化还原过程的机制研究
论文目录
 
摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
缩写词第10-12页
1 前言第12-20页
  1.1 谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidases)的研究进展第12-13页
    1.1.1 动物的GPXs的研究第12-13页
    1.1.2 拟南芥的GPXs的研究第13页
  1.2 活性氧的产生及清除第13-16页
    1.2.1 活性氧的产生第13-14页
    1.2.2 活性氧能改变植物的氧化还原状态第14-15页
    1.2.3 植物体内清除活性氧的系统第15-16页
  1.3 铁在植物中的作用第16-17页
    1.3.1 铁参与叶绿素的合成第16页
    1.3.2 缺铁胁迫下植物的适应性反应第16-17页
  1.4 铁参与光氧化还原状态的改变第17-19页
  1.5 立题依据第19-20页
2 材料与方法第20-38页
  2.1 实验材料第20页
    2.1.1 植物材料第20页
    2.1.2 质粒载体和菌株第20页
  2.2 实验试剂第20-21页
  2.3 实验常用的溶液第21-23页
  2.4 培养基第23页
  2.5 抗生素第23页
  2.6 实验所用的引物第23-26页
    2.6.1 构建载体所用的引物第23-25页
    2.6.2 qRT-PCR鉴定基因表达所用引物第25-26页
  2.7 实验方法第26-38页
    2.7.1 拟南芥的种植方法第26-27页
    2.7.2 拟南芥基因组总的RNA提取第27页
    2.7.3 反转录制备拟南芥cDNA第27页
    2.7.4 PCR扩增第27-28页
    2.7.5 回收目的DNA片段第28页
    2.7.6 目的DNA的纯化第28-29页
    2.7.7 大肠杆菌的感受态制备和转化第29-30页
    2.7.8 大肠杆菌的转化第30页
    2.7.9 质粒DNA的提取第30-31页
    2.7.10 重组质粒的鉴定第31页
    2.7.11 拟南芥的农杆菌转化第31-32页
    2.7.12 实时定量PCR检测基因表达第32页
    2.7.13 NBT染色第32页
    2.7.14 DAB染色第32-33页
    2.7.15 GUS染色第33页
    2.7.16 酵母转化方法第33-34页
    2.7.17 酵母筛库第34-35页
    2.7.18 蛋白的小量诱导第35页
    2.7.19 带GST标签的蛋白质的纯化第35-36页
    2.7.20 蛋白的浓缩第36页
    2.7.21 Western blot第36-38页
3 结果与分析第38-48页
  3.1 强光下活性氧的变化及相关基因的表达第38-40页
    3.1.1 GPX7调节强光下活性氧的产生第38-39页
    3.1.2 GPX7功能缺失导致强光下相关基因的表达发生变化第39-40页
  3.2 铁胁迫下的GPX7的功能第40-44页
    3.2.1 缺铁下gpx7的表型分析第40页
    3.2.2 缺铁下gpx7的叶绿素荧光分析第40-41页
    3.2.3 缺铁下GPX7的表达分析第41-42页
    3.2.4 缺铁与调节gpx7突变体的活性氧产生第42-43页
    3.2.5 缺铁对铁偶联相关基因表达的影响第43-44页
  3.3 GPX7下游调控因子的分析第44-46页
    3.3.1 GPX7及相关基因酵母载体的构建第44-45页
    3.3.2 寻找与GPX7相互作用的蛋白第45-46页
  3.4 GPX7调节的氧化还原的分析第46-48页
4 讨论第48-52页
  4.1 GPX7调控的光氧化还原过程第48-49页
  4.2 铁参与光氧化还原过程的调节第49-50页
  4.3 GPX7下游调控因子第50-52页
5 结论第52-54页
参考文献第54-60页
致谢第60页

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