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FMN结合蛋白在拟南芥突变体筛选中的应用
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FMN结合蛋白在拟南芥突变体筛选中的应用
论文目录
摘要
第1-6页
ABSTRACT
第6-8页
缩写词
第8-13页
1 前言
第13-23页
1.1 植物体内ROS的产生
第13-14页
1.2 ROS的功能
第14-15页
1.2.1 ROS调控植物器官的生长发育
第14-15页
1.2.2 ROS在植物防卫反应中的作用
第15页
1.3 ROS清除机制
第15-16页
1.3.1 酶促清除系统
第16页
1.4 拟南芥
第16-17页
1.4.1 拟南芥的生物学特性
第16-17页
1.4.2 拟南芥的遗传学特性
第17页
1.5 FMN结合蛋白的结构与功能
第17-19页
1.6 EMS诱变筛选突变体原理
第19-21页
1.7 立题依据
第21-23页
2 材料与方法
第23-41页
2.1 实验设备
第23-24页
2.2 常用实验软件及生物网站
第24页
2.2.1 常用实验软件
第24页
2.2.2 常用生物网站
第24页
2.3 实验材料、菌株和载体
第24-25页
2.3.1 实验材料
第24页
2.3.2 载体及菌株
第24-25页
2.4 实验试剂及重要耗材
第25-26页
2.5 实验溶液及培养基配制
第26-31页
2.5.1 常规溶液配制
第26-27页
2.5.2 抗生素的配制
第27页
2.5.3 常用培养基的配制
第27-28页
2.5.4 SDS-PAGE所用溶液配制
第28-29页
2.5.5 蛋白原核表达纯化溶液配制
第29页
2.5.6 SDS-PAGE蛋白胶的配制
第29-30页
2.5.7 EMS诱变试剂配制
第30-31页
2.6 实验方法
第31-41页
2.6.1 DH5α 大肠杆菌感受态细胞的制备
第31页
2.6.2 载体构建
第31-34页
2.6.3 原核蛋白的表达和提取
第34页
2.6.4 农杆菌感受态的制备与转化
第34-35页
2.6.5 拟南芥种植方法
第35页
2.6.6 农杆菌转染拟南芥植株
第35-36页
2.6.7 转基因植株的筛选
第36页
2.6.8 拟南芥DNA的提取
第36-37页
2.6.9 利用Trizol法提取拟南芥总RNA
第37页
2.6.10 反转录制备拟南芥cDNA
第37-38页
2.6.11 拟南芥纯合体的鉴定
第38页
2.6.12 EMS诱变
第38页
2.6.13 突变体筛选条件的确定
第38-39页
2.6.14 体式荧光显微镜筛选突变体
第39-41页
3 结果分析
第41-59页
3.1 FMN结合蛋白表达载体的构建
第41-42页
3.2 FMN结合蛋白在大肠杆菌中的表达和提纯
第42页
3.3 FMN结合蛋白的紫外可视吸收测定
第42-43页
3.4 FMN结合蛋白的荧光光谱测定
第43-44页
3.5 FMN结合蛋白在大肠杆菌体内成像
第44-45页
3.6 FMN结合蛋白体内荧光随时间变化情况
第45-46页
3.7 不同浓度H2O2和DTT处理后FMN结合蛋白体内成像
第46-48页
3.8 FMN结合蛋白转拟南芥超表达载体的构建
第48-49页
3.9 FMN结合蛋白转植物纯合体鉴定
第49-50页
3.10 EMS诱变
第50-51页
3.11 FMN结合蛋白氧化还原敏感突变体初筛指标的确定
第51-56页
3.11.1 不同浓度H2O2处理
第51-52页
3.11.2 不同浓度SA处理
第52-53页
3.11.3 不同浓度NaCl处理
第53-54页
3.11.4 不同浓度甘露醇处理
第54-55页
3.11.5 不同浓度MV处理
第55-56页
3.12 FMN结合蛋白ROS相关突变体筛选
第56-59页
4 讨论
第59-61页
4.1 对FMN结合蛋白光谱测定结果的分析
第59-60页
4.2 对FMN结合蛋白大肠杆菌体内成像结果的分析
第60页
4.3 对FMN结合蛋白氧化还原突变体初步筛选条件确定的结果分析
第60页
4.4 对FMN结合蛋白氧化还原突变体筛选结果的预测
第60-61页
5 结论
第61-63页
参考文献
第63-69页
致谢
第69-71页
攻读学位期间发表的学术论文目录
第71页
本篇论文共
71
页,
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