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FMN结合蛋白在拟南芥突变体筛选中的应用

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FMN结合蛋白在拟南芥突变体筛选中的应用
论文目录
 
摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
缩写词第8-13页
1 前言第13-23页
  1.1 植物体内ROS的产生第13-14页
  1.2 ROS的功能第14-15页
    1.2.1 ROS调控植物器官的生长发育第14-15页
    1.2.2 ROS在植物防卫反应中的作用第15页
  1.3 ROS清除机制第15-16页
    1.3.1 酶促清除系统第16页
  1.4 拟南芥第16-17页
    1.4.1 拟南芥的生物学特性第16-17页
    1.4.2 拟南芥的遗传学特性第17页
  1.5 FMN结合蛋白的结构与功能第17-19页
  1.6 EMS诱变筛选突变体原理第19-21页
  1.7 立题依据第21-23页
2 材料与方法第23-41页
  2.1 实验设备第23-24页
  2.2 常用实验软件及生物网站第24页
    2.2.1 常用实验软件第24页
    2.2.2 常用生物网站第24页
  2.3 实验材料、菌株和载体第24-25页
    2.3.1 实验材料第24页
    2.3.2 载体及菌株第24-25页
  2.4 实验试剂及重要耗材第25-26页
  2.5 实验溶液及培养基配制第26-31页
    2.5.1 常规溶液配制第26-27页
    2.5.2 抗生素的配制第27页
    2.5.3 常用培养基的配制第27-28页
    2.5.4 SDS-PAGE所用溶液配制第28-29页
    2.5.5 蛋白原核表达纯化溶液配制第29页
    2.5.6 SDS-PAGE蛋白胶的配制第29-30页
    2.5.7 EMS诱变试剂配制第30-31页
  2.6 实验方法第31-41页
    2.6.1 DH5α 大肠杆菌感受态细胞的制备第31页
    2.6.2 载体构建第31-34页
    2.6.3 原核蛋白的表达和提取第34页
    2.6.4 农杆菌感受态的制备与转化第34-35页
    2.6.5 拟南芥种植方法第35页
    2.6.6 农杆菌转染拟南芥植株第35-36页
    2.6.7 转基因植株的筛选第36页
    2.6.8 拟南芥DNA的提取第36-37页
    2.6.9 利用Trizol法提取拟南芥总RNA第37页
    2.6.10 反转录制备拟南芥cDNA第37-38页
    2.6.11 拟南芥纯合体的鉴定第38页
    2.6.12 EMS诱变第38页
    2.6.13 突变体筛选条件的确定第38-39页
    2.6.14 体式荧光显微镜筛选突变体第39-41页
3 结果分析第41-59页
  3.1 FMN结合蛋白表达载体的构建第41-42页
  3.2 FMN结合蛋白在大肠杆菌中的表达和提纯第42页
  3.3 FMN结合蛋白的紫外可视吸收测定第42-43页
  3.4 FMN结合蛋白的荧光光谱测定第43-44页
  3.5 FMN结合蛋白在大肠杆菌体内成像第44-45页
  3.6 FMN结合蛋白体内荧光随时间变化情况第45-46页
  3.7 不同浓度H2O2和DTT处理后FMN结合蛋白体内成像第46-48页
  3.8 FMN结合蛋白转拟南芥超表达载体的构建第48-49页
  3.9 FMN结合蛋白转植物纯合体鉴定第49-50页
  3.10 EMS诱变第50-51页
  3.11 FMN结合蛋白氧化还原敏感突变体初筛指标的确定第51-56页
    3.11.1 不同浓度H2O2处理第51-52页
    3.11.2 不同浓度SA处理第52-53页
    3.11.3 不同浓度NaCl处理第53-54页
    3.11.4 不同浓度甘露醇处理第54-55页
    3.11.5 不同浓度MV处理第55-56页
  3.12 FMN结合蛋白ROS相关突变体筛选第56-59页
4 讨论第59-61页
  4.1 对FMN结合蛋白光谱测定结果的分析第59-60页
  4.2 对FMN结合蛋白大肠杆菌体内成像结果的分析第60页
  4.3 对FMN结合蛋白氧化还原突变体初步筛选条件确定的结果分析第60页
  4.4 对FMN结合蛋白氧化还原突变体筛选结果的预测第60-61页
5 结论第61-63页
参考文献第63-69页
致谢第69-71页
攻读学位期间发表的学术论文目录第71页

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