论文目录 | |
| 缩写词 | 第1-4页 |
| 中文摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-33页 |
| 1.1 生长素研究简介 | 第12页 |
| 1.2 生长素的合成 | 第12-21页 |
| 1.2.1. 色氨酸的合成及色氨酸非依赖途径 | 第14页 |
| 1.2.2. IPA途径 | 第14-18页 |
| 1.2.3. IAM途径 | 第18-19页 |
| 1.2.4. IAOX途径 | 第19-20页 |
| 1.2.5. TAM途径 | 第20-21页 |
| 1.2.6. 生长素的合成是局部的并不是细胞自主性的过程 | 第21页 |
| 1.3. 生长素的运输 | 第21-27页 |
| 1.3.1. 生长素的输入和输出载体 | 第23-24页 |
| 1.3.2. PIN蛋白家族 | 第24页 |
| 1.3.4. PIN蛋白的组织及亚细胞定位 | 第24-27页 |
| 1.3.5. AUX1/LAX输入载体 | 第27页 |
| 1.4. 生长素的信号途径 | 第27-32页 |
| 1.4.1. 生长素的感知 | 第29页 |
| 1.4.2. TIR1/AFB - auxin - Aux/IAA | 第29-30页 |
| 1.4.3. ABP1 | 第30-31页 |
| 1.4.4. SKP2a | 第31-32页 |
| 1.5. 本论文研究的目的和意义 | 第32-33页 |
| 第二章 材料与方法 | 第33-45页 |
| 2.1. 实验材料 | 第33-34页 |
| 2.1.1. 植物材料与种植条件 | 第33页 |
| 2.1.2. 筛选的拟南芥T-DNA插入突变体库、生态型与其所对应的载体 | 第33页 |
| 2.1.3. 实验中用到的其它拟南芥种子 | 第33-34页 |
| 2.2. 常用试剂和仪器 | 第34页 |
| 2.3. 常用试剂配方 | 第34-37页 |
| 2.4. 实验方法 | 第37-38页 |
| 2.4.1. 突变体的筛选 | 第37页 |
| 2.4.2. 突变体的生化互补 | 第37页 |
| 2.4.3. 突变体与aux1-7/pDR5::GUS、ckrc1/pDR5::GUS、pin2/pDR5::GUS、wei2/pDR5::GUS、wei7/pDR5::GUS、DR5::GUS、CYCB::GUS等的杂交 | 第37-38页 |
| 2.4.4. 杂交的步骤 | 第38页 |
| 2.5. DNA的提取(简单CTAB法) | 第38-39页 |
| 2.6. 半定量PCR | 第39-40页 |
| 2.6.1. 总RNA的提取 | 第39页 |
| 2.6.2. 基因组DNA的去除 | 第39页 |
| 2.6.3. cDNA第一条链的合成(反转录反应) | 第39-40页 |
| 2.6.4. 结果 | 第40页 |
| 2.7. GUS染色 | 第40页 |
| 2.8. Tai1-PCR | 第40-41页 |
| 2.8.1. Tail-PCR反应体系 | 第40页 |
| 2.8.2. Tail-PCR的反应程序 | 第40-41页 |
| 2.9. T-DNA插入位点左右边界的鉴定 | 第41-42页 |
| 2.9.1. 加PCR前的准备工作 | 第41页 |
| 2.9.2. PCR反应体系 | 第41-42页 |
| 2.10. 反向PCR方法克隆突变基因 | 第42-45页 |
| 2.10.1. 反向PCR的原理 | 第42页 |
| 2.10.2.反向PCR的步骤 | 第42-45页 |
| 第三章 实验结果 | 第45-78页 |
| 3.1. 突变体初筛情况 | 第45页 |
| 3.2. 复筛出的突变体的详细名称及统计 | 第45-50页 |
| 3.3. 突变体在MS和ZT上的表型分析 | 第50-54页 |
| 3.3.1. 从CS22830库筛选到的11株突变体,这个库的生态背景是Ws-2。 | 第51-52页 |
| 3.3.2. CS84442库筛选到的28个突变体,这个库的生态背景是Ws-2。 | 第52-53页 |
| 3.3.3. CS31087库筛选到的10个突变体,其生态背景是Col-6 | 第53页 |
| 3.3.4. CS21995库筛选到的2个突变体,生态背景为Col-7。 | 第53-54页 |
| 3.3.5. CS6502库筛选到的2个突变体,其生态背景也是Ws-2。 | 第54页 |
| 3.4. 通过生化互补结果,对53个突变体的分类 | 第54-61页 |
| 3.4.1. aux1类突变体的生化互补结果(+ZT) | 第55-56页 |
| 3.4.2. pin2类突变体的生化互补结果(+/-ZT) | 第56-59页 |
| 3.4.3. ckrc1类突变体的生化互补结果(+ZT) | 第59-61页 |
| 3.4.4. ckrw类突变体的生化互补结果(+/-ZT) | 第61页 |
| 3.4.5. 弱表型突变体的生化互补结果 | 第61页 |
| 3.6. 突变体等位杂交结果及分析 | 第61-67页 |
| 3.6.1. pin2类突变体的杂交结果 | 第62-65页 |
| 3.6.2. ckrc1类突变体的得为杂交结果 | 第65-67页 |
| 3.7. 突变体c5的研究 | 第67-71页 |
| 3.7.1. c5的生化互补结果(+ZT) | 第68页 |
| 3.7.2. c5与pin2/pDR5::GUS的遗传杂交分析 | 第68-69页 |
| 3.7.3. c5的植株表型分析 | 第69页 |
| 3.7.4. c5花的表型及花粉的亚历山大染色 | 第69-70页 |
| 3.7.5. c5的显隐性分析 | 第70页 |
| 3.7.6. c5突变体的基因克隆 | 第70-71页 |
| 3.8. 突变体lb113的研究 | 第71-78页 |
| 3.8.1. lb113表型的探索及确定 | 第72页 |
| 3.8.2. lb113的生化互补结果(1μ M ZT) | 第72-73页 |
| 3.8.3. lb113植株表型的分析 | 第73-74页 |
| 3.8.4. lb113不同器官的表型分析 | 第74-75页 |
| 3.8.5. lb113在不同浓度ZT上的根长 | 第75页 |
| 3.8.6. lb113的胚胎结构及花粉的亚历山大染色 | 第75-76页 |
| 3.8.7. lb113的显隐性分析 | 第76页 |
| 3.8.8. lb113遗传分离比的统计 | 第76-78页 |
| 第四章 讨论和展望 | 第78-84页 |
| 4.1. 根中生长素与细胞分裂素的相互作用 | 第78-79页 |
| 4.2. 筛选到的生长素运输突变体 | 第79-80页 |
| 4.2.1. aux1类突变体 | 第79页 |
| 4.2.2. eir1/pin2类突变体 | 第79-80页 |
| 4.2.3. 为何筛选到了这么多的生长素运输突变体 | 第80页 |
| 4.3. 筛选到生长素合成缺陷突变体 | 第80-81页 |
| 4.3.1 生长素合成突变体的研究现状 | 第80页 |
| 4.3.2. 筛选到的ckrc (Cytokinin induced root curling)类突变体 | 第80-81页 |
| 4.4. 筛选到的ckrw (cytokinin induced root waving)类突变体 | 第81页 |
| 4.5. c5突变体与配子体/生长素相关突变体的联系 | 第81页 |
| 4.6. lb113突变体表型的研究和探讨 | 第81-84页 |
| 4.6.1. lb113的生化互补分析 | 第81-82页 |
| 4.6.2. lb113与高细胞分裂素突变体的联系 | 第82页 |
| 4.6.3. lb113与低生长素突变体的联系 | 第82页 |
| 4.6.4. 生长素与独脚金内酯(SL)的关系 | 第82-84页 |
| 第五章 结论 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-100页 |
| 附录 | 第100-108页 |
| 附录一: 引物序列 | 第100页 |
| 附录二: pD991-AP3 T-DNA全序列(右边界——左边界) | 第100-103页 |
| 附录二: pD991-AP3右边界Tail及反向引物 | 第103页 |
| 附录三. pGV3850: 1003左边界序列 | 第103-105页 |
| 附录四. pGV3850: 1003左边界Tail引物 | 第105-106页 |
| 附录五: pD991载体图谱 | 第106-107页 |
| 附录六: lb113和c5图位克隆引物(粗定位) | 第107页 |
| 附录七: lc22在0.005μ M ZT上的表型 | 第107-108页 |
| 致谢 | 第108页 |
