论文目录 | |
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-29页 |
| 1.1 蛋白质分离 | 第11-17页 |
| 1.1.1 蛋白质简介 | 第11-12页 |
| 1.1.2 色谱分离方法 | 第12-14页 |
| 1.1.2.1 凝胶排阻色谱法（SEC） | 第12页 |
| 1.1.2.2 离子交换色谱法 | 第12-13页 |
| 1.1.2.3 亲和色谱法 | 第13页 |
| 1.1.2.4 疏水色谱法 | 第13-14页 |
| 1.1.2.5 反相色谱法 | 第14页 |
| 1.1.3 电泳分离方法 | 第14-16页 |
| 1.1.3.1 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第14-15页 |
| 1.1.3.2 等电聚焦电泳 | 第15页 |
| 1.1.3.3 二维凝胶电泳 | 第15-16页 |
| 1.1.3.4 毛细管电泳 | 第16页 |
| 1.1.4 高丰度蛋白去除方法 | 第16-17页 |
| 1.2 毛细管电泳法分离蛋白质 | 第17-26页 |
| 1.2.1 毛细管电泳仪器构成 | 第17-19页 |
| 1.2.1.1 高压电源及电流回路 | 第17页 |
| 1.2.1.2 毛细管柱 | 第17页 |
| 1.2.1.3 进样系统 | 第17-18页 |
| 1.2.1.4 数据检测与记录系统 | 第18-19页 |
| 1.2.2 毛细管电泳基本概念 | 第19-21页 |
| 1.2.2.1 电泳和电泳淌度 | 第19-20页 |
| 1.2.2.2 电渗和电渗淌度 | 第20页 |
| 1.2.2.3 表观淌度 | 第20-21页 |
| 1.2.2.4 分离度和分离效率 | 第21页 |
| 1.2.3 毛细管电泳-质谱联用分离鉴定蛋白质 | 第21-24页 |
| 1.2.3.1 毛细管区带电泳(CZE)-MS | 第22页 |
| 1.2.3.2 毛细管等电聚焦(cIEF)-MS | 第22-23页 |
| 1.2.3.3 胶束电动毛细管色谱(MEKC)-MS | 第23页 |
| 1.2.3.4 毛细管电色谱(CEC)-MS | 第23页 |
| 1.2.3.5 毛细管凝胶电泳 (CGE)-MS | 第23-24页 |
| 1.2.4 毛细管壁修饰 | 第24-26页 |
| 1.2.4.1 极端pH值法 | 第24页 |
| 1.2.4.2 小分子添加法 | 第24页 |
| 1.2.4.3 物理吸附法 | 第24-25页 |
| 1.2.4.4 永久涂层法 | 第25-26页 |
| 1.3 毛细管速差电泳 | 第26-28页 |
| 1.3.1 毛细管速差电泳的提出 | 第26-27页 |
| 1.3.2 毛细管速差电泳原理基础 | 第27-28页 |
| 1.4 本论文主要研究内容 | 第28-29页 |
| 第2章 不同因素对蛋白质二级结构的影响 | 第29-51页 |
| 2.1 引言 | 第29-31页 |
| 2.2 实验仪器及材料 | 第31-32页 |
| 2.3 仪器和方法 | 第32-34页 |
| 2.3.1 不同pH缓冲溶液的配制 | 第32-33页 |
| 2.3.2 不同离子强度缓冲溶液的配制 | 第33页 |
| 2.3.3 不同含量乙腈水溶液的配制 | 第33页 |
| 2.3.4 实验步骤 | 第33-34页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第34-48页 |
| 2.4.1 pH、离子强度、乙腈含量对溶菌酶性质的影响 | 第34-37页 |
| 2.4.1.1 pH对溶菌酶性质的影响 | 第34-35页 |
| 2.4.1.2 离子强度对溶菌酶性质的影响 | 第35-36页 |
| 2.4.1.3 乙腈含量对溶菌酶性质的影响 | 第36-37页 |
| 2.4.2 pH、离子强度、乙腈含量对BSA性质的影响 | 第37-41页 |
| 2.4.2.1 pH对BSA性质的影响 | 第37-38页 |
| 2.4.2.2 离子强度对BSA性质的影响 | 第38-40页 |
| 2.4.2.3 乙腈含量对BSA性质的影响 | 第40-41页 |
| 2.4.3 pH、离子强度、乙腈含量对 β-乳球蛋白性质的影响 | 第41-44页 |
| 2.4.3.1 pH对 β-乳球蛋白性质的影响 | 第41-42页 |
| 2.4.3.2 离子强度对 β-乳球蛋白性质的影响 | 第42-43页 |
| 2.4.3.3 乙腈含量对 β-乳球蛋白性质的影响 | 第43-44页 |
| 2.4.4 pH、离子强度、乙腈含量对核糖核酸酶A性质的影响 | 第44-48页 |
| 2.4.4.1 pH对核糖核酸酶A性质的影响 | 第44-46页 |
| 2.4.4.2 离子强度对核糖核酸酶A性质的影响 | 第46-47页 |
| 2.4.4.3 乙腈含量对核糖核酸酶A性质的影响 | 第47-48页 |
| 2.5 本章小结 | 第48-51页 |
| 第3章 蛋白质分离条件的优化 | 第51-67页 |
| 3.1 引言 | 第51页 |
| 3.2 实验仪器及材料 | 第51-52页 |
| 3.3 实验部分 | 第52-55页 |
| 3.3.1 毛细管预处理 | 第52-53页 |
| 3.3.1.1 裸管预处理 | 第52-53页 |
| 3.3.1.2 PVA动态涂层管预处理 | 第53页 |
| 3.3.1.3 添加小分子乙腈管预处理 | 第53页 |
| 3.3.2 实验步骤 | 第53-55页 |
| 3.3.2.1 波长的选择 | 第53页 |
| 3.3.2.2 缓冲溶液添加剂的选择 | 第53页 |
| 3.3.2.3 pH的选择 | 第53页 |
| 3.3.2.4 离子强度的选择 | 第53-54页 |
| 3.3.2.5 毛细管电泳分离效果与进样量的关系 | 第54页 |
| 3.3.2.6 分离效果与Ⅰ、Ⅱ相的长度关系 | 第54-55页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第55-66页 |
| 3.4.1 吸收波长的选择 | 第55-58页 |
| 3.4.2 缓冲溶液添加剂的选择 | 第58页 |
| 3.4.3 pH的选择 | 第58-60页 |
| 3.4.4 离子强度的选择 | 第60-63页 |
| 3.4.5 毛细管电泳分离度与进样量的关系 | 第63-64页 |
| 3.4.6 毛细管速差电泳分离度与Ⅰ、Ⅱ相长度的关系 | 第64-66页 |
| 3.5 本章小结 | 第66-67页 |
| 第4章 毛细管速差电泳分离标准蛋白混合物 | 第67-85页 |
| 4.1 引言 | 第67-69页 |
| 4.2 实验仪器及材料 | 第69-70页 |
| 4.3 实验部分 | 第70-72页 |
| 4.3.1 毛细管速差电泳装置制作 | 第70-71页 |
| 4.3.2 实验操作 | 第71-72页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第72-83页 |
| 4.4.1 “割大留小”去除高丰度蛋白 | 第72-77页 |
| 4.4.2 “割大留小”定量低丰度蛋白 | 第77-79页 |
| 4.4.3 “多重切割”增大蛋白分离度 | 第79-83页 |
| 4.4.3.1 溶菌酶-BSA分离 | 第79-81页 |
| 4.4.3.2 β 乳球蛋白-BSA分离 | 第81-82页 |
| 4.4.3.3 溶菌酶-β 乳球蛋白-核糖核酸酶A的分离 | 第82-83页 |
| 4.5 本章小结 | 第83-85页 |
| 第5章 结论与展望 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-97页 |
| 发表论文情况说明 | 第97-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
