论文目录 | |
摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
第1章 绪论 | 第11-18页 |
1.1 赤潮概述 | 第11-12页 |
1.1.1 赤潮的形成原因及危害 | 第11-12页 |
1.1.2 赤潮的预防和治理 | 第12页 |
1.2 东海原甲藻赤潮 | 第12-14页 |
1.2.1 光照强度对东海原甲藻赤潮发生的作用 | 第13页 |
1.2.2 温度对东海原甲藻赤潮发生的作用 | 第13页 |
1.2.3 氮磷营养盐对东海原甲藻赤潮发生的作用 | 第13-14页 |
1.3 基因克隆与表达的分子生物学研究方法 | 第14-15页 |
1.3.1 RACE技术 | 第14页 |
1.3.2 实时荧光定量PCR技术 | 第14-15页 |
1.4 环境胁迫下热激蛋白90和视紫红质基因的研究进展 | 第15-16页 |
1.4.1 国内研究进展 | 第15-16页 |
1.4.2 国外研究进展 | 第16页 |
1.5 本课题的研究内容与意义 | 第16-18页 |
1.5.1 研究内容 | 第16-17页 |
1.5.2 研究意义 | 第17-18页 |
第2章 东海原甲藻HSP90基因的克隆与转录表达 | 第18-45页 |
2.1 引言 | 第18页 |
2.2 材料与方法 | 第18-26页 |
2.2.1 实验藻种与培养 | 第18页 |
2.2.2 实验试剂 | 第18-19页 |
2.2.3 实验仪器设备 | 第19-20页 |
2.2.4 东海原甲藻的胁迫条件处理 | 第20页 |
2.2.5 总RNA的提取 | 第20-21页 |
2.2.6 cDNA第一条链的合成 | 第21-22页 |
2.2.7 HSP90基因的3'RACE和5'RACE | 第22-23页 |
2.2.8 PCR产物的纯化回收、T-A克隆与测序 | 第23-24页 |
2.2.9 序列拼接与生物信息学分析 | 第24-25页 |
2.2.10 HSP90基因在胁迫条件下的表达 | 第25-26页 |
2.3 结果 | 第26-42页 |
2.3.1 RNA的提取和质量鉴定 | 第26-27页 |
2.3.2 HSP90基因的5'RACE | 第27-29页 |
2.3.3 HSP90基因的3'RACE | 第29-32页 |
2.3.4 5'端和3'端序列的拼接及生物信息学分析 | 第32-35页 |
2.3.5 系统发育树的构建 | 第35-36页 |
2.3.6 HSP90基因在胁迫条件下的转录表达 | 第36-42页 |
2.4 讨论 | 第42-44页 |
2.5 本章小结 | 第44-45页 |
第3章 东海原甲藻视紫红质基因的克隆与转录表达 | 第45-73页 |
3.1 引言 | 第45页 |
3.2 材料与方法 | 第45-50页 |
3.2.1 实验藻种与培养 | 第45-46页 |
3.2.2 实验试剂 | 第46页 |
3.2.3 实验仪器设备 | 第46页 |
3.2.4 环境条件处理 | 第46-47页 |
3.2.5 总RNA的提取和cDNA第一条链的合成 | 第47页 |
3.2.6 视紫红质基因的3'RACE和5'RACE | 第47-48页 |
3.2.7 RACE产物的纯化回收、T-A克隆与测序 | 第48-49页 |
3.2.8 序列拼接与生物信息学分析 | 第49页 |
3.2.9 视紫红质基因在不同条件下的表达 | 第49页 |
3.2.10 视紫红质蛋白原核表达载体的构建 | 第49-50页 |
3.2.11 视紫红质最优吸收光谱的确定 | 第50页 |
3.3 结果 | 第50-70页 |
3.3.1 RNA的提取和质量鉴定 | 第50页 |
3.3.2 视紫红质基因的 5'RACE | 第50-53页 |
3.3.3 视紫红质基因的 3'RACE | 第53-56页 |
3.3.4 5'端和3'端序列的拼接 | 第56-57页 |
3.3.5 系统发育树的构建 | 第57-59页 |
3.3.6 视紫红质在不同条件下的表达 | 第59-65页 |
3.3.7 视紫红质蛋白原核表达载体的构建 | 第65-70页 |
3.4 讨论 | 第70-72页 |
3.5 本章小结 | 第72-73页 |
结论 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-85页 |
攻读硕士学位期间发表的论文及其它成果 | 第85-87页 |
致谢 | 第87页 |