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裂殖壶菌CRISPR/Cas9体系的建立及应用于脂肪酸代谢研究

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裂殖壶菌CRISPR/Cas9体系的建立及应用于脂肪酸代谢研究
论文目录
 
摘要第1-4页
abstract第4-8页
第1章 绪论第8-19页
  1.1 n-3 多不饱和脂肪酸研究进展第8-12页
    1.1.1 n-3 多不饱和脂肪酸概述第8-9页
    1.1.2 n-3 多不饱和脂肪酸的生理功能第9-11页
    1.1.3 n-3 多不饱和脂肪酸的来源第11-12页
  1.2 裂殖壶菌研究概况第12-15页
    1.2.1 裂殖壶菌概述第12页
    1.2.2 裂殖壶菌DHA合成途径的研究第12-14页
    1.2.3 裂殖壶菌的遗传转化方法研究进展第14-15页
  1.3 CRISPR/Cas9简述第15-18页
    1.3.1 CRISPR/Cas系统的发现第15页
    1.3.2 CRISPR/Cas的作用机制与分类第15-17页
    1.3.3 CRISPR技术的应用第17-18页
  1.4 研究内容及意义第18-19页
第2章 材料与方法第19-36页
  2.1 实验材料第19-23页
    2.1.1 菌株及质粒第19页
    2.1.2 实验试剂第19-20页
    2.1.3 实验设备第20-21页
    2.1.4 培养基和常用溶液的配制第21-22页
    2.1.5 本研究中所用引物第22-23页
  2.2 实验方法第23-27页
    2.2.1 裂殖壶菌的培养第23页
    2.2.2 基因组DNA的制备第23-25页
    2.2.3 质粒的提取第25-26页
    2.2.4 凝胶及PCR产物回收第26-27页
    2.2.5 琼脂糖凝胶电泳检测第27页
  2.3 抗生素的筛选第27-28页
  2.4 CRISPR/Cas体系的构建及转化第28-33页
    2.4.1 pCRISPR-Schi载体的构建第28-29页
    2.4.2 gRNA的设计和寡核苷酸链合成第29页
    2.4.3 pCRISPR-Schi-gRNA载体的构建第29-30页
    2.4.4 靶向区域上下游同源片段的扩增和连接第30-33页
  2.5 电转化及突变体的鉴定第33-35页
  2.6 生物量和油脂产量分析第35-36页
第3章 结果与讨论第36-42页
  3.1 裂殖壶菌抗性验证第36页
  3.2 pCRISPR-Schi-gRNA质粒构建测序结果第36-37页
  3.3 靶向区域上下游同源片段及Zeocin抗性片段的扩增第37-38页
  3.4 电转化结果及菌株鉴定第38-39页
  3.5 菌株生物量和脂肪酸分析第39-40页
  3.6 讨论第40-42页
第4章 结论与展望第42-44页
  4.1 结论第42页
  4.2 展望第42-44页
参考文献第44-50页
攻读学位期间的研究成果第50-51页
致谢第51-52页

本篇论文共52页,点击这进入下载页面
 
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