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CRP-286位SNP影响表达的机制研究
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CRP-286位SNP影响表达的机制研究
论文目录
中文摘要
第1-4页
Abstract
第4-7页
第一章 前言
第7-21页
1.1 C-反应蛋白(C-reactive protein, CRP)简介
第7-8页
1.1.1 发现历史
第7-8页
1.1.2 CRP的结构和生理功能
第8页
1.2 DNA甲基化
第8-14页
1.2.1 DNA甲基化简介
第9页
1.2.2 DNA甲基化反应机制
第9-10页
1.2.3 真核生物的DNA甲基化
第10-11页
1.2.4 DNA甲基化导致基因沉默
第11-12页
1.2.5 哺乳动物的DNA甲基化及甲基转移酶
第12-14页
1.3 DNA去甲基化
第14-17页
1.3.1 DNA主动和被动去甲基化
第14-15页
1.3.2 哺乳动物中的DNA去甲基化
第15页
1.3.3 DNA主动去甲基化的机制研究
第15-16页
1.3.4 TET双加氧酶
第16-17页
1.4 CRISPR-Cas9
第17-21页
1.4.1 CRISPR-Cas9的发现及研究进展
第17-19页
1.4.2CRISPR-Cas9的原理
第19-21页
第二章 材料与方法
第21-31页
2.1 细胞、兔组织材料
第21页
2.1.1 细胞培养条件
第21页
2.1.2 兔组织材料
第21页
2.2 提取RNA及反转录
第21页
2.3 各种PCR体系
第21-24页
2.3.1 普通PCR
第21-23页
2.3.2 克隆基因
第23页
2.3.3 半定量Realtime PCR
第23-24页
2.4 DNA甲基化的检测方法
第24页
2.5 DNA去甲基化的检测
第24-25页
2.6 人工核酸内切酶CRISPR-Cas9技术
第25-30页
2.6.1 设计sgRNA
第25-26页
2.6.2 构建crispr-gRNA载体
第26-28页
2.6.3 Oligo的设计
第28页
2.6.4 分离克隆细胞系(稀释法)
第28-30页
2.7 荧光素酶报告基因实验
第30-31页
第三章 结果分析与讨论
第31-45页
3.1 细胞系甲基化水平的定量检测
第31-33页
3.2 兔组织甲基化水平的定量检测
第33-35页
3.3 Hep 3B细胞系去甲基化定量检测
第35-37页
3.4 兔肝脏去甲基化定量检测
第37-38页
3.5 CRP表达模式
第38-40页
3.6 启动子区域SNP位点对转录的影响
第40-43页
3.7 CRP启动子-286 位点定点突变
第43-45页
第四章 结论
第45-47页
第五章 展望
第47-48页
参考文献
第48-56页
致谢
第56页
本篇论文共
56
页,
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。
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