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人β-防御素-2的异源重组表达研究

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人β-防御素-2的异源重组表达研究
论文目录
 
摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
缩写表第10-11页
第1章 前言第11-19页
  1.1 抗菌肽简介第11-14页
    1.1.1 结构特点与理化性质第11页
    1.1.2 来源第11-12页
    1.1.3 分类第12页
    1.1.4 应用前景第12-14页
  1.2 HBD-2简介第14-16页
    1.2.1 HBD-2结构第14-15页
    1.2.2 组织分布第15页
    1.2.3 功能活性第15-16页
  1.3 HBD-2在基因工程中的研究进展第16-18页
  1.4 本课题研究内容及意义第18-19页
    1.4.1 研究内容第18页
    1.4.2 研究意义第18-19页
第2章 人β-防御素-2在大肠杆菌宿主中的表达研究第19-46页
  2.1 实验材料第19-23页
    2.1.1 质粒与菌株第19-20页
    2.1.2 试剂盒和工具酶第20页
    2.1.3 引物第20页
    2.1.4 实验仪器第20页
    2.1.5 主要溶液配置第20-23页
  2.2 实验方法第23-32页
    2.2.1 目的基因及引物的设计与合成第23-24页
    2.2.2 目的片段的扩增第24页
    2.2.3 产物的回收第24-25页
    2.2.4 目的基因与T载体连接第25-27页
    2.2.5 目的基因表达载体的构建第27-28页
    2.2.6 重组大肠杆菌蛋白的诱导表达及鉴定第28-30页
    2.2.7 重组蛋白表达条件的优化第30页
    2.2.8 mHBD-2的分离纯化第30-31页
    2.2.9 体外活性分析第31-32页
  2.3 实验结果第32-44页
    2.3.1 目的基因的PCR扩增结果第32-33页
    2.3.2 重组表达质粒pHU004、pHU005酶切验证结果第33-34页
    2.3.3 重组表达菌株的鉴定第34页
    2.3.4 表达产物的SDS-PAGE分析第34-35页
    2.3.5 表达产物的Western-blot分析第35-36页
    2.3.6 mHBD-2在大肠杆菌中表达条件的选择第36-38页
    2.3.7 目的蛋白的纯化第38-42页
    2.3.8 mHBD-2抑菌活性研究第42-44页
  2.4 讨论第44-45页
  2.5 本章小结第45-46页
第3章 人β-防御素-2在乳酸菌宿主中的表达研究第46-64页
  3.1 实验材料第46-48页
    3.1.1 菌株和质粒第46-47页
    3.1.2 试剂盒和工具酶第47页
    3.1.3 引物第47页
    3.1.4 实验仪器第47-48页
    3.1.5 主要溶液配制第48页
  3.2 实验方法第48-55页
    3.2.1 建立诱导型乳酸菌表达系统第48-51页
    3.2.2 建立组合型乳酸菌表达系统第51-52页
    3.2.3 建立串联型乳酸菌表达系统第52-54页
    3.2.4 体外抑菌活性的检测第54-55页
  3.3 实验结果第55-61页
    3.3.1 重组诱导型乳酸菌表达系统的鉴定结果第55-57页
    3.3.2 重组组合型乳酸菌表达系统的鉴定结果第57-59页
    3.3.3 重组串联型乳酸菌表达系统的鉴定结果第59-61页
    3.3.4 抑菌效果分析第61页
  3.4 讨论第61-62页
  3.5 本章小结第62-64页
全文结论第64-65页
论文创新点第65-66页
展望第66-67页
参考文献第67-73页
致谢第73页

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