论文目录 | |
| 摘要 | 第1-5页 |
| abstract | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-20页 |
| 1.1 植物富含甘氨酸/脯氨酸蛋白基因的研究进展 | 第10-16页 |
| 1.1.1 富含甘氨酸蛋白基因（GRP）的研究进展 | 第10-12页 |
| 1.1.2 富含脯氨酸蛋白基因（PRP）的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.1.3 富含甘氨酸和脯氨酸蛋白基因（GPRP）的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.2 水稻OsGPRP蛋白基因的研究进展 | 第16页 |
| 1.3 生物信息学分析在功能基因研究中的应用 | 第16-19页 |
| 1.3.1 生物数据库 | 第17页 |
| 1.3.2 多序列比对和系统进化树分析 | 第17-18页 |
| 1.3.3 基因组和蛋白质分析 | 第18-19页 |
| 1.4 本研究的主要内容、目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-39页 |
| 2.1 实验仪器及材料 | 第20-26页 |
| 2.1.1 主要试剂与仪器设备 | 第20页 |
| 2.1.2 主要分析软件与在线网站 | 第20页 |
| 2.1.3 主要载体与菌体 | 第20页 |
| 2.1.4 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.5 试剂与培养基的配制 | 第20-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-39页 |
| 2.2.1 生物信息学分析水稻OsGPRP家族基因 | 第26-27页 |
| 2.2.2 水稻材料的处理与烟草材料的种植 | 第27页 |
| 2.2.3 粳稻中花11不同组织总RNA提取 | 第27-28页 |
| 2.2.4 cDNA第一链合成 | 第28页 |
| 2.2.5 qRT-PCR检测OsGPRP家族基因的表达 | 第28-29页 |
| 2.2.6 RT-PCR扩增目的基因片段 | 第29-31页 |
| 2.2.7 OsGPRPs过量表达载体的构建、转化及转基因植株的鉴定 | 第31-35页 |
| 2.2.8 OsGPRP与GFP融合表达载体的构建与烟草瞬时表达 | 第35-37页 |
| 2.2.9 OsGPRP原核表达载体的构建、蛋白表达与检测 | 第37-39页 |
| 第三章 结果与分析 | 第39-64页 |
| 3.1 水稻OsGPRP家族基因生物信息学分析 | 第39-45页 |
| 3.1.1 水稻OsGPRP家族基因的基本信息 | 第39-40页 |
| 3.1.2 水稻OsGPRP家族基因的染色体分布 | 第40-41页 |
| 3.1.3 水稻OsGPRP基因的启动子顺式作用元件分析 | 第41-42页 |
| 3.1.4 水稻OsGPRP蛋白保守结构域分析 | 第42-44页 |
| 3.1.5 水稻OsGPRP蛋白系统进化树分析 | 第44-45页 |
| 3.1.6 水稻OsGPRP蛋白亚细胞定位预测 | 第45页 |
| 3.2 正常和逆境下OsGPRP在水稻不同组织中的表达模式 | 第45-48页 |
| 3.2.1 水稻不同组织的总RNA提取 | 第45-46页 |
| 3.2.2 正常情况下OsGPRPs在水稻不同组织中的差异表达 | 第46页 |
| 3.2.3 逆境胁迫下OsGPRP基因在水稻不同组织的表达模式 | 第46-48页 |
| 3.3 OsGPRPs过量表达转基因纯合植株的获得 | 第48-55页 |
| 3.3.1 过量表达目的基因片段克隆 | 第48-49页 |
| 3.3.2 过量表达载体的构建 | 第49-52页 |
| 3.3.3 过量表达载体的遗传转化 | 第52-53页 |
| 3.3.4 转基因T0代阳性植株的鉴定与T2代阳性纯合植株的筛选 | 第53-54页 |
| 3.3.5 过量表达转基因T2代纯合株系的qRT-PCR检测 | 第54-55页 |
| 3.4 OsGPRP蛋白亚细胞定位分析 | 第55-59页 |
| 3.4.1 目的基因片段的克隆 | 第55页 |
| 3.4.2 OsGPRPs与GFP融合表达载体的构建 | 第55-58页 |
| 3.4.3 OsGPRP与GFP融合表达载体转化农杆菌 | 第58页 |
| 3.4.4 OsGPRP蛋白亚细胞定位分析 | 第58-59页 |
| 3.5 OsGPRP蛋白原核表达分析 | 第59-64页 |
| 3.5.1 目的基因片段的克隆 | 第59-60页 |
| 3.5.2 原核表达载体的构建 | 第60-62页 |
| 3.5.3 OsGPRP蛋白在大肠杆菌中的表达与检测 | 第62-64页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第64-69页 |
| 4.1 GPRP蛋白基因结构特征和进化关系 | 第64页 |
| 4.2 OsGPRP基因启动子顺式作用元件分析 | 第64-65页 |
| 4.3 OsGPRP家族基因表达模式与功能 | 第65-67页 |
| 4.4 OsGPRP蛋白亚细胞定位 | 第67页 |
| 4.5 水稻OsGPRP基因后续生物学功能研究 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-75页 |
| 附录 | 第75-79页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第79页 |
