论文目录 | |
摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
文献综述 | 第10-16页 |
第一章 研究进展 | 第10-16页 |
1.1 PAT1的研究进展 | 第10-12页 |
1.1.1 PAT1概述 | 第10页 |
1.1.2 PAT1在细胞内的定位 | 第10页 |
1.1.3 PAT1蛋白的翻译后修饰 | 第10-11页 |
1.1.4 PAT1在调节mTORC1中的作用 | 第11-12页 |
1.2 mTORC1研究进展 | 第12-14页 |
1.2.1 mTORC概述 | 第12页 |
1.2.2 氨基酸调节mTORC1信号通路 | 第12-13页 |
1.2.3 溶酶体是激活mTORC1的一个重要位点 | 第13-14页 |
1.3 蛋白质降解途径 | 第14-16页 |
1.3.1 溶酶体降解途径 | 第14-15页 |
1.3.2 泛素化-蛋白酶体降解途径 | 第15-16页 |
研究背景 | 第16-17页 |
试验研究 | 第17-46页 |
第二章 过表达无糖基化修饰的PAT1对于mTORC1活性的影响 | 第17-31页 |
2.1 材料 | 第17-19页 |
2.1.1 主要试剂 | 第17-18页 |
2.1.2 主要仪器 | 第18-19页 |
2.2 方法 | 第19-25页 |
2.2.1 pEGFP-PAT13NQ真核表达载体的构建 | 第19-21页 |
2.2.2 稳定表达EGFP-PAT13NQ细胞株的构建 | 第21-24页 |
2.2.3 过表达无糖基化修饰的PAT1对于mTORC1活性的影响 | 第24-25页 |
2.3 试验结果 | 第25-29页 |
2.3.1 pEGFP-PAT13NQ重组载体的酶切鉴定结果 | 第25页 |
2.3.2 pEGFP-PAT13NQ重组载体的测序结果 | 第25页 |
2.3.3 Western Blot鉴定稳定表达EGFP-PAT13NQ的细胞株结果 | 第25-27页 |
2.3.4 Western Blot检测过表达EGFP-PAT13NQ对mTORC1的影响结果 | 第27-29页 |
2.4 讨论 | 第29-30页 |
2.5 小结 | 第30-31页 |
第三章 糖基化修饰对PAT1的稳定性的影响 | 第31-41页 |
3.1 材料 | 第31-32页 |
3.1.1 主要试剂 | 第31页 |
3.1.2 主要仪器 | 第31-32页 |
3.2 方法 | 第32-35页 |
3.2.1 荧光定量检测EGFP-PAT13NQ的m RNA表达水平 | 第32-34页 |
3.2.2 瞬时表达EGFP-PAT13NQ的HeLa细胞中EGFP-PAT13NQ的表达情况 | 第34页 |
3.2.3 放线菌酮(CHX)实验 | 第34-35页 |
3.2.4 EGFP-PAT13NQ的降解途径 | 第35页 |
3.3 试验结果 | 第35-39页 |
3.3.1 荧光定量检测EGFP-PAT13NQ的m RNA表达水平结果 | 第35-36页 |
3.3.2 HeLa细胞中EGFP-PAT13NQ的表达情况 | 第36-37页 |
3.3.3 Western Blot检测CHX处理的细胞样品结果 | 第37页 |
3.3.4 Western Blot检测用不同降解途径抑制剂处理的细胞样品结果 | 第37-39页 |
3.4 讨论 | 第39-40页 |
3.5 小结 | 第40-41页 |
第四章 糖基化修饰影响PAT1在细胞内的定位 | 第41-46页 |
4.1 材料 | 第41-42页 |
4.1.1 主要试剂 | 第41页 |
4.1.2 主要仪器 | 第41-42页 |
4.2 方法 | 第42-43页 |
4.2.1 EGFP-PAT13NQ在溶酶体上的表达水平 | 第42页 |
4.2.2 EGFP-PAT13NQ在细胞膜上的表达水平 | 第42-43页 |
4.3 试验结果 | 第43-45页 |
4.3.1 EGFP-PAT13NQ在溶酶体上表达量降低 | 第43-44页 |
4.3.2 EGFP-PAT13NQ在细胞膜上表达量升高 | 第44-45页 |
4.4 讨论 | 第45页 |
4.5 小结 | 第45-46页 |
结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
作者简介 | 第51页 |