论文目录 | |
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 英文缩写表 | 第12-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-25页 |
| 1.1 泛素蛋白酶体途径研究进展 | 第13-15页 |
| 1.1.1 泛素蛋白酶体简介 | 第13-14页 |
| 1.1.2 泛素连接酶E3简介 | 第14-15页 |
| 1.2 植物中的F-box蛋白 | 第15-19页 |
| 1.2.1 F-box蛋白的结构 | 第15页 |
| 1.2.2 F-box蛋白质功能 | 第15-19页 |
| 1.3 ABA的研究进展 | 第19-24页 |
| 1.3.1 ABA的结构 | 第19-20页 |
| 1.3.2 ABA的合成、降解与运输 | 第20页 |
| 1.3.3 ABA的生理作用 | 第20-21页 |
| 1.3.4 ABA信号转导 | 第21-24页 |
| 1.4 立题依据 | 第24-25页 |
| 第2章 FB1、FB2基因的克隆及生物信息学分析 | 第25-41页 |
| 2.1 引言 | 第25页 |
| 2.2 实验材料 | 第25-28页 |
| 2.2.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.2.2 菌株与载体 | 第25-26页 |
| 2.2.3 实验药品试剂 | 第26-27页 |
| 2.2.4 实验仪器 | 第27页 |
| 2.2.5 实验试剂配制 | 第27-28页 |
| 2.3 实验方法 | 第28-34页 |
| 2.3.1 RNA提取 | 第28页 |
| 2.3.2 反转录 | 第28-29页 |
| 2.3.3 PCR扩增 | 第29-30页 |
| 2.3.4 回收目的片段 | 第30-31页 |
| 2.3.5 酶切pEGAD-LUC载体N端 | 第31页 |
| 2.3.6 载体提取 | 第31-32页 |
| 2.3.7 目的片段与载体连接 | 第32页 |
| 2.3.8 大肠杆菌的转化及菌液验证 | 第32-34页 |
| 2.3.9 目的基因与YFP载体连接 | 第34页 |
| 2.4 结果与分析 | 第34-40页 |
| 2.4.1 拟南芥幼苗RNA的提取 | 第34-35页 |
| 2.4.2 RT-PCR法扩增拟南芥目的基因基因 | 第35-36页 |
| 2.4.3 FB1、FB2基因特征 | 第36-37页 |
| 2.4.5 FB1、FB2同源性及进化树分析 | 第37-40页 |
| 2.5 讨论 | 第40-41页 |
| 第3章 FB1和FB2拟南芥转基因植株的获得以及突变体的鉴定 | 第41-55页 |
| 3.1 实验材料、实验药品试剂和实验仪器 | 第41-44页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第41页 |
| 3.1.2 实验药品试剂 | 第41页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第41-42页 |
| 3.1.4 实验试剂配制 | 第42-44页 |
| 3.2 试验方法 | 第44-50页 |
| 3.2.1 种植拟南芥 | 第44-45页 |
| 3.2.2 农杆菌感受态的制备与电击转化 | 第45页 |
| 3.2.3 侵染拟南芥 | 第45-46页 |
| 3.2.4 拟南芥转基因植株的Basta初步筛选 | 第46页 |
| 3.2.5 拟南芥转基因植株的Luminometer瞬时扫描筛选 | 第46页 |
| 3.2.6 拟南芥转基因植物的免疫印迹实验筛选 | 第46-48页 |
| 3.2.7 获得T3代纯合种子 | 第48页 |
| 3.2.8 突变体纯合鉴定 | 第48-50页 |
| 3.3 结果与分析 | 第50-54页 |
| 3.3.1 拟南芥转基因植株的Basta初步筛选结果与分析 | 第50-51页 |
| 3.3.2 拟南芥转基因植株的Luminometer瞬时扫描筛选结果与分析 | 第51页 |
| 3.3.3 拟南芥转基因植株的免疫印迹实验结果与分析 | 第51-52页 |
| 3.3.4 突变体纯合鉴定 | 第52-54页 |
| 3.4 讨论 | 第54-55页 |
| 第4章 FB1和FB2基因在ABA信号传导中的调控分析 | 第55-63页 |
| 4.1 引言 | 第55-56页 |
| 4.2 实验材料、实验药品试剂和实验仪器 | 第56-57页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第56页 |
| 4.2.2 实验药品试剂 | 第56页 |
| 4.2.3 试验试剂的配制 | 第56-57页 |
| 4.2.4 试验仪器 | 第57页 |
| 4.3 试验方法 | 第57-59页 |
| 4.3.1 ABA表型分析 | 第57页 |
| 4.3.2 实时荧光定量PCR（Qpcr） | 第57-59页 |
| 4.4 结果与分析 | 第59-63页 |
| 4.4.1 FB1和FB2在萌发途径中对ABA不敏感 | 第59-60页 |
| 4.4.2 FB1、FB2过表达调节转基因拟南芥中ABA相关基因的转录水平 | 第60-63页 |
| 第5章 FB1蛋白亚细胞定位分析 | 第63-66页 |
| 5.1 实验材料、实验药品试剂和实验仪器 | 第63-64页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第63页 |
| 5.1.2 实验药品试剂 | 第63页 |
| 5.1.3 试验仪器 | 第63页 |
| 5.1.4 试验软件 | 第63-64页 |
| 5.1.5 实验试剂配制 | 第64页 |
| 5.2 FB1蛋白的亚细胞定位 | 第64-65页 |
| 5.3 结果与分析 | 第65-66页 |
| 第6章 结论与展望 | 第66-69页 |
| 6.1 结论 | 第66-67页 |
| 6.2 展望 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-78页 |
| 作者简介 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
