论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-23页 |
| 1.1 多倍化对植物基因组结构影响的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.1.1 异源多倍化对植物基因组结构影响 | 第13-14页 |
| 1.1.2 同源多倍化对植物基因组结构影响 | 第14页 |
| 1.2 人工合成多倍体对植物多倍化研究的意义 | 第14-15页 |
| 1.3 拟南芥的不同生态型植物多倍化研究的意义 | 第15页 |
| 1.4 多倍化对基因组大小的影响 | 第15页 |
| 1.5 多倍化引起基因组结构变异的时间 | 第15-16页 |
| 1.5.1 多倍化后基因组迅速发生结构变异 | 第15-16页 |
| 1.5.2 多倍化后基因组在世代遗传中持续性的结构变异 | 第16页 |
| 1.6 AFLP分子标记技术原理及应用 | 第16-19页 |
| 1.7 多倍化对植物基因表达量的影响 | 第19-20页 |
| 1.7.1 异源多倍化对植物基因表达量影响 | 第19页 |
| 1.7.2 同源多倍化对植物基因表达量影响 | 第19-20页 |
| 1.8 半定量RT-PCR法分析基因表达量 | 第20-21页 |
| 1.9 研究的目的与意义 | 第21-23页 |
| 2 不同倍性拟南芥材料的创制原理与方法 | 第23-28页 |
| 2.1 实验材料与仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.1.1 实验材料遗传及杂交原理 | 第23-24页 |
| 2.1.2 主要的实验仪器设备 | 第24页 |
| 2.2 实验材料创制方法 | 第24-28页 |
| 2.2.1 人工加倍合成拟南芥同源四倍体 | 第24-25页 |
| 2.2.1.1 1/2MS固体培养基的配置 | 第24-25页 |
| 2.2.1.2 秋水仙素诱导合成同源四倍体 | 第25页 |
| 2.2.2 人工杂交合成及鉴定三倍体拟南芥 | 第25-27页 |
| 2.2.2.1 人工杂交合成三倍体拟南芥 | 第25页 |
| 2.2.2.2 人工杂交合成三倍体拟南芥的鉴定 | 第25-27页 |
| 2.2.3 不同生态型拟南芥形态特征比较 | 第27-28页 |
| 3 AFLP法分析拟南芥基因组结构变异 | 第28-48页 |
| 3.1 实验材料与仪器设备 | 第28页 |
| 3.1.1 供试材料 | 第28页 |
| 3.1.2 主要的仪器设备 | 第28页 |
| 3.2 实验方法 | 第28-35页 |
| 3.2.1 拟南芥全基因组DNA的提取、纯化以及检测 | 第28-31页 |
| 3.2.1.1 拟南芥全基因组DNA的提取 | 第28-30页 |
| 3.2.1.2 拟南芥全基因组DNA的纯化 | 第30页 |
| 3.2.1.3 拟南芥全基因组DNA质量的检测 | 第30-31页 |
| 3.2.2 样品DNA的双酶切（Eco R I/Mse I）及连接 | 第31-32页 |
| 3.2.2.1 样品DNA的双酶切（Eco R I/Mse I） | 第31页 |
| 3.2.2.2 样品DNA酶切片段的连接 | 第31-32页 |
| 3.2.3 连接产物的预扩增 | 第32页 |
| 3.2.4 预扩增产物的选择性扩增 | 第32-33页 |
| 3.2.5 选择性扩增产物的聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第33-34页 |
| 3.2.5.1 聚丙烯酰胺凝胶的配置、上样及跑胶 | 第33页 |
| 3.2.5.2 银染法染胶技术原理及步骤 | 第33-34页 |
| 3.2.6 主要溶液的配置 | 第34-35页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第35-45页 |
| 3.3.1 AFLP法分析不同倍性（2x、3x、4x）拟南芥的基因组结构变异 | 第35-37页 |
| 3.3.2 AFLP分析不同世代（F_0、F_9、F_(10)代）拟南芥的基因组结构变异 | 第37-39页 |
| 3.3.3 AFLP分析不同生态型（Col、Ler、Ws）拟南芥的基因组结构变异 | 第39-42页 |
| 3.3.4 AFLP分析不同倍性的野生型和突变体拟南芥的基因组结构变异 | 第42-45页 |
| 3.4 结果讨论 | 第45-48页 |
| 4 对差异性条带的回收、克隆和分析 | 第48-53页 |
| 4.1 实验材料与仪器设备 | 第48页 |
| 4.1.1 供试材料 | 第48页 |
| 4.1.2 主要的仪器设备 | 第48页 |
| 4.2 实验方法 | 第48-50页 |
| 4.2.1 对差异性片段DNA的回收 | 第48-49页 |
| 4.2.2 对差异性片段的克隆及测序 | 第49-50页 |
| 4.2.2.1 差异性片段与PMD19-T vector的连接 | 第49页 |
| 4.2.2.2 PMD19-T vector连接产物的转化及扩大培养 | 第49页 |
| 4.2.2.3 菌液质粒的提取及测序 | 第49-50页 |
| 4.2.3 对差异性片段的生物信息学分析 | 第50页 |
| 4.2.4 主要培养基的配置 | 第50页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第50-51页 |
| 4.4 结果讨论 | 第51-53页 |
| 5 半定量法分析基因组结构变异相关基因的表达量变化 | 第53-60页 |
| 5.1 实验材料与仪器设备 | 第53页 |
| 5.1.1 供试材料 | 第53页 |
| 5.1.2 主要的仪器设备 | 第53页 |
| 5.2 实验原理及方法 | 第53-57页 |
| 5.2.1 半定量RT-PCR实验原理 | 第53-54页 |
| 5.2.2 内参基因的选取和与多倍化导致基因组结构变异相关基因的引物设计 | 第54-55页 |
| 5.2.2.1 内参基因的选取 | 第54页 |
| 5.2.2.2 多倍化导致基因组结构变异相关基因的引物设计 | 第54-55页 |
| 5.2.3 Col型拟南芥二倍体及其同源四倍体RNA的提取、纯化及检测 | 第55-56页 |
| 5.2.3.1 不同倍性（2x、4x）拟南芥总RNA的提取 | 第55页 |
| 5.2.3.2 不同倍性（2x、4x）拟南芥总RNA的纯化 | 第55-56页 |
| 5.2.3.3 不同倍性（2x、4x）拟南芥总RNA的检测 | 第56页 |
| 5.2.4 RNA反转录成c DNA | 第56-57页 |
| 5.2.5 半定量法分析相关基因表达量变化 | 第57页 |
| 5.3 实验结果与分析 | 第57-58页 |
| 5.3.1RNA的浓度及质量检测 | 第57页 |
| 5.3.2 多倍化导致基因组结构变异相关基因的表达量变化分析 | 第57-58页 |
| 5.4 结果讨论 | 第58-60页 |
| 6 结论与展望 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 个人简介与科研成果 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
