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α-葡萄糖苷酶Tcur-1739和AmyS的克隆表达、纯化及性质研究

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α-葡萄糖苷酶Tcur-1739和AmyS的克隆表达、纯化及性质研究
论文目录
 
中文摘要第1-5页
Abstract第5-9页
第一章 前言第9-16页
  1.1 引言第9页
  1.2 嗜热菌概述第9-10页
  1.3 α-葡萄糖苷酶概述第10-11页
  1.4 α-葡萄糖苷酶的理化性质第11页
  1.5 α-葡萄糖苷酶的催化机制第11-13页
  1.6 α-葡萄糖苷酶的结构和功能第13页
  1.7 α-葡萄糖苷酶的应用第13-14页
  1.8 α-葡萄糖苷酶的研究状况第14页
  1.9 本课题研究的意义与研究内容第14-16页
第二章 α-葡萄糖苷酶基因克隆及原核表达系统的构建第16-30页
  2.1 引言第16页
  2.2 实验仪器与材料第16-20页
  2.3 实验方法第20-25页
  2.4 结果与讨论第25-29页
    2.4.1 基因组提取结果第25页
    2.4.2 感受态制备结果第25-26页
    2.4.3 目的基因tcur-1739 和amyS的扩增结果第26-27页
    2.4.4 质粒pET-21a和pET-28a的双酶切及回收第27页
    2.4.5 重组质粒的构建及鉴定第27-29页
  2.5 小结第29-30页
第三章 α-葡萄糖苷酶Tcur-1739 和AmyS的表达、表达条件优化、纯化及酶活测定第30-43页
  3.1 引言第30页
  3.2 实验仪器与材料第30-31页
  3.3 实验方法第31-36页
  3.4 结果与讨论第36-42页
    3.4.1 目的蛋白的SDS-PAGE第36-37页
    3.4.2 蛋白浓度测定第37页
    3.4.3 目的蛋白酶活测定第37-38页
    3.4.4 诱导温度对工程菌表达目的蛋白水平的影响第38-39页
    3.4.5 IPTG浓度对工程菌表达目的蛋白水平的影响第39-40页
    3.4.6 α-葡萄糖苷酶Tcur-1739 和AmyS的纯化结果第40-42页
  3.5 小结第42-43页
第四章 α-葡萄糖苷酶Tcur-1739 和AmyS的酶学性质表征第43-54页
  4.1 引言第43-44页
  4.2 实验仪器与材料第44页
  4.3 实验方法第44-45页
  4.4 结果与讨论第45-53页
    4.4.1 最适pH的测定结果第45-46页
    4.4.2 最适反应温度的测定结果第46-47页
    4.4.3 热稳定性测定结果第47页
    4.4.4 pH稳定性测定结果第47-48页
    4.4.5 有机溶剂对酶稳定性的影响第48-49页
    4.4.6 金属离子对酶活性的影响第49-50页
    4.4.7 底物特异性的测定第50-51页
    4.4.8 酶反应动力学常数测定结果第51-53页
  4.5 小结第53-54页
全文总结与展望第54-55页
参考文献第55-60页
致谢第60页

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