论文目录 | |
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-30页 |
| 1.1 选题的背景及意义 | 第12-13页 |
| 1.2 人参皂苷生物合成研究进展 | 第13-17页 |
| 1.2.0 人参皂苷的分类 | 第13页 |
| 1.2.1 人参皂苷生物合成途径 | 第13-15页 |
| 1.2.2 人参皂苷生物合成途径中的关键酶 | 第15-17页 |
| 1.3 WRKY转录因子研究进展 | 第17-18页 |
| 1.3.1 WRKY转录因子的结构和分类 | 第17页 |
| 1.3.2 WRKY基因的生物学功能 | 第17-18页 |
| 1.4 ERF转录因子研究进展 | 第18-20页 |
| 1.4.1 ERF转录因子的结构和分类 | 第18-19页 |
| 1.4.2 ERF基因的生物学功能 | 第19-20页 |
| 1.5 MYB转录因子研究进展 | 第20-21页 |
| 1.5.1 MYB转录因子的结构和分类 | 第20页 |
| 1.5.2 MYB基因的生物学功能 | 第20-21页 |
| 1.6 植物响应非生物胁迫的信号转导途径 | 第21-23页 |
| 1.6.1 植物对非生物胁迫的应答机制 | 第21-22页 |
| 1.6.2 参与植物次生代谢防御反应的信号分子 | 第22-23页 |
| 1.7 实时荧光定量PCR | 第23-27页 |
| 1.7.1 实时荧光定量PCR的原理及分类 | 第23-24页 |
| 1.7.2 实时荧光定量PCR的定量方法 | 第24-26页 |
| 1.7.3 实时荧光定量PCR在植物中的应用 | 第26-27页 |
| 1.8 本研究的主要研究内容、技术路线和创新点 | 第27-30页 |
| 1.8.1 主要研究内容 | 第27-28页 |
| 1.8.2 技术线路 | 第28-29页 |
| 1.8.3 创新点 | 第29-30页 |
| 第2章 人参转录因子WRKY1和ERF1基因的克隆扩增与序列分析 | 第30-41页 |
| 2.1 引言 | 第30页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第30-32页 |
| 2.2.1 实验材料及试剂 | 第30页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第30-31页 |
| 2.2.3 主要溶液的配制 | 第31-32页 |
| 2.3 实验方法 | 第32-41页 |
| 2.3.1 人参发根的继代培养 | 第32-33页 |
| 2.3.2 人参发根Total RNA的提取 | 第33-34页 |
| 2.3.3 人参发根cDNA的合成 | 第34页 |
| 2.3.4 人参转录因子WRKY1和ERF1基因克隆引物的设计 | 第34-35页 |
| 2.3.5 目的基因的克隆与纯化 | 第35-37页 |
| 2.3.5.1 目的基因的克隆 | 第35-36页 |
| 2.3.5.2 克隆产物的纯化 | 第36-37页 |
| 2.3.6 基因克隆载体构建、转化和测序 | 第37-39页 |
| 2.3.6.1 基因克隆载体的构建和转化 | 第37页 |
| 2.3.6.2 基因克隆载体的转化结果鉴定 | 第37-39页 |
| 2.3.7 人参皂苷生物合成关键酶及转录因子基因片段的克隆 | 第39-41页 |
| 2.3.7.1 引物的设计 | 第39-40页 |
| 2.3.7.2 基因片段的克隆 | 第40-41页 |
| 2.4 实验结果与分析 | 第41-50页 |
| 2.4.1 人参发根Total RNA的提取 | 第41页 |
| 2.4.2 人参转录因子WRKY1和ERF1基因的克隆与纯化 | 第41-43页 |
| 2.4.2.1 WRKY1基因和ERF1基因的克隆 | 第41-42页 |
| 2.4.2.2 WRKY1基因和ERF1基因的纯化 | 第42-43页 |
| 2.4.3 WRKY1基因和ERF1基因克隆载体的构建和鉴定 | 第43-44页 |
| 2.4.4 WRKY1基因和ERF1基因序列测序分析 | 第44-48页 |
| 2.4.4.1 WRKY1基因测序结果 | 第45-47页 |
| 2.4.4.2 ERF1基因测序结果 | 第47-48页 |
| 2.4.5 人参皂苷生物合成关键酶及转录因子基因片段的克隆 | 第48-50页 |
| 2.5 讨论 | 第50-52页 |
| 2.5.1 RNA的提取 | 第51页 |
| 2.5.2 引物的设计 | 第51页 |
| 2.5.3 PCR反应条件的优化 | 第51-52页 |
| 2.6 小结 | 第52-54页 |
| 第3章 非生物胁迫和激素处理对人参皂苷生物合成关键酶及转录因子基因表达能力的影响 | 第54-90页 |
| 3.1 引言 | 第54页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第54-56页 |
| 3.2.1 实验材料及试剂 | 第54-55页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第55页 |
| 3.2.3 主要溶液的配制 | 第55-56页 |
| 3.3 实验方法 | 第56-60页 |
| 3.3.1 人参发根的培养 | 第56页 |
| 3.3.2 人参发根Total RNA的提取及cDNA的合成 | 第56页 |
| 3.3.3 荧光实时定量PCR | 第56-59页 |
| 3.3.3.1 引物设计 | 第56-57页 |
| 3.3.3.2 PCR扩增体系 | 第57-58页 |
| 3.3.3.3 PCR扩增程序 | 第58页 |
| 3.3.3.4 熔解曲线程序 | 第58-59页 |
| 3.3.3.5 数据处理与分析 | 第59页 |
| 3.3.4 人参发根总皂苷含量的检测 | 第59-60页 |
| 3.3.4.1 人参发根总皂苷的提取 | 第59页 |
| 3.3.4.2 人参发根总皂苷含量测定 | 第59-60页 |
| 3.4 实验结果与分析 | 第60-87页 |
| 3.4.1 人参发根Total RNA的提取 | 第60页 |
| 3.4.2 低温胁迫下各基因相对表达水平检测结果 | 第60-67页 |
| 3.4.2.1 低温胁迫下关键酶基因相对表达水平检测 | 第60-65页 |
| 3.4.2.2 低温胁迫下转录因子基因相对表达水平检测 | 第65-67页 |
| 3.4.3 盐胁迫下各基因相对表达水平检测结果 | 第67-74页 |
| 3.4.3.1 盐胁迫下关键酶基因相对表达水平检测 | 第67-71页 |
| 3.4.2.2 盐胁迫下转录因子基因相对表达水平检测 | 第71-74页 |
| 3.4.4 MeJA处理下各基因相对表达水平检测结果 | 第74-80页 |
| 3.4.4.1 MeJA处理下关键酶基因相对表达水平检测 | 第74-78页 |
| 3.4.4.2 MeJA处理下转录因子基因相对表达水平检测 | 第78-80页 |
| 3.4.5 ABA处理下各基因相对表达水平检测结果 | 第80-86页 |
| 3.4.5.1 ABA处理下关键酶基因相对表达水平检测 | 第80-84页 |
| 3.4.5.2 ABA处理下转录因子基因相对表达水平检测 | 第84-86页 |
| 3.4.6 人参发根总皂苷含量测定 | 第86-87页 |
| 3.5 讨论 | 第87-88页 |
| 3.6 小结 | 第88-90页 |
| 第4章 人参转录因子与人参皂苷生物合成关键酶基因表达相关性分析 | 第90-100页 |
| 4.1 引言 | 第90页 |
| 4.2 实验方法 | 第90页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第90-98页 |
| 4.3.1 关键酶基因在不同处理条件下的表达模式分析及比较 | 第90-94页 |
| 4.3.2 转录因子基因在不同处理条件下的表达模式分析及比较 | 第94-95页 |
| 4.3.3 转录因子和关键酶基因相关性综合比较分析 | 第95-98页 |
| 4.4 讨论 | 第98-99页 |
| 4.5 小结 | 第99-100页 |
| 第5章 总结与展望 | 第100-102页 |
| 5.1 总结 | 第100-101页 |
| 5.2 展望 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-108页 |
| 作者简介 | 第108-109页 |
| 致谢 | 第109页 |
