论文目录 | |
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-20页 |
| 1.1 低氧情况介绍 | 第12-14页 |
| 1.2 TGF-β1基因的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3 斑马鱼—理想的实验模式生物 | 第15-19页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第19-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第20页 |
| 2.2 引物序列 | 第20-21页 |
| 2.3 主要仪器设备 | 第21-22页 |
| 2.4 试剂盒及主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.5 实验方法 | 第23-38页 |
| 2.5.1 实验材料的获取 | 第23-24页 |
| 2.5.2 低氧处理 | 第24页 |
| 2.5.3 总RNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.5.4 RNA的反转录 | 第25-26页 |
| 2.5.5 TGF-β1基因的克隆 | 第26-27页 |
| 2.5.6 PCR产物的回收 | 第27页 |
| 2.5.7 目的片段与载体的连接 | 第27-28页 |
| 2.5.8 感受态细胞的制备 | 第28页 |
| 2.5.9 连接产物转化大肠杆菌DH5α感受态细胞 | 第28页 |
| 2.5.10 RT-PCR | 第28-29页 |
| 2.5.11 原位杂交探针的标记 | 第29-30页 |
| 2.5.12 原位杂交药品的配制 | 第30-32页 |
| 2.5.13 斑马鱼胚胎整体原位杂交 | 第32-34页 |
| 2.5.14 实时荧光定量PCR | 第34-35页 |
| 2.5.15 质粒构建 | 第35-36页 |
| 2.5.16 去内毒素质粒的提取 | 第36页 |
| 2.5.17 细胞培养 | 第36-37页 |
| 2.5.18 细胞转染 | 第37-38页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第38-55页 |
| 3.1 斑马鱼TGF-β1的序列分析 | 第38-43页 |
| 3.1.1 斑马鱼TGF-β1的同源性分析 | 第38-40页 |
| 3.1.2 斑马鱼TGF-β1的系统进化树分析 | 第40-43页 |
| 3.2 斑马鱼TGF-β1基因的表达模式分析 | 第43-47页 |
| 3.2.1 TGF-β1基因在斑马鱼胚胎发育中过程中的时序表达分析 | 第43-44页 |
| 3.2.2 TGF-β1基因在斑马鱼胚胎发育中过程中的空间表达分析 | 第44-46页 |
| 3.2.3 TGF-βl基因在斑马鱼成鱼组织中的表达分析 | 第46-47页 |
| 3.3 TGF-β1基因的低氧应答分析 | 第47-51页 |
| 3.3.1 低氧对斑马鱼胚胎发育的影响 | 第47-48页 |
| 3.3.2 TGF-β1基因在斑马鱼胚胎中的低氧应答分析 | 第48-50页 |
| 3.3.3 TGF-β1基因在成鱼不同组织中的低氧应答分析 | 第50-51页 |
| 3.4 TGF-β1基因对细胞低氧适应能力的影响 | 第51-55页 |
| 3.4.1 PEGFPN1-TGF-β1载体的构建 | 第51-53页 |
| 3.4.2 TGF-β1基因超表达对细胞低氧适应能力的影响 | 第53-55页 |
| 第四章 讨论 | 第55-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 攻读学位期间论文发表情况 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
