论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 第一章 综述 | 第10-28页 |
| 一、Sp1-1ike/KLF家族及KLF14 | 第10-16页 |
| 1 Sp1-like/KLF家族 | 第10-14页 |
| 2 转录因子KLF14 | 第14-16页 |
| 二、Sirtuin家族及SIRT1 | 第16-28页 |
| 1 Sirtuin家族 | 第16-19页 |
| 2 SIRT1 | 第19-28页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第28-42页 |
| 一、实验材料、试剂与仪器 | 第28-36页 |
| 1 实验材料 | 第28-29页 |
| 2 实验试剂 | 第29-35页 |
| 3 实验仪器 | 第35-36页 |
| 二、实验方法 | 第36-42页 |
| 1 构建质粒 | 第36页 |
| 2 细胞培养 | 第36-37页 |
| 3 细胞的冻存和复苏 | 第37-38页 |
| 4 细胞转染 | 第38页 |
| 5 样品的制备 | 第38-39页 |
| 6 免疫印迹技术 | 第39-40页 |
| 7 免疫荧光技术 | 第40-41页 |
| 8 慢病毒包装 | 第41页 |
| 9 稳定细胞株的建立 | 第41页 |
| 10 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第41页 |
| 11 流式细胞技术 | 第41-42页 |
| 12 MTT | 第42页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第42-58页 |
| 一、KLF14与SIRT1相互作用 | 第42-46页 |
| 1 KLF14与SIRT1在细胞内共定位 | 第42-43页 |
| 2 KLF14能够与SIRT1结合 | 第43-44页 |
| 3 KLF14与SIRT1结合的区域 | 第44-45页 |
| 4 SIRT1与KLF14结合的区域 | 第45-46页 |
| 二、KLF14乙酰化修饰的研究 | 第46-48页 |
| 1 SIRT1对KLF14的去乙酰化作用 | 第46-47页 |
| 2 KLF14不能与没有去乙酰化酶活性的SIRT1结合 | 第47-48页 |
| 三、KLF14多聚体的研究 | 第48-52页 |
| 1 SIRT1 knock-down细胞中KLF14多聚体的形成情况 | 第48-49页 |
| 2 SIRT1抑制KLF14多聚体的形成 | 第49-50页 |
| 3 将KLF14所含赖氨酸突变成精氨酸或者谷氨酰胺后多聚体的形成情况 | 第50-52页 |
| 四、KLF14功能研究及SIRT1对其的影响 | 第52-57页 |
| 1 检测Etoposide刺激时HCT116~(p53+/+)和HCT116~(p53-/-)细胞中KLF14的表达量 | 第52-53页 |
| 2 检测Etoposide刺激时H1299细胞中KLF14的表达量 | 第53页 |
| 3 Etoposide处理细胞时KLF14与SIRT1的结合情况 | 第53-54页 |
| 4 Etoposide刺激细胞时KLF14的乙酰化修饰的变化 | 第54-55页 |
| 5 流式细胞技术检测KLF14对细胞凋亡的影响以及SIRT1对其的影响 | 第55-56页 |
| 6 MTT技术检测KLF14对细胞凋亡的影响以及SIRT1对其的影响 | 第56-57页 |
| 五、小结 | 第57-58页 |
| 第四章 讨论 | 第58-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 附录Ⅰ | 第68-69页 |
| 附录Ⅱ | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
