论文目录 | |
| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-25页 |
| 1.1 引言 | 第10-11页 |
| 1.2 橙皮苷简介 | 第11-17页 |
| 1.2.1 橙皮苷的理化性质 | 第11-12页 |
| 1.2.2 橙皮苷的应用 | 第12-14页 |
| 1.2.3 橙皮苷的改性研究进展 | 第14-17页 |
| 1.3 新橙皮苷简介 | 第17-20页 |
| 1.3.1 新橙皮苷的来源 | 第17-19页 |
| 1.3.2 新橙皮苷的应用 | 第19-20页 |
| 1.4 糖基转移酶研究进展 | 第20-22页 |
| 1.4.1 植物次生合成代谢中糖基化的作用 | 第21页 |
| 1.4.2 糖基转移酶基因的研究进展 | 第21-22页 |
| 1.5 本文的研究意义和内容 | 第22-25页 |
| 1.5.1 研究的意义 | 第22-23页 |
| 1.5.2 研究的内容 | 第23-25页 |
| 第2章 鼠李糖基转移酶原核基因工程菌的构建与表达 | 第25-45页 |
| 2.1 引言 | 第25-27页 |
| 2.2 实验材料 | 第27-31页 |
| 2.2.1 菌株与质粒 | 第27页 |
| 2.2.2 主要试剂与酶 | 第27-28页 |
| 2.2.3 主要仪器 | 第28页 |
| 2.2.4 培养基 | 第28-29页 |
| 2.2.5 主要溶液配制 | 第29-30页 |
| 2.2.6 引物 | 第30-31页 |
| 2.3 实验方法 | 第31-38页 |
| 2.3.1 菌株活化 | 第31页 |
| 2.3.2 DH5α和BL21感受态细胞制备 | 第31-32页 |
| 2.3.3 GT2基因的扩增 | 第32-33页 |
| 2.3.4 p UCm-T-GT2克隆载体的构建 | 第33-34页 |
| 2.3.5 重组质粒（p UCm-T-GT2）转化至DH5α | 第34页 |
| 2.3.6 重组质粒（p UCm-T-GT2）的检测 | 第34-35页 |
| 2.3.7 重组表达载体（p ET-Dsb A-GT2）的构建 | 第35-37页 |
| 2.3.8 重组BL21(p ET- Dsb A-GT2) 菌株的构建 | 第37页 |
| 2.3.9 BL21（p ET- Dsb A-GT2）重组菌株的诱导表达 | 第37页 |
| 2.3.10 SDS-PAGE电泳检测诱导表达 | 第37-38页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第38-43页 |
| 2.4.1 GT2基因的扩增 | 第38-39页 |
| 2.4.2 GT2基因的测序结果 | 第39-40页 |
| 2.4.3 p UCm-T-GT2克隆载体的验证 | 第40页 |
| 2.4.4 p ET-Dsb A质粒提取结果 | 第40-41页 |
| 2.4.5 重组表达载体p ET-Dsb A-GT2验证 | 第41-42页 |
| 2.4.6 重组菌株BL21诱导表达结果 | 第42-43页 |
| 2.5 本章小结 | 第43-45页 |
| 第3章 鼠李糖基转移酶的体外复性、纯化及其性质的研究 | 第45-63页 |
| 3.1 引言 | 第45-46页 |
| 3.2 实验材料 | 第46-49页 |
| 3.2.1 菌株 | 第46页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第46-47页 |
| 3.2.3 主要仪器 | 第47-48页 |
| 3.2.4 培养基 | 第48-49页 |
| 3.3 实验方法 | 第49-55页 |
| 3.3.1 菌株活化 | 第49页 |
| 3.3.2 鼠李糖基转移酶的分离与纯化 | 第49-51页 |
| 3.3.3 鼠李糖基转移酶酶活测定 | 第51-54页 |
| 3.3.4 鼠李糖基转移酶酶学性质的研究 | 第54-55页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第55-61页 |
| 3.4.1 鼠李糖基转移酶纯化结果 | 第55-56页 |
| 3.4.2 鼠李糖基转移酶酶活检测结果 | 第56-57页 |
| 3.4.3 鼠李糖基转移酶酶学性质的研究结果 | 第57-61页 |
| 3.5 本章小结 | 第61-63页 |
| 第4章 重组工程菌BL21(p ET- Dsb A-GT2) 诱导表达条件的优化 | 第63-74页 |
| 4.1 引言 | 第63页 |
| 4.2 实验材料 | 第63-64页 |
| 4.2.1 菌株 | 第63页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第63-64页 |
| 4.2.3 主要仪器 | 第64页 |
| 4.2.4 培养基 | 第64页 |
| 4.2.5 主要溶液配制 | 第64页 |
| 4.3 实验方法 | 第64-68页 |
| 4.3.1 菌株活化 | 第64-65页 |
| 4.3.2 目的蛋白表达形式的分析方法 | 第65-66页 |
| 4.3.3 培养条件的优化 | 第66-68页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第68-72页 |
| 4.4.1 诱导时机的优化 | 第68-69页 |
| 4.4.2 诱导时间的优化 | 第69页 |
| 4.4.3 诱导温度的优化 | 第69-70页 |
| 4.4.4 诱导剂IPTG浓度的优化 | 第70-71页 |
| 4.4.5 摇床转速的优化 | 第71-72页 |
| 4.5 本章小结 | 第72-74页 |
| 第5章 结论与展望 | 第74-76页 |
| 5.1 总结 | 第74-75页 |
| 5.2 展望 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-85页 |
| 附录 | 第85-86页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第86页 |
