论文目录 | |
摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
第一章 绪论 | 第11-27页 |
1.1 三链DNA | 第11-12页 |
1.2 三链DNA的结构和性质 | 第12-18页 |
1.2.1 双链DNA和三链DNA的结构 | 第12页 |
1.2.2 三链DNA的分类 | 第12-14页 |
1.2.3 三链DNA的稳定性 | 第14-18页 |
1.3 三链DNA的生物应用 | 第18-21页 |
1.3.1 调节器 | 第18-19页 |
1.3.2 抑制复制 | 第19页 |
1.3.3 定点突变 | 第19-20页 |
1.3.4 应用于细胞内反基因策略 | 第20页 |
1.3.5 TFOs的治疗潜力 | 第20页 |
1.3.6 三链DNA结构作为分子生物学和生物化学工具 | 第20-21页 |
1.4 三链DNA的检测方法 | 第21-23页 |
1.4.1 紫外-可见分光光度法 | 第21页 |
1.4.2 荧光分析法 | 第21页 |
1.4.3 等温滴定法 | 第21-22页 |
1.4.4 电泳迁移率改变分析 | 第22页 |
1.4.5 荧光共振能量转移 | 第22页 |
1.4.6 核磁共振(NMR) | 第22页 |
1.4.7 原子力显微技术 | 第22-23页 |
1.4.8 圆二色谱 | 第23页 |
1.5 荧光相关光谱 | 第23-25页 |
1.6 工作设想 | 第25-27页 |
第二章 基于FCS测定三链DNA的结合常数 | 第27-52页 |
2.1 引言 | 第27-29页 |
2.2 实验部分 | 第29-31页 |
2.2.1 实验试剂 | 第29-30页 |
2.2.2 70-merds DNA杂交实验 | 第30页 |
2.2.3 DNA提取、146 个碱基对DNA的PCR反应和PCR的产物纯化 | 第30页 |
2.2.4 三链DNA的制备 | 第30-31页 |
2.3 荧光相关光谱装置及测定原理 | 第31-34页 |
2.3.1 荧光相关光谱装置 | 第31-32页 |
2.3.2 FCS检测三链DNA结合常数的原理 | 第32-34页 |
2.4 结果与讨论 | 第34-51页 |
2.4.1 利用荧光相关光谱测定三链DNA的的结合比及结合常数 | 第34-36页 |
2.4.2 三链DNA形成条件的研究 | 第36-41页 |
2.4.3 ssDNA链长对三链DNA稳定性的影响 | 第41-42页 |
2.4.4 pH值和不同碱基组成的单链DNA对三链DNA稳定性的影响 | 第42-46页 |
2.4.5 三链DNA形成的热力学量测定 | 第46-48页 |
2.4.6 20-mer ssDNA探针与 146 bp dsDNA的结合常数测定及其单碱基错配检测 | 第48-51页 |
2.5 本章小结 | 第51-52页 |
第三章 FCS研究Ag~+对三链DNA的稳定性影响 | 第52-63页 |
3.1 引言 | 第52-53页 |
3.2 实验试剂与实验步骤 | 第53-55页 |
3.2.1 实验试剂 | 第53页 |
3.2.2 荧光相关光谱 | 第53页 |
3.2.3 70-mer dsDNA杂交实验 | 第53-54页 |
3.2.4 DNA提取、146 个碱基对DNA的PCR反应和PCR的产物纯化 | 第54页 |
3.2.5 三链DNA的制备 | 第54页 |
3.2.6 FCS检测三链DNA结合常数 | 第54-55页 |
3.3 结果与讨论 | 第55-62页 |
3.3.1 利用荧光相关光谱测定三链DNA的结合常数 | 第55-56页 |
3.3.2 三链DNA形成条件的研究 | 第56-57页 |
3.3.3 Ag~+对三链DNA稳定性的影响 | 第57-60页 |
3.3.4 不同p H对三链DNA结合常数的影响 | 第60-62页 |
3.4 本章小结 | 第62-63页 |
第四章 总结与展望 | 第63-65页 |
4.1 总结 | 第63-64页 |
4.2 展望 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
攻读硕士学位期间已发表或录用的论文 | 第76页 |