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多肽与寡核苷酸偶联纯化方法及功能化寡核苷酸的应用研究

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多肽与寡核苷酸偶联纯化方法及功能化寡核苷酸的应用研究
论文目录
 
摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第1章 绪论第12-26页
  1.1 多肽-寡核苷酸偶联第12-17页
    1.1.1 片段合成法第13-16页
    1.1.2 固相逐步合成法第16-17页
    1.1.3 生化-酶偶联合成法第17页
  1.2 多肽-寡核苷酸分离提纯第17-19页
    1.2.1 基于色谱法的分离第17-18页
    1.2.2 基于电泳法的分离第18-19页
  1.3 多肽-寡核苷酸偶联物的应用第19-24页
    1.3.1 在治疗方面的应用第19-23页
    1.3.2 作为模型进行机理研究第23-24页
    1.3.3 作为人工酶第24页
  1.4 本文构思第24-26页
第2章 多肽与寡核苷酸偶联方法的研究第26-39页
  2.1 前言第26-28页
  2.2 实验部分第28-30页
    2.2.1 实验试剂与设备第28-29页
    2.2.2 通过叠氮基与炔基的方法合成POCs第29页
    2.2.3 通过EDC-NHS的方法合成POCs第29页
    2.2.4 通过交联剂SPDP的方法合成POCs第29页
    2.2.5 通过交联剂Sulfo-SMCC的方法合成POCs第29页
    2.2.6 紫外-分光光度法初步测定DNA浓度第29-30页
    2.2.7 变性聚丙烯酰胺(PAGE)凝胶分析偶联产物第30页
  2.3 结果与讨论第30-37页
    2.3.1 各类合成条件的优化第30-36页
    2.3.2 各类合成方法的优缺点第36-37页
  2.4 本章小结第37-39页
第3章 多肽与寡核苷酸偶联物分离方法的研究第39-51页
  3.1 前言第39页
  3.2 实验部分第39-41页
    3.2.1 实验仪器与试剂第39-40页
    3.2.2 反向高效液相色谱法用于POCs的分离第40页
    3.2.3 离子交换色谱法用于POCs的分离第40页
    3.2.4 凝胶电泳法用于POCs的分离第40-41页
    3.2.5 透析的方法用于POCs的分离第41页
    3.2.6 超滤的方法用于POCs的分离第41页
    3.2.7 核酸酶水解方法用于POCs的分离第41页
  3.3 结果与讨论第41-50页
    3.3.1 反向高效液相色谱方法在分离POCs中的条件分析和优化第41-43页
    3.3.2 离子交换色谱方法在分离POCs中的条件分析和优化第43-45页
    3.3.3 凝胶电泳方法在分离POCs中的条件分析和优化第45-46页
    3.3.4 透析方法分离在POCs中的条件分析和优化第46页
    3.3.5 超滤方法在分离POCs的条件分析和优化第46-47页
    3.3.6 核酸水解方法在分离POCs中的条件分析和优化第47-48页
    3.3.7 以上纯化方法的比较和总结第48-50页
  3.4 本章小结第50-51页
第4章 基于超电荷绿色荧光蛋白与DNA酶高选择荧光检测Pb~(2+)第51-60页
  4.1 前言第51-52页
  4.2 实验部分第52-53页
    4.2.1 实验仪器与试剂第52页
    4.2.2 酶切反应第52页
    4.2.3 荧光检测第52-53页
    4.2.4 变性聚丙烯酰胺(PAGE)凝胶分析酶切效率第53页
  4.3 实验结果与讨论第53-58页
    4.3.1 DNAzyme与scGFP平台检测Pb~(2+)实验原理第53-54页
    4.3.2 DNAzyme与scGFP平台用于检测Pb~(2+)的可行性分析第54-55页
    4.3.3 DNA长度的优化第55页
    4.3.4 酶切体系的优化第55-56页
    4.3.5 检测体系的优化第56-57页
    4.3.6 不同Pb~(2+)浓度的响应第57页
    4.3.7 scGFP-DNAzymes平台对Pb~(2+)响应的选择性第57-58页
    4.3.8 scGFP-DNAzymes平台用于实际样品中Pb~(2+)的检测第58页
  4.4 小结第58-60页
结论第60-61页
参考文献第61-73页
附录 攻读学位期间所发表的学术论文目录第73-74页
致谢第74-75页

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