论文目录 | |
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-15页 |
| 缩略词 | 第15-16页 |
| 第1章 绪论 | 第16-22页 |
| 1.1 类受体蛋白激酶 | 第16页 |
| 1.2 凝集素类受体蛋白激酶(LecRLK) | 第16-17页 |
| 1.2.1 LecRLK的结构 | 第16-17页 |
| 1.3 LecRLK的生理功能 | 第17-20页 |
| 1.3.1 参与微生物识别与响应 | 第17-18页 |
| 1.3.2 参与非生物胁迫响应 | 第18-19页 |
| 1.3.3 参与植物激素信号通路的调控 | 第19页 |
| 1.3.4 参与固氮反应 | 第19-20页 |
| 1.3.5 参与植物生长发育的调节 | 第20页 |
| 1.4 LecRLK的作用模式 | 第20-21页 |
| 1.5 本论文的目的、意义及内容 | 第21-22页 |
| 第2章 基因LecRKⅢ.1和LecRKⅢ.2的生物信息学分析 | 第22-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-24页 |
| 2.2.1 启动子的顺式作用元件的预测 | 第22页 |
| 2.2.2 不同时期和不同组织表达的预测 | 第22-23页 |
| 2.2.3 蛋白结构的预测 | 第23-24页 |
| 2.2.4 业细胞定位预测 | 第24页 |
| 2.2.5 基因LecRKⅢ.1和LecRKⅢ.2同源性分析 | 第24页 |
| 2.3 实验结果 | 第24-35页 |
| 2.3.1 启动子的顺式作用元件的预测结果 | 第24-27页 |
| 2.3.2 不同时期和不同组织表达的预测结果 | 第27-29页 |
| 2.3.3 蛋白结构的预测结果 | 第29-34页 |
| 2.3.4 亚细胞定位预测结果 | 第34页 |
| 2.3.5 基因LecRKⅢ.1和LecRKⅢ.2同源性分析结果 | 第34-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-36页 |
| 2.5 本章小结 | 第36-38页 |
| 第3章 凝集素受体激酶基因LecRKⅢ.1和LecRKⅢ.2以同源二聚体形式行使功能 | 第38-62页 |
| 3.1 实验材料、试剂与仪器 | 第38-40页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第38页 |
| 3.1.2 实验试剂及相关配制 | 第38-40页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第40页 |
| 3.2 实验方法 | 第40-48页 |
| 3.2.1 植物总RNA提取 | 第40-41页 |
| 3.2.2 RNA逆转录成单链cDNA | 第41页 |
| 3.2.3 高保真PCR(Primer STAR) | 第41-42页 |
| 3.2.4 PCR产物纯化 | 第42-43页 |
| 3.2.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第43页 |
| 3.2.6 Inoue法制备超级感受态细胞 | 第43-44页 |
| 3.2.7 大肠杆菌热激转化 | 第44页 |
| 3.2.8 质粒提取 | 第44页 |
| 3.2.9 DNA凝胶回收 | 第44-45页 |
| 3.2.10 双酶切法构建载体 | 第45页 |
| 3.2.11 菌液PCR | 第45-46页 |
| 3.2.12 测序 | 第46页 |
| 3.2.13 酵母转化 | 第46-47页 |
| 3.2.14 拟南芥原生质体制备与转化 | 第47-48页 |
| 3.3 实验结果 | 第48-60页 |
| 3.3.1 酵母双杂验证蛋白LecRKⅢ.1和Lec RKⅢ.2形成同源二聚体的结果 | 第48-53页 |
| 3.3.2 BIFC验证蛋白LecRKⅢ.1和LecRKⅢ.2形成同源二聚体的结果 | 第53-56页 |
| 3.3.3 蛋白LecRKⅢ.1和LecRKⅢ.2形成同源二聚体的BIFC结果 | 第56-59页 |
| 3.3.4 蛋白LecRKⅢ.1和LecRKⅢ.2不能形成异源二聚体的酵母双杂结果 | 第59-60页 |
| 3.4 讨论 | 第60-61页 |
| 3.5 本章小结 | 第61-62页 |
| 第4章 蛋白LecRKⅢ.2胞内段为诱饵的cDNA文库的筛选 | 第62-70页 |
| 4.1 实验材料、试剂与仪器 | 第62页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第62页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第62页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第62页 |
| 4.2 实验方法 | 第62-63页 |
| 4.3 实验结果 | 第63-68页 |
| 4.3.1 自激活检测结果 | 第63页 |
| 4.3.2 筛库结果 | 第63-64页 |
| 4.3.3 重新克隆验证筛库结果 | 第64-68页 |
| 4.4 讨论 | 第68-69页 |
| 4.5 本章小结 | 第69-70页 |
| 第5章 凝集素受体激酶基因LecRKⅢ.1和LecRKⅢ.2的遗传学实验 | 第70-87页 |
| 5.1 实验材料、试剂与仪器 | 第70-71页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第70页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第70-71页 |
| 5.1.3 实验仪器 | 第71页 |
| 5.2 实验方法 | 第71-75页 |
| 5.3 实验结果 | 第75-85页 |
| 5.3.1 基因LecRKⅢ.1和LecRKⅢ.2缺失突变体的纯合子鉴定 | 第75-77页 |
| 5.3.2 基因LecRKⅢ.2过表达株系的构建 | 第77-81页 |
| 5.3.3 纯合缺失突变体lecrkⅢ.1-1和lecrkⅢ.2-1有性杂交 | 第81-82页 |
| 5.3.4 基因LecRKⅢ.1和LecRkⅢ.2胁迫逆境模拟表达达量分析 | 第82-85页 |
| 5.4 讨论 | 第85页 |
| 5.5 本章小结 | 第85-87页 |
| 结论 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-91页 |
| 附录 攻读学位期间所发表学术论文目录 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
