论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-18页 |
| 1.1 病毒诱导的基因沉默（VIGS）技术 | 第12-14页 |
| 1.1.1 VIGS技术概述 | 第12页 |
| 1.1.2 VIGS技术的应用 | 第12-13页 |
| 1.1.3 影响VIGS体系效率的因素 | 第13-14页 |
| 1.1.4 黄瓜花叶病毒（CMV）在VIGS技术中的应用 | 第14页 |
| 1.2 农杆菌介导的瞬时转化体系 | 第14-17页 |
| 1.2.1 瞬时转化体系概述 | 第14-15页 |
| 1.2.2 pEAQ载体及其应用 | 第15-16页 |
| 1.2.3 农杆菌介导的瞬时遗传转化在植物幼苗中的应用 | 第16-17页 |
| 1.3 本研究的主要目的和意义 | 第17-18页 |
| 第二章 VIGS技术在丹参中的应用 | 第18-27页 |
| 2.1 材料、试剂与仪器 | 第18-20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第18页 |
| 2.1.2 菌株与载体 | 第18-19页 |
| 2.1.3 试剂 | 第19页 |
| 2.1.4 培养基与溶液 | 第19-20页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-23页 |
| 2.2.1 叶片干燥处理 | 第20页 |
| 2.2.2 HPLC检测丹参叶片水溶性酚酸类成分 | 第20-21页 |
| 2.2.3 根癌农杆菌EHA105感受态细胞的制备及电转化 | 第21页 |
| 2.2.4 农杆菌质粒提取与测序 | 第21页 |
| 2.2.5 农杆菌注射法转化丹参、烟草叶片 | 第21-22页 |
| 2.2.6 丹参叶片原生CMV病毒ELISA鉴定 | 第22-23页 |
| 2.3 结果分析 | 第23-25页 |
| 2.3.1 不同干燥处理对丹参叶片水溶性成分含量影响 | 第23-24页 |
| 2.3.2 农杆菌介导的VIGS在丹参中的应用 | 第24页 |
| 2.3.3 丹参病叶中CMV的ELISA检测 | 第24-25页 |
| 2.4 讨论与结论 | 第25-27页 |
| 第三章 pEAQ载体介导的烟草叶片瞬时遗传转化体系 | 第27-33页 |
| 3.1 材料、试剂与仪器 | 第27页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第27页 |
| 3.1.2 菌株与载体 | 第27页 |
| 3.1.3 试剂和仪器 | 第27页 |
| 3.2 方法 | 第27-28页 |
| 3.2.1 载体构建 | 第27页 |
| 3.2.2 农杆菌介导转化烟草叶片 | 第27-28页 |
| 3.2.3 HPLC检测转化烟草叶 4-羟基苯乳酸 | 第28页 |
| 3.3 结果分析 | 第28-31页 |
| 3.3.1 农杆菌介导转化烟草叶片 | 第28-30页 |
| 3.3.2 HPLC检测转化烟草的叶片成分变化 | 第30-31页 |
| 3.4 讨论与结论 | 第31-33页 |
| 第四章 农杆菌介导的丹参、夏枯草幼苗瞬时遗传转化体系 | 第33-43页 |
| 4.1 材料 | 第33-35页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第33页 |
| 4.1.2 菌株与载体 | 第33-34页 |
| 4.1.3 试剂和仪器 | 第34-35页 |
| 4.2 方法 | 第35-37页 |
| 4.2.1 HPLC检测丹参幼苗子叶、茎、根有效成分 | 第35-36页 |
| 4.2.2 根癌农杆菌EHA105电转化 | 第36页 |
| 4.2.3 农杆菌介导的幼苗瞬时转化 | 第36页 |
| 4.2.4 机械损伤处理 | 第36页 |
| 4.2.5 GUS染色及定量检测 | 第36-37页 |
| 4.3 结果分析 | 第37-41页 |
| 4.3.1 丹参幼苗子叶、茎、根有效成分分析 | 第37页 |
| 4.3.2 pCAMBIA1301载体的丹参幼苗瞬时转化 | 第37-39页 |
| 4.3.3 pCAMBIA1304载体的本氏烟草、夏枯草幼苗瞬时转化 | 第39-40页 |
| 4.3.4 FAST+机械损伤瞬时转化夏枯草幼苗 | 第40-41页 |
| 4.4 讨论与结论 | 第41-43页 |
| 第五章 结论与创新点 | 第43-44页 |
| 5.1 主要结论 | 第43页 |
| 5.2 创新点 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 作者简介 | 第49页 |
