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寡孢节丛孢中milRNAs 764、799的基因敲除及其靶基因与功能的预测

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寡孢节丛孢中milRNAs 764、799的基因敲除及其靶基因与功能的预测
论文目录
 
摘要第1-4页
Abstract第4-7页
第一章 研究综述第7-19页
  1.1 捕食线虫真菌的生物防治第7-10页
    1.1.1 线虫的危害第7-8页
    1.1.2 捕食线虫真菌—线虫的克星第8-9页
    1.1.3 寡孢节丛孢的研究现状第9-10页
  1.2 小RNA的简介及功能研究进展第10-19页
    1.2.1 小RNA的种类第11-12页
    1.2.2 小RNA的生成途径第12-14页
    1.2.3 小RNA生成途径中的关键蛋白因子第14页
    1.2.4 小RNA的作用机制第14-16页
    1.2.5 小RNA的功能及应用第16-19页
第二章 MilRNAs编码基因敲除载体的构建第19-31页
  2.1 前言第19-20页
  2.2 实验用品及仪器第20-22页
    2.2.1 实验菌株和质粒第20页
    2.2.2 实验所用的培养基第20-21页
    2.2.3 实验药品及试剂第21页
    2.2.4 主要仪器及设备第21-22页
  2.3 实验方法第22-25页
    2.3.1 敲除片段的引物设计第22页
    2.3.2 寡孢节丛孢总DNA提取第22页
    2.3.3 质粒pSCN44的提取第22页
    2.3.4 扩增目的片段第22-24页
    2.3.5 扩增及酶切基因的胶回收第24页
    2.3.6 酵母感受态制备及电转第24-25页
    2.3.7 酵母转化子质粒提取第25页
  2.4 实验结果第25-29页
    2.4.1 寡孢节丛孢中2个milRNAs编码基因同源片段及hph扩增第25-26页
    2.4.2 pRS426质粒酶切结果第26页
    2.4.3 酵母的电转结果第26-27页
    2.4.4 验证酵母转化子第27-29页
  2.5 讨论与小结第29-31页
第三章 寡孢节丛孢原生质体转化和验证第31-41页
  3.1 前言第31页
  3.2 实验用品及仪器第31-32页
    3.2.1 实验菌株第31页
    3.2.2 主要溶液及培养基第31-32页
    3.2.3 药品及试剂第32页
    3.2.4 主要仪器及设备第32页
  3.3 实验方法第32-35页
    3.3.1 敲除载体全长片段扩增及回收第32页
    3.3.2 寡孢节丛孢原生质体的制备第32页
    3.3.3 寡孢节丛孢原生质体的转化第32-33页
    3.3.4 寡孢节丛孢敲除转化子基因组提取第33页
    3.3.5 敲除转化子的PCR验证第33页
    3.3.6 敲除转化子的Southern blot验证第33-35页
  3.4 实验结果第35-39页
    3.4.1 原生质体转化子验证第35-36页
    3.4.2 Southern blot验证敲除株第36-39页
  3.5 讨论与小结第39-41页
第四章 寡孢节丛孢野生型菌株与敲除菌株的表型比较第41-61页
  4.1 前言第41页
  4.2 实验用品及仪器第41-42页
    4.2.1 实验菌株第41页
    4.2.2 主要培养基第41页
    4.2.3 主要药品第41页
    4.2.4 主要仪器及设备第41-42页
  4.3 实验方法第42-43页
    4.3.1 生长速率的比较第42页
    4.3.2 孢子产生的比较第42页
    4.3.3 产捕器比较第42-43页
    4.3.4 抗逆生长情况比较第43页
  4.4 实验结果第43-59页
    4.4.1 生长速率比较第43-48页
    4.4.2 孢子产生的比较第48-49页
    4.4.3 产捕器比较第49-54页
    4.4.4 抗逆生长情况比较第54-59页
  4.5 讨论与小结第59-61页
第五章 MilRNAs 764、799靶基因及其功能预测第61-67页
  5.1 MilRNAs 764、799靶基因的预测第61-63页
  5.2 MilRNAs 764、799靶基因功能的预测第63-65页
  5.3 小结及展望第65-67页
参考文献第67-70页
附录第70-72页
硕士期间发表论文及所获奖励第72-73页
致谢第73页

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