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镰刀菌异源蛋白表达菌构建和Gly突变体致病力分析
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镰刀菌异源蛋白表达菌构建和Gly突变体致病力分析
论文目录
 
摘要第1-7页
Abstract第7-9页
缩略词表第9-10页
1 前言第10-24页
　　1.1 镰刀菌研究进展第10-11页
　　1.2 镰刀菌产生主要毒素及产毒基因研究进展第11-17页
　　　　1.2.1 镰刀菌毒素研究进展第11-13页
　　　　1.2.2 镰刀菌产毒基因研究进展第13-17页
　　1.3 外源基因植酸酶研究进展第17-19页
　　　　1.3.1 植酸酶研究概况第17-18页
　　　　1.3.2 植酸酶的作用机理第18-19页
　　　　1.3.3 植酸酶APPA第19页
　　1.4 外源基因抗菌肽研究进展第19-20页
　　1.5 真菌转化的方法第20-22页
　　　　1.5.1 PEG介导的原生质体转化第20-21页
　　　　1.5.2 根癌农杆菌介导的遗传转化第21-22页
　　1.6 本研究的目的及意义第22-24页
2 材料与方法第24-38页
　　2.1 试验材料第24-27页
　　　　2.1.1 菌株第24页
　　　　2.1.2 主要试剂、酶及载体第24-27页
　　　　2.1.3 主要实验仪器及耗材第27页
　　2.2 实验方法第27-38页
　　　　2.2.1 大肠杆菌热激感受态细胞制备第27-28页
　　　　2.2.2 DNA热激转化感受态细胞第28页
　　　　2.2.3 质粒DNA提取第28页
　　　　2.2.4 崩溃酶(Driselase)的配制第28-29页
　　　　2.2.5 原生质体的制备第29页
　　　　2.2.6 PEG介导的原生质体转化方法第29页
　　　　2.2.7 根癌农杆菌电击转化感受态细胞制备第29-30页
　　　　2.2.8 DNA电击转化EHA105感受态细胞第30页
　　　　2.2.9 农杆菌EHA105 PCR鉴定第30页
　　　　2.2.10 根癌农杆菌介导的遗传转化方法(ATMT)第30-31页
　　　　2.2.11 基因组DNA提取第31页
　　　　2.2.12 PCR鉴定第31-32页
　　　　2.2.13 Southern杂交分析第32-33页
　　　　2.2.14 钼蓝法测定转化子植酸酶的酶活第33-34页
　　　　2.2.15 抗菌肽抑菌试验第34页
　　　　2.2.16 单端孢霉烯毒素提取及GC-MS检测第34-35页
　　　　2.2.17 胚芽鞘苗期接种鉴定第35-36页
　　　　2.2.18 田间花期接种鉴定第36-37页
　　　　2.2.19 引物及其序列第37-38页
3 结果与分析第38-50页
　　3.1 表达异源植酸酶转化子的构建第38-42页
　　　　3.1.1 pLH-Phytase-HygB-Tri5载体构建第38-39页
　　　　3.1.2 PCR鉴定第39-40页
　　　　3.1.3 Southern blot第40-41页
　　　　3.1.4 植酸酶酶活力的测定第41-42页
　　3.2 表达异源抗菌肽转化子的构建第42-45页
　　　　3.2.1 pMD-defensin-neo-Pks4载体构建第42-43页
　　　　3.2.2 PCR鉴定第43-44页
　　　　3.2.3 Southern blot第44页
　　　　3.2.4 抗菌肽酶活分析第44-45页
　　3.3 Gly突变体致病力分析第45-50页
　　　　3.3.1 Gly突变体构建第45页
　　　　3.3.2 PCR鉴定第45-47页
　　　　3.3.3 Southern Blot第47-48页
　　　　3.3.4 产毒分析第48页
　　　　3.3.5 苗期接种第48-49页
　　　　3.3.6 花期接种第49-50页
4 讨论第50-51页
参考文献第51-57页
致谢第57-58页
附录第58-59页

本篇论文共59页，点击这进入下载页面。
 
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