论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 综述 | 第10-22页 |
| 1 氨酰tRNA合成 | 第10-19页 |
| 1.1 氨酰tRNA合成酶的经典功能 | 第10-11页 |
| 1.2 氨酰tRNA合成酶的演变 | 第11-13页 |
| 1.3 氨酰tRNA合成酶（Aminoacyl-tRNA synthetasethetases,AARS）的分类 | 第13-15页 |
| 1.4 氨酰tRNA合成酶（Aminoacyl-tRNA synthetase）与疾病的联系 | 第15-17页 |
| 1.5 氨酰-tRNA合成酶（Aminoacyl-tRNA synthetasethetases,AARS）应用前景 | 第17-19页 |
| 2 氨酰tRNA合成酶复合物（Aminoacyl-tRNA synthetase complex，MSC） | 第19-20页 |
| 3 谷氨酰胺tRNA合成酶（Glutamine tRNA Synthetase,QRS） | 第20-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-34页 |
| 1 材料与试剂 | 第22-27页 |
| 1.1 细胞、菌种及载体 | 第22页 |
| 1.2 分子生物学试剂 | 第22-23页 |
| 1.3 主要试剂的配置 | 第23-27页 |
| 2 主要仪器设备 | 第27-28页 |
| 3 实验方法 | 第28-34页 |
| 3.1 感受态细胞DH5α 制备 | 第28-29页 |
| 3.2 PCR扩增目的基因 | 第29-30页 |
| 3.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第30页 |
| 3.4 切胶回收纯化 | 第30-31页 |
| 3.5 质粒DNA的提取 | 第31页 |
| 3.6 质粒浓缩 | 第31页 |
| 3.7 酶切反应 | 第31-32页 |
| 3.8 连接反应 | 第32页 |
| 3.9 重组DNA的转化 | 第32-33页 |
| 3.10 单克隆菌落PCR鉴定 | 第33-34页 |
| 第三章 人谷氨酰胺tRNA合成酶Ser~(70)、Lys~(394)和Tyr~(491)突变对形成MSC的影响 | 第34-45页 |
| 1 材料与方法 | 第34-41页 |
| 1.1 材料试剂 | 第34页 |
| 1.2 方法 | 第34-41页 |
| 2 结果分析 | 第41-43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| 第四章 谷氨酰胺tRNA合成酶突变对细胞凋亡的影响 | 第45-50页 |
| 1 材料与方法 | 第45-46页 |
| 1.1 实验材料与试剂 | 第45页 |
| 1.2 实验方法 | 第45-46页 |
| 2 结果分析 | 第46-48页 |
| 2.1 MTT检测HELA细胞活性 | 第46-47页 |
| 2.2 MTT检测HEK293细胞活性 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 QRS Ser~(70)、Lys~(394)和Tyr~(491)突变体的亚细胞定位 | 第50-58页 |
| 1 材料与方法 | 第50-52页 |
| 1.1 材料试剂 | 第50页 |
| 1.2 方法 | 第50-52页 |
| 2 结果 | 第52-56页 |
| 2.1 PEGFP-N2-QRS重组质粒的构建 | 第52-56页 |
| 2.1.1 QRS野生型基因扩增 | 第52-53页 |
| 2.1.2 PEGFP-N1载体酶切鉴定 | 第53页 |
| 2.1.3 PEGFP-N1-QRS连接产物鉴定 | 第53-55页 |
| 2.1.4 构建PEGFP-N1-QRS突变型质粒 | 第55页 |
| 2.1.5 PEGFP-N1-QRS野生型及突变型重组质粒转染HELA细胞 | 第55页 |
| 2.1.6 PEGFP-N2-QRS野生型与突变型重组质粒表达定位 | 第55-56页 |
| 3 讨论 | 第56-58页 |
| 第六章 总结与展望 | 第58-60页 |
| 1 总结 | 第58-59页 |
| 1.1 成功构建了QRS Ser~(70)、Lys~(394)和Tyr~(491)突变体 | 第58页 |
| 1.2 证明了QRS-Lys~(394)和QRS-Tyr~(491)突变体影响MSC稳定性 | 第58页 |
| 1.3 证明了QRS-Lys~(394)和QRS-Tyr~(491)突变可以抑制肿瘤细胞凋亡 | 第58-59页 |
| 1.4 有待进一步研究 | 第59页 |
| 2 展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 附录 | 第68-69页 |
| 研究生期间科研成果 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
