论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-16页 |
| 第一部分 来源于Caldicellulosiruptor bescii DSM6725菌株的嗜热多聚半乳糖醛酸酶的表达、纯化和结晶学研究 | 第16-35页 |
| 第1章 引言 | 第16-21页 |
| 1.1 果胶酶的概述 | 第16-18页 |
| 1.1.1 果胶酶的定义 | 第16页 |
| 1.1.2 果胶酶的分类 | 第16-17页 |
| 1.1.3 果胶酶的性质 | 第17-18页 |
| 1.2 果胶酶的生物学应用 | 第18页 |
| 1.3 果胶酶的晶体结构 | 第18-19页 |
| 1.4 立体依据和实验设计 | 第19-21页 |
| 第2章 材料与方法 | 第21-25页 |
| 2.1 材料与主要试剂 | 第21页 |
| 2.2 设备与仪器 | 第21-22页 |
| 2.3 方法与相关试剂 | 第22-25页 |
| 2.3.1 引物设计及合成 | 第22页 |
| 2.3.2 细菌基因组提取 | 第22页 |
| 2.3.3 多聚半乳糖醛酸酶基因的PCR扩增 | 第22-23页 |
| 2.3.4 重组质粒的构建 | 第23页 |
| 2.3.5 重组蛋白的诱导表达 | 第23页 |
| 2.3.6 重组蛋白的纯化 | 第23-25页 |
| 第3章 结果 | 第25-30页 |
| 3.1 Caldicellulosiruptor bescii DSM 6725基因组提取 | 第25-26页 |
| 3.2 蛋白表达、纯化及晶体培养 | 第26-30页 |
| 3.2.1 重组蛋白的表达 | 第26-27页 |
| 3.2.2 亲和层析 | 第27页 |
| 3.2.3 离子交换层析 | 第27-28页 |
| 3.2.4 分子筛层析 | 第28页 |
| 3.2.5 蛋白晶体培养 | 第28-30页 |
| 第4章 小结与讨论 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-35页 |
| 第二部分 HIV-1 Vif介导的E3泛素化酶复合物的表达、纯化和结晶学研究 | 第35-63页 |
| 第1章 引言 | 第35-42页 |
| 1.1 HIV-1与宿主限制因子研究概述 | 第35-39页 |
| 1.1.1 HIV-1的简介 | 第35-36页 |
| 1.1.2 宿主限制因子及病毒辅助蛋白 | 第36-37页 |
| 1.1.3 APOBEC家族蛋白与HIV-1 Vif相互作用机制 | 第37-38页 |
| 1.1.4 E3泛素连接酶的研究 | 第38-39页 |
| 1.2 本课题的研究目的与实验设计 | 第39-42页 |
| 1.2.1 研究目的 | 第39-40页 |
| 1.2.2 实验设计 | 第40-42页 |
| 第2章 材料与方法 | 第42-47页 |
| 2.1 材料与常规试剂 | 第42页 |
| 2.1.1 常规试剂 | 第42页 |
| 2.2 仪器与设备 | 第42-43页 |
| 2.3 方法与相关试剂 | 第43-47页 |
| 2.3.1 质粒构建 | 第43-44页 |
| 2.3.2 蛋白诱导表达 | 第44-45页 |
| 2.3.3 蛋白分离纯化 | 第45-47页 |
| 第3章 结果 | 第47-57页 |
| 3.1 重组质粒构建 | 第47-51页 |
| 3.1.1 pET28a-CUL5(1-386)质粒构建 | 第47-48页 |
| 3.1.2 pET28a-A3H(1-183)质粒构建 | 第48-49页 |
| 3.1.3 pET21a-Vif(1-176)质粒构建 | 第49-51页 |
| 3.2 六元复合蛋白表达纯化 | 第51-57页 |
| 3.2.1 蛋白表达 | 第51-52页 |
| 3.2.2 亲和层析 | 第52-54页 |
| 3.2.3 离子交换层析 | 第54-55页 |
| 3.2.4 分子筛层析 | 第55-57页 |
| 第4章 小结与讨论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第63-64页 |
| 后记和致谢 | 第64页 |
