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UFM1修饰系统蛋白质组学分析和功能研究

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UFM1修饰系统蛋白质组学分析和功能研究
论文目录
 
中文摘要第1-6页
Abstract第6-10页
第一章 前言第10-14页
第二章 实验材料与方法第14-30页
  2.1 材料第14-21页
    2.1.1 细胞系第14页
    2.1.2 主要抗体第14页
    2.1.3 主要试剂及材料第14-16页
    2.1.4 主要试剂的配制第16-20页
    2.1.5 实验仪器第20-21页
  2.2 实验方法及操作第21-30页
    2.2.1 质粒构建第21-22页
    2.2.2 突变体FLAG-UFC1-UFM1 G83X质粒构建第22-23页
    2.2.3 质粒转化和单克隆筛选第23页
    2.2.4 细胞培养与转染第23页
    2.2.5 siRNA序列和转染第23-24页
    2.2.6 细胞裂解及蛋白纯化第24-25页
    2.2.7 蛋白免疫印迹分析第25-26页
    2.2.8 银染及胶内酶解第26-27页
    2.2.9 TMT标记实验第27页
    2.2.10 质谱检测第27页
    2.2.11 数据分析第27-28页
    2.2.12 生物信息学分析第28-29页
    2.2.13 蛋白稳定性实验第29-30页
第三章 结果与讨论第30-57页
  3.1 UFBP1调控其相互作用蛋白稳定性第30-47页
    3.1.1 UFBP1相互作用蛋白的纯化第31-32页
    3.1.2 非标记定量蛋白质组学方法鉴定UFBP1相互作用蛋白第32-33页
    3.1.3 UFBP1相互作用蛋白的生物化学验证第33-34页
    3.1.4 UFBP1相互作用蛋白的生物信息学分析第34-36页
    3.1.5 UFBP1相互作用蛋白的作用网络分析第36-39页
    3.1.6 UFBP1影响其相互作用蛋白稳定性第39-44页
    3.1.7 UFBP1通过泛素-蛋白酶体途径介导其相互作用蛋白的降解第44-46页
    3.1.8 结论与讨论第46-47页
  3.2 类泛素蛋白UFM1修饰路径分子机制研究第47-53页
    3.2.1 UFL1与UFBP1相互作用蛋白纯化第47-48页
    3.2.2 非标记定量蛋白质组学方法鉴定UFL1与UFBP1相互作用蛋白第48-49页
    3.2.3 UFL1与UFBP1相互作用蛋白的生物化学验证第49-51页
    3.2.4 UFL1、UFBP1共同相互作用蛋白的生物信息学分析第51-52页
    3.2.5 UFL1、UFBP1共同相互作用蛋白的作用网络分析第52页
    3.2.6 结论与讨论第52-53页
  3.3 类泛素蛋白UFM1修饰底物的鉴定第53-57页
    3.3.1 UFM1修饰底物蛋白的纯化第53-55页
    3.3.2 稳定同位素标记鉴定UFM1修饰底物第55-56页
    3.3.3 结论与讨论第56-57页
参考文献第57-61页
综述第61-69页
参考文献第66-69页
中英文缩略词对照表第69-70页
攻读硕士学位期间发表论文和待发论文第70-71页
附录第71-74页
致谢第74-75页

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