论文目录 | |
中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
第一章 前言 | 第10-14页 |
第二章 实验材料与方法 | 第14-30页 |
2.1 材料 | 第14-21页 |
2.1.1 细胞系 | 第14页 |
2.1.2 主要抗体 | 第14页 |
2.1.3 主要试剂及材料 | 第14-16页 |
2.1.4 主要试剂的配制 | 第16-20页 |
2.1.5 实验仪器 | 第20-21页 |
2.2 实验方法及操作 | 第21-30页 |
2.2.1 质粒构建 | 第21-22页 |
2.2.2 突变体FLAG-UFC1-UFM1 G83X质粒构建 | 第22-23页 |
2.2.3 质粒转化和单克隆筛选 | 第23页 |
2.2.4 细胞培养与转染 | 第23页 |
2.2.5 siRNA序列和转染 | 第23-24页 |
2.2.6 细胞裂解及蛋白纯化 | 第24-25页 |
2.2.7 蛋白免疫印迹分析 | 第25-26页 |
2.2.8 银染及胶内酶解 | 第26-27页 |
2.2.9 TMT标记实验 | 第27页 |
2.2.10 质谱检测 | 第27页 |
2.2.11 数据分析 | 第27-28页 |
2.2.12 生物信息学分析 | 第28-29页 |
2.2.13 蛋白稳定性实验 | 第29-30页 |
第三章 结果与讨论 | 第30-57页 |
3.1 UFBP1调控其相互作用蛋白稳定性 | 第30-47页 |
3.1.1 UFBP1相互作用蛋白的纯化 | 第31-32页 |
3.1.2 非标记定量蛋白质组学方法鉴定UFBP1相互作用蛋白 | 第32-33页 |
3.1.3 UFBP1相互作用蛋白的生物化学验证 | 第33-34页 |
3.1.4 UFBP1相互作用蛋白的生物信息学分析 | 第34-36页 |
3.1.5 UFBP1相互作用蛋白的作用网络分析 | 第36-39页 |
3.1.6 UFBP1影响其相互作用蛋白稳定性 | 第39-44页 |
3.1.7 UFBP1通过泛素-蛋白酶体途径介导其相互作用蛋白的降解 | 第44-46页 |
3.1.8 结论与讨论 | 第46-47页 |
3.2 类泛素蛋白UFM1修饰路径分子机制研究 | 第47-53页 |
3.2.1 UFL1与UFBP1相互作用蛋白纯化 | 第47-48页 |
3.2.2 非标记定量蛋白质组学方法鉴定UFL1与UFBP1相互作用蛋白 | 第48-49页 |
3.2.3 UFL1与UFBP1相互作用蛋白的生物化学验证 | 第49-51页 |
3.2.4 UFL1、UFBP1共同相互作用蛋白的生物信息学分析 | 第51-52页 |
3.2.5 UFL1、UFBP1共同相互作用蛋白的作用网络分析 | 第52页 |
3.2.6 结论与讨论 | 第52-53页 |
3.3 类泛素蛋白UFM1修饰底物的鉴定 | 第53-57页 |
3.3.1 UFM1修饰底物蛋白的纯化 | 第53-55页 |
3.3.2 稳定同位素标记鉴定UFM1修饰底物 | 第55-56页 |
3.3.3 结论与讨论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-61页 |
综述 | 第61-69页 |
参考文献 | 第66-69页 |
中英文缩略词对照表 | 第69-70页 |
攻读硕士学位期间发表论文和待发论文 | 第70-71页 |
附录 | 第71-74页 |
致谢 | 第74-75页 |