论文目录 | |
致谢 | 第11-11页 |
摘要 | 第11-12页 |
Abstract | 第12-14页 |
缩略语表 | 第14-16页 |
1 文献综述 | 第16-27页 |
1.1 植物中铁吸收策略 | 第16-19页 |
1.1.1 铁吸收机制Ⅰ | 第16-18页 |
1.1.2 铁吸收机制Ⅱ | 第18页 |
1.1.3 两种吸收机制的比较 | 第18-19页 |
1.2 植物中bHLH转录因子家族的研究概况 | 第19-21页 |
1.3 参与铁吸收代谢的bHLH转录因子 | 第21-26页 |
1.3.1 FIT调控网络 | 第21-23页 |
1.3.2 POPEYE调控网络 | 第23-24页 |
1.3.3 OsIR02和OsIDEF1/2的正调控途径 | 第24-25页 |
1.3.4 OsIR03的负调控 | 第25页 |
1.3.5 OsbHLH133的负调控 | 第25-26页 |
1.4 本研究的内容及意义 | 第26-27页 |
2 材料与方法 | 第27-37页 |
2.1 实验材料 | 第27页 |
2.2 实验方法 | 第27-37页 |
2.2.1 载体的构建 | 第27-29页 |
2.2.1.1 Promoter::GUS载体构建 | 第27页 |
2.2.1.2 超表达载体 | 第27-28页 |
2.2.1.3 亚细胞定位与BiFC载体 | 第28-29页 |
2.2.1.4 CRISPR/Cas9载体 | 第29页 |
2.2.1.5 酵母双杂交载体构建 | 第29页 |
2.2.2 农杆菌介导的水稻转基因 | 第29-30页 |
2.2.3 转基因水稻植株的鉴定 | 第30-31页 |
2.2.4 植物RNA抽提,逆转录和实时定量RT-PCR | 第31-32页 |
2.2.5 水稻培养条件和表型分析 | 第32-33页 |
2.2.5.1 水稻生长条件 | 第32页 |
2.2.5.2 水稻生长生理数据获得 | 第32-33页 |
2.2.6 水稻原生质体的分离与转化 | 第33-34页 |
2.2.7 基因枪轰击洋葱表皮细胞 | 第34-35页 |
2.2.8 酵母双杂交试验 | 第35页 |
2.2.9 农杆菌注射法转化烟草叶片 | 第35页 |
2.2.10 Westernblot检测 | 第35-37页 |
3 结果与分析 | 第37-53页 |
3.1 OsIRO3与OsbHLH062的序列分析 | 第37-39页 |
3.1.1 OsIRO3和OsbHLH062基因和蛋白的结构分析 | 第37-38页 |
3.1.2 OsIRO3和OsbHLH062的同源蛋白及进化树的构建 | 第38-39页 |
3.2 OsIRO3与OsbHLH062的表达模式分析 | 第39-43页 |
3.2.1 OsIRO3与OsbHLH062表达模式的分析 | 第39-41页 |
3.2.2 OsIRO3和OsbHLH062的组织定位 | 第41-43页 |
3.3 OsIRO3与OsbHLH062的亚细胞定位 | 第43-45页 |
3.4 OsIRO3与OsbHLH062超表达材料的获得 | 第45-46页 |
3.5 OsIRO3与OsbHLH062抑制表达植株的培育和分子鉴定 | 第46-49页 |
3.5.1 T-DNA插入突变体iro3材料的鉴定与表型观察 | 第46-48页 |
3.5.2 OsIRO3与OsbHLH062的CRISPR/Cas9突变体材料获得及鉴定 | 第48-49页 |
3.6 OsIRO3与OsbHLH062蛋白互作的初步分析 | 第49-53页 |
3.6.1 酵母双杂交分析OsIRO3与OsbHLH062的蛋白互作 | 第49-50页 |
3.6.2 BiFC分析OsIRO3与OsbHLH062的蛋白互作 | 第50-52页 |
3.6.3 烟草叶片中瞬时表达的OsIRO3与OsbHLH062蛋白的初步检测 | 第52-53页 |
4 讨论 | 第53-55页 |
5 结论与展望 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-59页 |
附录 | 第59-60页 |