论文目录 | |
| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-15页 |
| 一、引言 | 第15-27页 |
| 1.1 棉花纤维发育研究进展 | 第15-18页 |
| 1.1.1 我国棉花产业发展现状 | 第15页 |
| 1.1.2 棉纤维发育过程 | 第15页 |
| 1.1.3 转录因子与棉纤维发育 | 第15-17页 |
| 1.1.4 植物激素与棉纤维发育 | 第17-18页 |
| 1.1.5 利用基因工程改良棉花纤维品质 | 第18页 |
| 1.2 茉莉酸(JA)研究进展 | 第18-22页 |
| 1.2.1 茉莉酸(JA)生物合成 | 第18-19页 |
| 1.2.2 茉莉酸的生物学功能 | 第19-20页 |
| 1.2.3 JAZ蛋白的发现和功能 | 第20-21页 |
| 1.2.4 JA信号通路 | 第21-22页 |
| 1.3 赤霉素(GA)研究进展 | 第22-25页 |
| 1.3.1 赤霉素(GA)生物合成 | 第22-23页 |
| 1.3.2 赤霉素的生物学功能 | 第23页 |
| 1.3.3 DELLA蛋白的发现和功能 | 第23-24页 |
| 1.3.4 GA信号通路 | 第24-25页 |
| 1.4 JA和GA互作调控植物生长发育 | 第25-26页 |
| 1.5 立题依据和研究意义 | 第26-27页 |
| 二、实验材料和方法 | 第27-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-28页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第27页 |
| 2.1.2 菌种及载体 | 第27页 |
| 2.1.3 工具酶和试剂盒 | 第27页 |
| 2.1.4 常用缓冲液和储存液 | 第27-28页 |
| 2.1.5 常用培养基 | 第28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-37页 |
| 2.2.1 GhJAZ3、GhGAI1及其它基因的分离 | 第28页 |
| 2.2.2 GhJAZ3和GhGAI1蛋白序列分析 | 第28页 |
| 2.2.3 棉花基因组织表达分析 | 第28-30页 |
| 2.2.4 载体的构建 | 第30-32页 |
| 2.2.5 E.coli DH5α感受态细胞的制备及转化 | 第32页 |
| 2.2.6 农杆菌LBA4404/GV3101感受态细胞的制备 | 第32页 |
| 2.2.7 棉花的遗传转化 | 第32-33页 |
| 2.2.8 拟南芥的遗传转化 | 第33页 |
| 2.2.9 拟南芥gDNA的提取 | 第33页 |
| 2.2.10 拟南芥RNA的提取 | 第33-34页 |
| 2.2.11 亚细胞定位观察 | 第34页 |
| 2.2.12 酵母感受态细胞的制备和转化 | 第34页 |
| 2.2.13 GhJAZ3和GhGAI1转录自激活活性分析 | 第34页 |
| 2.2.14 酵母双杂交验证相互作用 | 第34页 |
| 2.2.15 转基因拟南芥处理方法 | 第34-35页 |
| 2.2.16 细胞伸长相关Marker基因和表皮毛发育相关Marker基因的qRT-PCR分析 | 第35-36页 |
| 2.2.17 杂交 | 第36-37页 |
| 三、实验结果 | 第37-66页 |
| 3.1 JA和GA_3协同促进棉纤维细胞起始分化 | 第37-38页 |
| 3.2 GhJAZ3和GhGAI1蛋白序列分析及系统进化分析 | 第38-41页 |
| 3.2.1 GhJAZ3蛋白序列分析及系统进化分析 | 第38-39页 |
| 3.2.2 GhGAI1蛋白序列分析及系统进化分析 | 第39-41页 |
| 3.3 棉花GhJAZ3、GhGAI1和其它棉纤维发育相关基因的组织表达分析 | 第41-42页 |
| 3.4 GhJAZ3和GhGAI1蛋白亚细胞定位分析 | 第42-44页 |
| 3.4.1 GhJAZ3eGFP和GhGAI1 eGFP融合表达载体的构建 | 第42-44页 |
| 3.4.2 注射烟草叶表皮细胞并观察荧光定位 | 第44页 |
| 3.5 GhJAZ3和GhGAI1蛋白转录自激活分析 | 第44-47页 |
| 3.5.1 GhJAZ3和GhGAI1酵母表达载体的构建 | 第44-45页 |
| 3.5.2 酵母阳性克隆的鉴定 | 第45页 |
| 3.5.3 GhJAZ3和GhGAI1转录自激活检测 | 第45-47页 |
| 3.6 GhJAZ3、GhGAI1与一些假定的DELLA结合蛋白的互作 | 第47-48页 |
| 3.6.1 GhGAI1与GhJAZ3可以发生相互作用,GhGAI1又可以相互作用与GhPIF3、GhARF6 and GhBZR1 | 第47页 |
| 3.6.2 GhDEL65通过NT domain介导与GhGAI1和GhJAZ3的互作 | 第47-48页 |
| 3.7 转基因拟南芥基因组DNA(gDNA)检测和基因表达分析 | 第48-50页 |
| 3.7.1 GhGAI1和GhJAZ3/GhJAZ3△C过量表达载体的构建和遗传转化 | 第48-49页 |
| 3.7.2 转基因拟南芥阳性苗的鉴定 | 第49-50页 |
| 3.8 过量表达GhJAZ3/GhJAZ△C转基因拟南芥表型分析 | 第50-58页 |
| 3.8.1 过量表达GhJAZ3/GhJAZ3△C转基因拟南芥光处理下表型变化 | 第50-51页 |
| 3.8.2 过量表达GhJAZ3/GhJAZ3△C转基因拟南芥暗处理下表型变化 | 第51-52页 |
| 3.8.3 过量表达GhJAZ3/GhJAZ3△C影响转基因拟南芥植物的株高和花期 | 第52-53页 |
| 3.8.4 过量表达GhJAZ3/GhJAZ3△C影响细胞伸长相关基因表达 | 第53-54页 |
| 3.8.5 过量表达GhJAZ3/GhJAZ3△C影响转基因拟南芥表皮毛细胞起始分化 | 第54-55页 |
| 3.8.6 过量表达GhJAZ3/GhJAZ3△C促进转基因拟南芥表皮毛伸长发育 | 第55-56页 |
| 3.8.7 过量表达GhJAZ3/GhJAZ3△C抑制转基因拟南芥表皮毛发育相关的GL2和MYB23基因表达 | 第56-57页 |
| 3.8.8 GL2位于GhJAZ3的下游 | 第57-58页 |
| 3.9 过量表达GhGAI1转基因拟南芥表型分析 | 第58-64页 |
| 3.9.1 过量表达GhGAI1抑制主根的伸长,增强对JA的敏感性 | 第58-59页 |
| 3.9.2 过量表达GhGAI1负调控下胚轴的伸长 | 第59-60页 |
| 3.9.3 过量表达GhGAI1影响转基因拟南芥表皮毛起始分化 | 第60-61页 |
| 3.9.4 过量表达GhGAI1影响转基因拟南芥表皮毛伸长发育 | 第61-62页 |
| 3.9.5 GL2位于GhGAI1的下游 | 第62-63页 |
| 3.9.6 过量表达GhGAI1抑制根毛生长发育 | 第63-64页 |
| 3.10 GhJAZ3和GhJAR1-8转基因棉花 | 第64-66页 |
| 3.10.1 GhJAZ3和GhJAR1-8过量表达载体的构建 | 第64-65页 |
| 3.10.2 GhJAZ3和GhJAR1-8载体转化棉花 | 第65-66页 |
| 四、讨论 | 第66-69页 |
| 4.1 GhJAZ3、GhGAI1与GhDEL65的互作模式 | 第66-67页 |
| 4.2 GhJAZ3和GhGAI1调控细胞伸长 | 第67页 |
| 4.3 GhJAZ3和GhGAl1可能参与调控棉纤维发育 | 第67-68页 |
| 4.4 JA和GA可能存在互作调控植物生长发育 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-78页 |
| 附录 | 第78-79页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
