论文目录 | |
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 1 综述 | 第11-21页 |
| 1.1 背景 | 第11-12页 |
| 1.2 几种常见的植物病原菌与植物互作的研究现状 | 第12-17页 |
| 1.2.1 大丽轮枝菌 | 第12-13页 |
| 1.2.2 灰葡萄孢菌 | 第13-14页 |
| 1.2.3 茄病镰刀菌 | 第14页 |
| 1.2.4 大豆核盘菌 | 第14-15页 |
| 1.2.5 小麦赤霉孢菌 | 第15-16页 |
| 1.2.6 植物病原菌互作机制 | 第16-17页 |
| 1.3 拟南芥 | 第17-18页 |
| 1.4 拟南芥RNAi突变体库研究 | 第18-19页 |
| 1.5 生物胁迫和非生物胁迫瓶内互作体系 | 第19-21页 |
| 2 材料和方法 | 第21-34页 |
| 2.1 拟南芥RNAi突变体库筛选耐极限高温突变体单株 | 第21-26页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.1.1.2 植物材料 | 第21页 |
| 2.1.1.3 工程菌株、试剂和培养基 | 第21页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第21-22页 |
| 2.1.3 实验方法 | 第22-25页 |
| 2.1.3.1 构建RNAi重组质粒库 | 第22页 |
| 2.1.3.2 构建RNAi突变体库 | 第22页 |
| 2.1.3.3 拟南芥T0代种子筛选 | 第22-23页 |
| 2.1.3.4 阳性苗鉴定 | 第23页 |
| 2.1.3.5 耐受极限高温拟南芥RNAi突变体的筛选 | 第23-24页 |
| 2.1.3.6 拟南芥耐极端高温目的基因的克隆 | 第24-25页 |
| 2.1.4 拟南芥表型分析 | 第25-26页 |
| 2.1.4.1 材料种植 | 第26页 |
| 2.1.4.2 高温处理植株 | 第26页 |
| 2.2 拟南芥突变体与棉花大丽轮枝菌互作分析 | 第26-27页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第26页 |
| 2.2.2 实验器材 | 第26页 |
| 2.2.3 实验方法 | 第26-27页 |
| 2.2.3.1 棉花大丽轮枝菌的培养 | 第26-27页 |
| 2.2.3.2 拟南芥的种植 | 第27页 |
| 2.2.3.3 致病性检测 | 第27页 |
| 2.3 拟南芥突变体与玉米灰葡萄孢菌互作分析 | 第27-28页 |
| 2.3.1 实验材料 | 第27页 |
| 2.3.2 实验器材 | 第27页 |
| 2.3.3 实验方法 | 第27-28页 |
| 2.3.3.1 玉米灰葡萄孢菌的培养 | 第27页 |
| 2.3.3.2 拟南芥的种植 | 第27页 |
| 2.3.3.3 致病检测 | 第27-28页 |
| 2.4 拟南芥突变体与茄病镰刀菌互作分析 | 第28页 |
| 2.4.1 实验材料 | 第28页 |
| 2.4.2 实验器材 | 第28页 |
| 2.4.3 实验方法 | 第28页 |
| 2.4.3.1 茄病镰刀菌的培养 | 第28页 |
| 2.4.3.2 拟南芥的种植 | 第28页 |
| 2.4.3.3 致病检测 | 第28页 |
| 2.5 拟南芥突变体与大豆核盘菌互作分析 | 第28-29页 |
| 2.5.1 实验材料 | 第28-29页 |
| 2.5.2 实验器材 | 第29页 |
| 2.5.3 实验方法 | 第29页 |
| 2.5.3.1 大豆核盘菌的培养 | 第29页 |
| 2.5.3.2 拟南芥的种植 | 第29页 |
| 2.5.3.3 致病检测 | 第29页 |
| 2.6 拟南芥突变体与小麦赤霉孢菌互作分析 | 第29-30页 |
| 2.6.1 实验材料 | 第29页 |
| 2.6.2 实验器材 | 第29页 |
| 2.6.3 实验方法 | 第29-30页 |
| 2.6.3.1 小麦赤霉孢菌的培养 | 第29-30页 |
| 2.6.3.2 拟南芥的种植 | 第30页 |
| 2.6.3.3 致病检测 | 第30页 |
| 2.7 DAB和台盼蓝双染色致病性检测 | 第30-31页 |
| 2.7.1 溶液配制 | 第30页 |
| 2.7.2 实验方法 | 第30-31页 |
| 2.7.3 镜检 | 第31页 |
| 2.8 拟南芥突变体植株非生物胁迫基因功能分析 | 第31-34页 |
| 2.8.1 重金属盐氯化镉胁迫 | 第31页 |
| 2.8.1.1 实验材料 | 第31页 |
| 2.8.1.2 实验方法 | 第31页 |
| 2.8.2 重金属盐硝酸铅胁迫 | 第31-32页 |
| 2.8.2.1 实验材料 | 第31-32页 |
| 2.8.2.2 实验方法 | 第32页 |
| 2.8.3 人工模拟干旱胁迫 | 第32页 |
| 2.8.3.1 实验材料 | 第32页 |
| 2.8.3.2 实验方法 | 第32页 |
| 2.8.4 氯化钠高盐胁迫 | 第32-34页 |
| 2.8.4.1 实验材料 | 第32页 |
| 2.8.4.2 实验方法 | 第32-34页 |
| 3 结果分析 | 第34-49页 |
| 3.1 拟南芥RNAi突变体库阳性苗的筛选与检测 | 第34-35页 |
| 3.1.1 阳性苗筛选 | 第34页 |
| 3.1.2 GUS染色鉴定 | 第34-35页 |
| 3.2 拟南芥耐极端高温RNAi突变体的筛选 | 第35-36页 |
| 3.2.1 拟南芥RNAi突变体阳性苗筛选 | 第35页 |
| 3.2.2 拟南芥RNAi突变体GUS染色鉴定 | 第35-36页 |
| 3.3 拟南芥耐极端高温目的基因的克隆 | 第36-37页 |
| 3.3.1 PCR检测 | 第36页 |
| 3.3.2 目的基因菌液PCR检测 | 第36-37页 |
| 3.3.3 拟南芥耐极端高温RNAi突变体目的基因的克隆 | 第37页 |
| 3.4 拟南芥RNAi突变体at234植株表型分析 | 第37-38页 |
| 3.5 拟南芥RNAi突变体at234植株与棉花大丽轮枝菌互作分析 | 第38-40页 |
| 3.6 拟南芥RNAi突变体at234植株与玉米灰葡萄孢菌互作分析 | 第40-41页 |
| 3.7 拟南芥RNAi突变体at234植株与茄病镰刀菌互作分析 | 第41-43页 |
| 3.8 拟南芥RNAi突变体at234植株与大豆核盘菌互作分析 | 第43-44页 |
| 3.9 拟南芥RNAi突变体at234植株与小麦赤霉孢菌互作分析 | 第44-45页 |
| 3.10 非生物胁迫下基因功能验证和at234突变体植株表型分析 | 第45-49页 |
| 3.10.1 重金属盐氯化镉胁迫 | 第45-46页 |
| 3.10.2 重金属盐硝酸铅胁迫 | 第46-47页 |
| 3.10.3 人为模拟干旱胁迫 | 第47页 |
| 3.10.4 氯化钠高盐胁迫 | 第47-49页 |
| 4 结果与讨论 | 第49-51页 |
| 5 展望 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-60页 |
| 个人简介 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
