论文目录 | |
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-19页 |
| 1.1 生长素极性运输的研究 | 第11-12页 |
| 1.2 AUX1/LAX蛋白的研究 | 第12-13页 |
| 1.3 PIN蛋白的研究 | 第13-17页 |
| 1.3.1 PIN蛋白结构分析 | 第13页 |
| 1.3.2 PIN基因表达模式及功能研究 | 第13-15页 |
| 1.3.3 PIN蛋白表达调控研究 | 第15-16页 |
| 1.3.4 PIN蛋白内吞及循环研究 | 第16-17页 |
| 1.4 研究的目的与意义 | 第17-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 菌株及载体 | 第19页 |
| 2.1.3 酶与化学试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.4 实验所用仪器 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-34页 |
| 2.2.1 PtoPIN2a和PtoPIN5a基因结构及编码蛋白跨膜域分析 | 第20页 |
| 2.2.2 聚类分析 | 第20-21页 |
| 2.2.3 RNA的提取 | 第21-22页 |
| 2.2.4 第一链cDNA的合成 | 第22-23页 |
| 2.2.5 组织半定量分析 | 第23-24页 |
| 2.2.6 杨树基因组DNA提取 | 第24-25页 |
| 2.2.7 载体的构建 | 第25-29页 |
| 2.2.7.1 目的片段的克隆 | 第25-26页 |
| 2.2.7.2 扩增片段胶回收 | 第26-27页 |
| 2.2.7.3 Gateway入门载体的构建 | 第27页 |
| 2.2.7.4 大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第27-28页 |
| 2.2.7.5 质粒提取 | 第28-29页 |
| 2.2.7.6 Gateway表达载体的构建 | 第29页 |
| 2.2.8 农杆菌转化 | 第29-30页 |
| 2.2.9 农杆菌菌株阳性鉴定 | 第30页 |
| 2.2.10 根癌农杆菌介导的叶盘法转化银腺杨无性系84K | 第30-32页 |
| 2.2.11 转基因植株GUS组织化学染色定位 | 第32页 |
| 2.2.12 花浸法转化拟南芥 | 第32-33页 |
| 2.2.13 转基因拟南芥筛选 | 第33页 |
| 2.2.14 烟草叶片注射 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-53页 |
| 3.1 基因结构和蛋白基本信息的分析 | 第34-36页 |
| 3.1.1 PtoPIN2a和PtoPIN5a基因结构及蛋白跨膜域分析 | 第34-35页 |
| 3.1.2 PtoPIN2a和PtoPIN5a聚类分析 | 第35-36页 |
| 3.2 PTOPIN2A和PTOPIN5A基因表达模式分析 | 第36-40页 |
| 3.2.1 PtoPIN2a和PtoPIN5a基因在不同组织和器官中的半定量分析 | 第36页 |
| 3.2.2 PtoPIN2a和PtoPIN5a启动子表达分析 | 第36-40页 |
| 3.2.2.1 PtoPIN2a和PtoPIN5a启动子组织表达载体的构建 | 第36-38页 |
| 3.2.2.2 转基因植株检测 | 第38-39页 |
| 3.2.2.3 转基因植株GUS活性分析 | 第39-40页 |
| 3.3 PTOPIN2A和PTOPIN5A亚细胞定位分析 | 第40-45页 |
| 3.3.1 PtoPIN2a和PtoPIN5a亚细胞定位载体的构建 | 第40-42页 |
| 3.3.2 转基因植株检测 | 第42-43页 |
| 3.3.3 亚细胞定位分析 | 第43-45页 |
| 3.4 PTOPIN2A和PTOPIN5A过表达分析 | 第45-49页 |
| 3.4.1 PtoPIN2a和PtoPIN5a过表达载体的构建 | 第45-46页 |
| 3.4.2 PtoPIN2a和PtoPIN5a过表达植株的鉴定与表型分析 | 第46-49页 |
| 3.4.2.1 PtoPIN2a过表达转基因植株的检测与分析 | 第46-47页 |
| 3.4.2.2 PtoPIN5a过表达转基因植株的检测与分析 | 第47-49页 |
| 3.5 PTOPIN2A和PTOPIN5A抑制表达分析 | 第49-53页 |
| 3.5.1 PtoPIN2a和PtoPIN5a抑制表达载体的构建 | 第49-50页 |
| 3.5.2 PtoPIN2a和PtoPIN5a抑制表达植株的检测与表型分析 | 第50-53页 |
| 3.5.2.1 PtoPIN2a抑制表达转基因植株的检测与分析 | 第50-51页 |
| 3.5.2.2 PtoPIN5a抑制表达转基因植株的检测与分析 | 第51-53页 |
| 4 讨论及展望 | 第53-56页 |
| 4.1 讨论 | 第53-55页 |
| 4.1.1 PtoPIN2a表达模式及功能分析 | 第53-54页 |
| 4.1.2 PtoPIN5a表达模式及功能分析 | 第54-55页 |
| 4.2 展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
